對比培養法和PCR法檢測泌尿生殖道感染患者解脲脲原體的比較研究

雷星　田松婭　雷英俊

【摘? 要】目的：比較聚合酶鏈式反應（PCR法）和培養法在泌尿生殖道感染患者解脲脲原體檢測中的診斷價值。方法：觀察對象為我院婦科、男性科從2018年6月到2019年6月間就診的、疑似為非淋球菌性尿道炎患者128例，采集所有患者尿道或者是宮頸拭子同時進行解脲脲原體的液體培養和PCR法檢測，評估兩種方法的檢測結果。結果：128例患者中，解脲脲原體真陽性患者37例，女性感染率81.1%明顯高于男性感染率18.9%（P<0.05）;PCR法檢測的特異度98.9%、靈敏度100.0%均高于培養法的94.9%、61.2%，且靈敏度數據間的差異檢驗存在統計學意義（P<0.05）。結論：PCR法與培養法都能用來檢測解脲脲原體，但PCR法較之于培養法有更高的靈敏度。

【關鍵詞】聚合酶鏈式反應;培養法;泌尿生殖道感染;解脲脲原體

【中圖分類號】R691.3????? 【文獻標識碼】A????? 【文章編號】1004-7484（2019）06-0060-01

解脲脲原體屬于原核細胞型的微生物，和不育癥、圍產期感染與泌尿生殖道感染的發生都密切聯系[1]，同時也是性傳播疾病的一個關鍵病原體[2]。近些年在臨床上，由于解脲脲原體所導致泌尿生殖道感染發生率愈漸提高，受到臨床學者的廣為關注。我們認為，對疑似患者做解脲脲原體檢測意義重大。培養法是檢測解脲脲原體的傳統方法，隨著研究的深入，PCR法也被逐漸的應用到臨床檢測中，本文便對其應用價值進行分析。

1資料來源和方法

1.1標本來源

觀察對象為我院婦科、男性科從2018年6月到2019年6月間就診的、疑似為非淋球菌性尿道炎患者128例，其中男性患者57例、女性患者71例，患者年齡最小的是17歲、最大的是59歲，平均年齡為38.2±2.7歲，病程從1周到3周不等，平均病程為2.1±0.3周。所有男性患者皆有輕度的尿急、尿頻和尿道刺癢感表現，部分患者尿道口殘留有稀薄分泌物，女性患者則有外陰瘙癢、下腹不適、白帶增多等癥狀表現。排除掉近十天內有抗生素、磺胺類藥物服用史者。

1.2方法

先進行標本的采集。叮囑受檢者于采樣前2h內不能排尿。

男性：先用滅菌鹽水清潔尿道口，將男性用無菌拭子伸入尿道2-3cm，用力旋轉1-2圈，取出拭子;

女性：先清潔宮頸口過多的分泌物，將女性用無菌拭子伸入宮頸內2-3cm，用力旋轉1-2圈，取出拭子，取出的分泌物應略帶粘膜。

1.2.1PCR法

往樣品收集管中加入1ml無菌生理鹽水，充分震蕩混勻，然后把全部液體倒入1.5ml的滅菌離心管中，棉拭子靠近離心管壁擠干后丟棄。取所得溶液，以12000rpm持續離心5分鐘，除去上清液，于沉淀中摻入50ul的DNA提取液，混合均勻后，靜置10分鐘左右，將5ul上清液加入到含有解脲脲原體的Taq中做PCR反應。

1.2.2培養法

收集到的標本拭子插進培養瓶，于接近液面上方的瓶壁處反復擠壓、旋轉拭子，促使拭子中的樣本有效滲入到培養瓶中。混合均勻之后，取100ul加入檢測卡的各孔位中，滴2滴無菌礦物油，蓋上蓋，于35～37℃的環境下孵箱培養。48h后，若培養液顏色無改變，判斷為陰性，若培養基顏色由黃色變至紅色，判斷為陽性。

1.3判斷結果

①真陽性為：2種及2種以上的檢測所得結果皆為陽性;②真陰性為：2種及2種以上的檢測所得結果皆為陰性;③靈敏度為：真陽性例數/（真陽性例數+假陰性例數）×100.0%;④特異度為：真陰性例數/（真陰性例數+假陽性例數）×100.0%。

1.4統計方法

本次研究所有資料均由同一人錄入到EXCEL，保證資料準確、無誤。將數據建立的EXCEL數據庫導入SPSS20.0軟件，用±s來代表計量資料，行t檢驗，P<0.05認定為差異存在顯著性。

2結果

2.1檢測結果分析

128例患者中，解脲脲原體真陽性患者37例，占28.9%，男7例、女30例，分別占18.9%、81.1%，兩者差異比較存在統計學意義（x2=28.595，P<0.05）。

2.2培養法和PCR法檢測結果對比

由下表1中數據結果可見，PCR法檢測的特異度98.9%、靈敏度100.0%均高于培養法的94.9%、61.2%，且靈敏度數據間的差異檢驗存在統計學意義（P<0.05）。

3討論

培養法和PCR法都是臨床檢測解脲脲原體的常用方法，其中培養法的操作簡單，同時還能做藥敏試驗，適用于基層醫院，但樣品中易混入其它微生物比如說念珠菌、變形桿菌等，可能會使假陽性結果提高[3]。PCR法則能快速、精準且靈敏的檢出病原體中DNA，可有效避免由于污染而導致的假陽性，能更靈敏和精準的反應出病原體感染情況，有一定技術條件的醫院都能開展[4、5]。結合本文研究結果來看：PCR法檢測的特異度98.9%、靈敏度100.0%均高于培養法的94.9%、61.2%，且靈敏度數據間的差異檢驗存在統計學意義（P<0.05）。可見，這兩種方法都能用來檢測解脲脲原體，但PCR法較之于培養法有更高的靈敏度，建議在實驗室條件較佳的醫療機構著重推廣使用。

參考文獻：

[1]張欠欠，仵恒立，胡軍婷等.熒光定量PCR檢測淋球菌、沙眼衣原體和解脲脲原體結果分析[J].中國人獸共患病學報，2016，32（3）：312-314.

[2]張艷，華川，李蘇利等.解脲脲原體生物群分布與耐藥性差異研究[J].中國人獸共患病學報，2016，32（1）：45-50.

[3]胡盛君.泌尿生殖道感染病原體的核酸鑒定[J].內蒙古中醫藥，2014，33（21）：53.

[4]黃會，趙香依，吳多榮等.熒光定量PCR檢測女性生殖道解脲脲原體原體的應用評價[J].海南醫學，2015，27（18）：2720-2722.

[5]金寧，劉文力，楊琳等.泌尿生殖道炎細小脲原體PCR檢測結果臨床研究[J].中國中西醫結合皮膚性病學雜志，2015，14（5）：304-307.