山羊環狀RNA circ_ZCCHC24 表達載體的構建及對顆粒細胞增殖的影響

陶 虎 ，張 元，楊 娟，張 年，熊 琪，劉 洋，陳明新*

（1.湖北省農業科學院畜牧獸醫研究所/動物胚胎工程及分子育種湖北省重點實驗室，湖北武漢 430064；2.黃岡市農業科學院，湖北黃岡 438000）

羊屬于少胎動物，母羊的繁殖力是決定養羊產業效益的最重要因素之一，提高母羊繁殖性能在育種工作中尤為重要[1]。我國山羊產業規模化和集約化程度相對較低，關于山羊繁殖性狀遺傳規律的研究有限，限制了山羊繁殖性狀的選育提高。

環狀RNA（circular RNA，circRNA）是一類新型的內源性非編碼RNA，它是在mRNA 前體（pre-mRNA）剪切過程中，外顯子和（或）內含子以反向剪切形式連接的磷脂鍵，最終以共價閉合形態存在的環狀RNA 分子[2-3]。circRNA具有環狀穩定結構和組織表達特異性等特性[4-5]。目前，circRNA 的研究多集中于醫學方面[6-7]，在家畜中研究較少，尤其在家畜繁殖性狀中的研究還處于初始階段。circRNA 主要通過與RNA 結合蛋白結合形成RNA-蛋白復合物，調控線性親本基因的轉錄[8]；吸附miRNA調控基因的表達[2]。近年來，有研究發現circRNA 能夠編碼蛋白質，發揮生物學功能[9-10]。circRNA 調控卵泡發育的研究較為有限。有報道顯示，circRNA-3175 通過調控TESTIN基因抑制奶山羊子宮內膜上皮細胞凋亡[11]。Capel 等[12]在小鼠精子決定基因SRY中發現了circRNA，并且SRY 也被證實可以吸附miR-138 從而發揮“miRNA 海綿”作用[13]。circRNA 具有重要的調控功能，因此circRNA 已成為新的非編碼RNA 研究領域的熱點。近年來對于circRNA 的研究日益增多，但對circ_ZCCHC24在山羊卵泡中的作用機制還未見詳細研究。本研究以前期通過轉錄組測序分析得到的circ_ZCCHC24為研究對象，通過構建其真核表達載體，研究circ_ZCCHC24對山羊卵泡顆粒細胞增殖的調控作用，為揭示circ_ZCCHC24對山羊卵泡發育的遺傳調控機理提供理論依據。……