化學(xué)發(fā)光免疫法檢測腫瘤標(biāo)志物CA199及AFP對原發(fā)性肝癌的診斷價(jià)值

楊 麗

(鄭州市第七人民醫(yī)院，河南鄭州 450000）

肝癌為臨床常見的發(fā)病率和死亡率均較高的惡性腫瘤之一，在各種癌癥致死率中排第二位[1]。有調(diào)查發(fā)現(xiàn)，我國每年新發(fā)肝癌人數(shù)約25萬，嚴(yán)重危害著國民的生命健康[2]。由于肝癌早期無明顯癥狀，多數(shù)發(fā)現(xiàn)時(shí)腫瘤已發(fā)展至中晚期，治療困難且預(yù)后差。檢測血清腫瘤標(biāo)志物是目前臨床診斷肝癌的重要方法之一，而在血清腫瘤標(biāo)志物的檢測方法中，化學(xué)發(fā)光免疫法是應(yīng)用較為廣泛的一種。為證實(shí)化學(xué)發(fā)光免疫法在肝癌診斷中的應(yīng)用價(jià)值，本研究以54例原發(fā)性肝癌患者和50例肝臟良性病變患者作為研究對象，探討了化學(xué)發(fā)光免疫法檢測腫瘤標(biāo)志物糖類抗原19（9CA199）、甲胎蛋白（AFP）診斷原發(fā)性肝癌的價(jià)值。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2018年2月-2019年1月我院54例原發(fā)性肝癌患者納入肝癌組，并取同期50例肝臟良性病變患者作為對照，為良性病變組。肝癌組男40例，女14例，年齡40～78歲，平均（58.73±8.55）歲；良性病變組（單純性肝囊腫23例，局灶性結(jié)節(jié)增生11例，肝血管瘤10例，炎癥性病變6例）男31例，女19例，年齡37～77歲，平均（57.69±9.41）歲。兩組性別、年齡比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

1.2 檢測方法和判斷標(biāo)準(zhǔn) 在清晨空腹?fàn)顟B(tài)下，采集兩組受試者靜脈血5ml，并于不加抗凝劑的條件下分離血清，使用BHP 9507型全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀（購自西門子公司）檢測血清腫瘤標(biāo)志物CA199和AFP的水平，嚴(yán)格依據(jù)說明書進(jìn)行操作。CA199、AFP的正常值分別為CA199≤39U/L、AFP≤20μg/L，超過正常值范圍即判斷為陽性。

1.3 統(tǒng)計(jì)分析 利用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)軟件處理數(shù)據(jù)資料。計(jì)數(shù)資料用（%）表示，行Fisher精確檢驗(yàn)；計(jì)量資料用（±s）表示，兩兩比較采用t檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。以ROC曲線確定CA199、AFP診斷原發(fā)性肝癌的最佳截?cái)帱c(diǎn)，并計(jì)算靈敏度、特異度和準(zhǔn)確度。

2 結(jié)果

2.1 兩組受試者血清CA199、AFP水平比較 肝癌組血清CA199和AFP水平均明顯高于良性病變組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表1：

表1 兩組受試者血清CA199、AFP水平比較（± s ）

表1 兩組受試者血清CA199、AFP水平比較（± s ）

組別例數(shù)CA199（U/ml）AFP（μg/L）肝癌組 54 108.73±47.22 319.45±146.78良性病變組 50 25.51±9.47 37.20±15.16 12.232 13.526 P＜0.05 ＜0.05 t

2.2 兩組受試者血清CA199、AFP陽性率比較 肝癌組CA199、AFP陽性率均顯著高于良性病變組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表2：

表2 兩組受試者血清CA199、AFP陽性率比較[n(%)]

2.3 CA199、AFP診斷原發(fā)性肝癌的ROC曲線 血清CA199、AFP診斷原發(fā)性肝癌的ROC曲線見附圖。CA199、AFP曲線下面積（AUC）分別為0.889、0.857。根據(jù)ROC曲線，CA199、AFP診斷原發(fā)性肝癌的最佳截?cái)帱c(diǎn)分別為76.91U/ml、207.84μg/L，二者診斷原發(fā)性肝癌的靈敏度分別為79.63%、85.19%，特異度均為84.00%。

附圖 血清CA199、AFP診斷原發(fā)性肝癌的ROC曲線

2.4 血清CA199、AFP單獨(dú)檢測及聯(lián)合檢測對原發(fā)性肝癌診斷效能比較 血清CA199與AFP聯(lián)合檢測診斷原發(fā)性肝癌的準(zhǔn)確度均明顯高于血清CA199、AFP單獨(dú)檢測（P＜0.05），靈敏度和特異度與血清CA199、AFP單獨(dú)檢測差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見表3：

表3 血清CA199、AFP單獨(dú)檢測及聯(lián)合檢測對原發(fā)性肝癌診斷效能比較

3 討論

原發(fā)性肝癌為發(fā)生于肝臟的惡性腫瘤，發(fā)病原因多樣，主要包括肝炎病毒感染、黃曲霉素感染、酗酒、肝臟代謝疾病等，但確切的發(fā)病機(jī)制暫無明確結(jié)論[3-4]。血清腫瘤標(biāo)志物水平檢測為原發(fā)性肝癌重要的診斷項(xiàng)目，其檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性有助于指導(dǎo)醫(yī)生治療，改善患者預(yù)后。

現(xiàn)階段，臨床檢測患者血清腫瘤標(biāo)志物的方法較多，其中使用度較高的為化學(xué)發(fā)光免疫法。該方法是上世紀(jì)80年代興起的一種免疫測定技術(shù)，實(shí)現(xiàn)了定性與定量的結(jié)合，具有高靈敏度及高特異性，與熒光免疫、酶聯(lián)免疫等技術(shù)比較更加先進(jìn)[5-6]。化學(xué)發(fā)光免疫法的檢測原理與放射免疫分析、酶聯(lián)免疫吸附法相似，但也有不同之處：化學(xué)發(fā)光免疫法是以發(fā)光物質(zhì)為檢測標(biāo)記物，通過足量標(biāo)記抗體與有限已知抗原及待測物進(jìn)行非競爭性結(jié)合來檢測待檢物水平。隨著檢驗(yàn)技術(shù)與設(shè)備的不斷改進(jìn)，化學(xué)發(fā)光免疫法在臨床中的應(yīng)用（如激素檢測、腫瘤標(biāo)志物檢測等）越來越廣泛，被認(rèn)為是一種高效、穩(wěn)定且可靠的臨床檢測技術(shù)，得到了眾多醫(yī)學(xué)研究的認(rèn)可。化學(xué)發(fā)光免疫法的優(yōu)勢主要有以下幾點(diǎn)[7-8]：⑴該方法屬于超微量分析方法，與其它檢測方法比較檢測速率可提高約3～8倍，能夠明顯縮短檢測時(shí)間，保證檢測樣本質(zhì)量，并且能減少人為誤差，提高檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性；⑵該方法采用同位素標(biāo)記法，標(biāo)記未使用致癌物質(zhì)，有效避免了放射性污染，且標(biāo)記物與試劑盒的有效時(shí)間均較長，有利于維持檢測過程中的穩(wěn)定性；⑶該方法實(shí)現(xiàn)了定量分析與定性分析的結(jié)合，且操作簡便，基本能夠?qū)崿F(xiàn)自動(dòng)化操作。

本研究采用化學(xué)發(fā)光免疫法檢測了原發(fā)性肝癌患者、肝臟良性病變患者血清腫瘤標(biāo)志物CA199和AFP水平，以期為原發(fā)性肝癌的診斷提供依據(jù)。AFP主要來自胚胎肝細(xì)胞，可促進(jìn)腫瘤細(xì)胞生長增殖、抑制免疫功能和誘導(dǎo)淋巴細(xì)胞凋亡，正常情況下血清AFP的水平極低，但當(dāng)肝臟病變發(fā)展至肝癌時(shí)，AFP的功能恢復(fù)，隨著病情惡化AFP的水平迅速升高且變化幅度大，因此，既往臨床一直將AFP作為原發(fā)性肝癌的特異性標(biāo)志物[9]。但有相關(guān)報(bào)道指出[10-11]，部分肝硬化而不具有肝癌跡象的患者血清AFP水平也會(huì)升高，且較長時(shí)間內(nèi)均處于高水平；另外，部分肝癌晚期患者AFP的水平持續(xù)較低，甚至AFP為陰性，因此AFP并不能完全作為原發(fā)性肝癌的確診指標(biāo)。CA199是一種粘蛋白型糖類蛋白，以唾液粘蛋白的形式存在于血液中，一般情況下血清中的水平較低，但發(fā)生癌性病變時(shí)，尤其是胰腺癌和肝膽癌，其血清含量會(huì)顯著升高[12-13]。本研究結(jié)果顯示，肝癌組血清CA199和AFP水平及陽性率均明顯高于良性病變組，提示血清CA199和AFP對鑒別肝臟疾病具有一定作用。本研究進(jìn)一步繪制了ROC曲線分析CA199、AFP對原發(fā)性肝癌的診斷效能，顯示在最佳截?cái)帱c(diǎn)時(shí)血清CA199、AFP診斷原發(fā)性肝癌的靈敏度分別為79.63%、85.19%，特異度均為84.00%，說明CA199、AFP對原發(fā)性肝癌均有較好的診斷效果。同時(shí)，本研究還顯示，血清CA199和AFP聯(lián)合檢測診斷原發(fā)性肝癌的準(zhǔn)確度為93.27%，均明顯高于CA199（81.73%）或AFP（84.62%）單獨(dú)檢測，提示聯(lián)合檢測血清CA199和AFP診斷原發(fā)性肝癌的效能更佳。

綜上所述，與CA199、AFP單獨(dú)檢測比較，采用化學(xué)發(fā)光免疫法聯(lián)合檢測CA199、AFP診斷原發(fā)性肝癌的效能更優(yōu)。