竭紅跌打巴布劑中血竭素的含量測定

葉星辰 班俊峰 呂竹芬 陳燕忠 黃思玉

（廣東藥科大學 廣東省藥物新劑型重點實驗室，廣東 廣州 510006）

“竭紅跌打酊”是由龍血竭、紅花、當歸等10種中藥材組成的復方制劑，具有顯著的消腫鎮痛，活血化瘀作用，對機體軟組織損傷有獨特療效[1-2]。根據前期研究制備的竭紅凝膠膏劑改善了原制劑因酒精含量高對皮膚產生的不良反應，具有重要意義。方中血竭由棕櫚科植物麒麟竭果實滲出的樹脂經加工制成[3]，具有止血與活血、抗微生物和抗病毒活性、鎮痛、抗氧化、抗炎、傷口愈合等廣泛的藥理作用[4]。本文采用HPLC法對制劑中的血竭素進行含量測定，方法簡便可行。

1 儀器與試藥

高效液相色譜儀（Dionex Ultimate 3000 Pump，Ultimate 3000 Photodiode Array Detector，德國Dionex corp），CP225D型電子天平（北京賽多利斯儀器系統有限公司），KQ-100型超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司），血竭素高氯酸鹽對照品（中國藥品生物制品檢定所，批號：10811-200704），竭紅跌打巴布劑（自制），乙腈（色譜純），其他試劑均為分析純。

2 方法與結果

2.1 色譜條件：色譜柱Kromasil C18柱（5 μm，4.6×250 mm）；以乙腈-0.05m ol/L磷酸二氫鈉溶液（50∶50）為流動相；流速1.0 mL/min，進樣10 μL，等度洗脫22 min，采用檢測波長為440 nm；柱溫40 ℃。理論板數按血竭素峰計算3000。

2.2 溶液的制備

2.2.1 對照品溶液的制備：將血竭素對照品置于干燥器中36 h，充分干燥后精密稱取對照品適量，置于10 mL棕色量瓶中，加3%磷酸甲醇溶液溶解、定容。精密量取所得溶液1 mL，于25 mL棕色量瓶中，以甲醇定容。

2.2.2 供試品溶液的制備：精密稱定竭紅巴布劑膏體適量置燒杯中，加3%的磷酸甲醇溶液研勻，超聲10 min，放至室溫后轉移置50 mL棕色量瓶中，用3%的磷酸甲醇溶液定容；精密量取溶液2 mL置5 mL棕色量瓶中，用甲醇定容，0.45 μm微孔濾膜過濾，取續濾液即得。

2.2.3 空白對照液的制備：取缺血竭的膏體，按2.2.2項下方法制備，作為陰性對照樣品。

2.3 專屬性考察：按2.1項下方法，分別取對照品溶液、供試品溶液和陰性對照溶液測定，結果見圖1。可知供試品溶液中血竭素峰的保留時間與血竭素對照品的一致，而陰性對照液在出峰范圍內沒有干擾，說明測定的專屬好。

圖1 對照品、樣品、陰性樣品HPLC色譜圖

2.4 標準曲線的繪制：分別吸取對照品溶液5、10、15、20、25 μL，注入色譜儀中，以峰面積值和進樣體積作線性回歸，得到回歸方程為：Y=0.0271+0.1414x（r=0.9999），說明血竭素對照品進樣量在0.0452～0.2260 μg/mL范圍內有很好的線性關系。

2.5 精密度考察：依2.1項下方法，精密吸取同一濃度的供試品溶液，連續進樣6次，測定血竭素的峰面積。計算得RDS為0.87%。

2.6 穩定性考察：根據2.1項下方法精密吸取供試品溶液，于0、2、4、6、8、10、12 h重復進樣測定，計算得血竭素峰面積RSD=4.34%。可知在12 h內溶液的穩定性良好。

2.7 重復性試驗：按2.2.2項下方法以同一批樣品制備供試品溶液6份，按2.1項下方法測定峰面積，計算得RDS值為4.7%，重復性良好。

2.8 加樣回收率：精密稱取已知血竭素含量的樣品6份，根據2.2.2項下方法制成供試品溶液，分別精密加入適量血竭素對照品溶液。按2.1項下方法進樣，測定樣品中血竭素含量。結果得平均回收率為99.08%，RSD=3.13%。

2.9 樣品含量的測定：按2.2.2項下方法，取3個不同批次的巴布劑樣品制備樣品溶液，按2.1項下方法進樣。見表1。

3 討 論

竭紅巴布劑處方藥味多，成分復雜多樣。龍血竭具有散瘀止痛，收斂止血，生肌斂瘡之功效，用于跌打損傷、閉經痛經、外傷出血等多種疾病的治療。

本研究建立了竭紅跌打巴布劑中血竭素含量的HPLC測定方法，該法簡便、結果準確，具有較好的穩定性、精密度、重復性，陰性無干擾[5-7]。可用于竭紅巴布劑的質量控制，也為龍血竭質量標準的提升進行了有益的探索。

表1 樣品中血竭素的含量測定結果