瑤藥銅鉆（定心藤）化學成分及藥理作用研究進展＊

潘祥龍，郝二偉＊＊，韋 瑋，謝金玲，秦健峰，杜正彩，候小濤，鄧家剛

（1.廣西中醫藥大學藥學院 南寧 530001；2.廣西中醫藥大學廣西中藥藥效研究重點實驗室南寧 530001；3.廣西農作物廢棄物功能成分研究協同創新中心 南寧 530200）

銅鉆來源于茶茱萸科植物定心藤Mappianthus iodoides Hand.-Mazz.根、莖，為瑤藥老班藥“五虎、九牛、十八鉆、七十二風”之一，又名定心藤、藤蛇總管、買撇花藤、甜果藤、黃九牛、黃馬胎和假丁公藤，主要分布于廣西、廣東、海南、云南及越南北部等地區，常見于疏林、灌叢及溝谷林內。其味微苦、澀，性平，歸肝、膽經，具有祛風除濕，痛經活絡，活血調經，止痛之功效，民間常用來治療黃疸型肝炎，類風濕性關節炎，風濕痹痛，月經不調，痛經，跌打損傷，癰瘡，毒蛇咬傷等[1,2]。瑤醫認為“鉆”類藥物性能強勁鉆透、通達經絡、透利關節，多為行氣止痛、散瘀消腫藥，是瑤族傳統治癌“打藥”[3,4]。目前，已有研究報道對銅鉆藥材中蒲公英賽酮、蒲公英賽醇、香草酸和香草醛的化學成分進行定性定量，制定其質量標準以及生藥的鑒定[5,6]。現代藥理研究表明，銅鉆具有多種藥理活性，如保護心血管、降血脂、抗腫瘤、抗氧化及清除自由基、抗炎鎮痛等作用。本文查閱并整理近年來國內外文獻資料，對銅鉆的化學成分及藥理作用等進行綜述，以期為其深入研究提供參考依據。

1 化學成分

現有文獻報道，銅鉆（定心藤）中化學成分主要包括木脂素類、黃酮類、萜類、甾體類、有機酸類、生物堿類等化合物。

1.1 木脂素類化合物

蔣芝華等[7-9]從定心藤植物中首次分離出8個木脂素類化合物，經過鑒定為落葉松樹脂醇[(+)-lariciresinol，1]、異落葉松樹脂素（isolariciresinol，2）、5'-甲氧基落葉松樹脂醇（5'-methoxylaricirecinol，3）、橄欖樹脂素（olivil，4）、去氫雙松柏醇（dehydrodiconiferyl alcohol，5）、chushizisin I(6)[10]、3,3-didemethoxyverrucosin(7)[11]、4-epi-larreatricin(8)。木脂素類化合物結構式（圖1）。

圖1 木脂素類化合物結構式

1.2 黃酮類化合物

黃酮類化合物廣泛分布于多種植物中，是一類具有廣泛活性、研究較為深入的重要化合物[12,13]。目前，已從定心藤莖中分離出3 個黃酮類物質，分別為蘆丁（rutin，9）[14]，槲皮素（quercetin，10）[15]，白楊素（chrysin，11）[16]。黃酮類化合物結構式（圖2）。

圖2 黃酮類化合物結構式

1.3 萜類化合物

萜類是異戊二烯的聚合物及其衍生物的總稱，具有多種生物活性[17]。蔣芝華等[9]運用正反相硅膠柱色譜及Sephadex LH-20 凝膠柱色譜方法從定心藤莖90%乙醇提取物中分離出7 個降碳倍半萜類化合物，經過鑒定為9-hydroxy-4,6-megastigmadien-3-one(12)、9-hydroxy-4,7-megastigmadien-3-one(13)、9,10-dihydroxy-4,7-megastigmadien-3-one(14)、5,12-epoxy-9-hydroxy-7-megastigmen-3-one(15)、blumenol A(16)、黑麥草內酯（loliolide，17）、5,12-epoxy-6,9-hydroxy-7-megastigmen-3-one(18)。陳承聲等[18,19]從定心藤莖中分離出一種新倍半萜醇，通過波譜分析和旋光數據比較確定其為(-)-雪松醇[(-)-cedrol，19]。此外，卞理等[20,21]從該植物中分離出蒲公英賽酮（taraxerone，20），蒲公英賽醇（taraxerol，21）。萜類化合物結構式（圖3）。

1.4 甾體類化合物

定心藤中含有的甾體類化合物包括：β-谷甾醇（β-sitosterol，22）[15]，β-胡蘿卜苷（daucosterol，23）[15]，豆甾醇-3β-葡萄糖苷（stigmasterol-3β-glucoside，24）[22]，豆甾醇-3-O-β-D-葡萄糖苷（stigmasterol-3-O-β-Dglucopyranoside，25）[23,24]。甾體類化合物結構式（圖4）。

1.5 有機酸類化合物

圖3 萜類化合物結構式

圖4 甾體類化合物結構式

有機酸類成分具有抗腫瘤、抗血栓、抑菌、抗艾滋病毒等廣泛的生物活性，具有很大的研究和開發潛力[25]。目前，曾立等[26,27]從定心藤莖中分離出有機酸及酚類化合物，分別為棕櫚酸甲酯（methyl palmitate，26）、亞油酸甲酯（methyl linoleate，27）、油酸甲酯（methyl oleate，28）、角鯊烯（squalene，29）、2-癸酮（2-decanone，30）、壬酸甲酯（methyl nonanoate，31）、8-炔-壬酸甲酯（methyl 8-nonanoate，32）、正十四烷（tetradecane，33）、正十五烷（pentadecane，34）、正十六烷（hexadecane，35）、正十七烷（heptadecane，36）、12-甲基-十三烷酸甲酯（methyl 12-methyl-tridecanoate，37）、正十八烷（octadecane，38）、正十九烷（nonadecane，39）、9-棕櫚油酸甲酯[(Z)-methyl 9-hexade-cenoate，40]、亞油酸（linoleic acid，41）、正十七烷酸甲酯（methyl heptadecanoate，42）、(R)-(-)-14-甲基-8-十六炔-1-醇[(R)-(-)-14-methyl-8-hexadecyn-1-ol，43]、硬脂酸甲酯（methyl octadecanoate，44）、正二十烷（eicosane，45）、10-甲基十七烷酸甲酯（methyl 10-methylheptadecanoate，46）、正十九酸甲酯（methyl nonadecanoate，47）、油酸（oleic acid，48）、花生酸甲酯（methyl icosanoate，49）、正二十四烷（tetracosane，50）、正二十二烷酸甲酯（methyl docosanoate，51）、正二十三烷酸甲酯（methyl tricosanoate，52）、1-碘代十八烷（1-iodooctadecane，53）、正二十四烷酸甲酯（methyl tetracosanoate，54）、正二十六烷酸甲酯（methyl heneicosanoate，55）、二十三烷酸（tricosanoic acid，56）、異丙苯（1-methylethyl-benzene，57）、二丁基羥基甲苯（butylatedhydroxytoluene，58），沒食子酸（gallic acid，59）[27]、香草醛（3-methoxy-4-hydroxybenzaldehyde，60）[28]、香草酸（4-hydroxy-3-methoxybenzoic acid，61）[28]。有機酸類化合物結構式（圖5）。

1.6 生物堿及其他化合物

定心藤中含有生物堿類化合物包括：青藤堿（sinomenine，62）[20]，漢防己堿（tetrandrine，63）[29]，mappine A(64)[30]，mapposidic acid(65)[30]，glycerol monolinoleate(66)[7,30]，吲哚類生物堿等[31,32]。另外，黃瀟[33]從定心藤莖中提取粗多糖，并對其進行分離純化，確定單糖組成為鼠李糖（Rha，67），阿拉伯糖（Ara，68），木糖（Xyl，69），甘露糖（Man，70），半乳糖（Gal，71），葡萄糖（Glc，72）。生物堿及其他化合物結構式（圖6）。

圖5 有機酸類化合物結構式

圖6 生物堿及其他化合物結構式

2 藥理作用

現代藥理研究表明，銅鉆（定心藤）具有多種藥理活性，如保護心血管、降血脂、抗腫瘤、抗氧化及清除自由基、抗炎鎮痛等作用。

2.1 保護心血管作用

心肌缺血再灌注損傷（Myocardial Ischemia Reperfusion Injury，MIRI）是心肌缺血，冠狀動脈再通和心肌灌注后引起的心肌損傷性反應，是一個復雜病理生理變化過程。總黃酮化合物作為許多中草藥的有效成分，其對心腦血管疾病的保護作用已在相關文獻中有所闡述［34,35］。路倩[36,37]建立心肌缺血再灌注損傷SD 大鼠模型，灌胃不同劑量的銅鉆總黃酮提取物，通過TTC染色法測定大鼠心肌梗死面積，結果表明，銅鉆總黃酮三個劑量組（低60 mg?kg-1，中120 mg?kg-1，高240 mg?kg-1）均能夠使大鼠心肌梗死面積減少；通過檢測血清中各項指標，結果表明，其能明顯降低大鼠血清中脂質過氧化物丙二醛（MDA）、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、白介素-6（IL-6）、肌酸激酶（CK）、乳酸脫氫酶（LDH）水平，升高超氧化物歧化酶（SOD）水平；通過蛋白質免疫印跡（Western blotting）檢測蛋白表達水平，結果表明，其明顯降低Bax蛋白表達、增加Bcl-2蛋白表達。可見銅鉆總黃酮可能通過調節炎癥因子，抗氧化，調節心肌細胞凋亡等途徑對大鼠心肌缺血再灌注損傷具有一定的保護作用。

2.2 降血脂作用

楊光等[38-40]建立高血脂癥SD 大鼠模型，研究定心藤莖中總黃酮提取物不同劑量對高血脂大鼠的干預作用，灌胃大鼠6 周后，通過眼球取血檢測血清中指標，結果表明，各劑量組與模型組比較均能降低高脂血癥大鼠血清中總膽固醇（TC）、甘油三脂（TG）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）的水平，上調高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）水平。灌胃12周后，通過心臟采血檢測血清中指標，結果表明，各劑量組與模型組比較均能下調高脂血癥大鼠血清中丙二醛（MDA）的水平，上調SOD及總氧化能力（T-AOC）水平。同時還探討了定心藤莖總黃酮對動脈粥樣硬化（Athersclerosis，AS）大鼠血脂的作用，通過ELISA法測定血清中一氧化氮（NO）和血管內皮生長因子（VEGF）的含量，結果表明，通過提高機體的抗氧化能力調節VEGF-IP3 信號通路，調節內皮細胞釋放一氧化氮和血管內皮生長因子，從而保護血管內皮細胞及動脈壁，達到降血脂和預防動脈粥樣硬化形成的作用。

2.3 抗腫瘤作用

腫瘤是一類嚴重威脅人類健康的危重疾病，腫瘤細胞之間的異質性及長期應用傳統化療藥物可引起腫瘤細胞的耐藥性，多藥耐藥（Multidrug Resistance，MDR）是腫瘤化療失敗的主要原因[41-43]。鐘海微等[44,45]應用超臨界CO2萃取法從定心藤莖中提取揮發油，通過MTT實驗探討揮發油對人胃癌細胞SGC-7901及人白血病細胞K562 的抗腫瘤活性，結果顯示，提取的揮發油對這兩種腫瘤細胞均具有一定的抑制作用，并且表明其對人白血病細胞K562的抑制作用更加顯著，其IC50為13.95 μg·m L-1。曾立[46]等通過實驗探討定心藤莖中提取揮發油對肺腺癌細胞SPC-A-1 及肝癌細胞BEL-7402的抗腫瘤活性研究，結果表明其對兩種腫瘤細胞均有抑制作用，IC50分別為169.54、695.21 μg·mL-1。龐聲航[47,48]等建立小鼠S180、H22腹水瘤及肉瘤動物模型，觀察20種瑤藥鉆類藥材對荷瘤小鼠生命延長率及腫瘤抑制率的影響，結果表明，銅鉆水提物對H22肉瘤抑制率超過30%。

2.4 抗氧化及清除自由基作用

研究報道黃酮類化合物具有很強的抗氧化和清除自由基的活性，還具有抗菌，抗衰老等藥理保健功能，副作用小，是一種具有巨大發展前景的天然有機抗氧化劑。李維峰等[49]研究定心藤醇提取物的5種極性萃取部位的體外抗氧化活性實驗，結果表明，不同極性部位均具有抗氧化活性，其中抗氧化能力最強的為乙酸乙酯部位，其次是氯仿部位和正丁醇部位，最弱的為水相及石油醚部位。其中乙酸乙酯部位黃酮類化合物含量高達609.96 mg·g-1，對Fe3+有顯著還原能力，DPPH半數清除濃度IC50為0.28 mg·mL-1，羥自由基半數清除濃度IC50為0.41 mg·mL-1，當濃度為0.2 mg·mL-1時對超氧陰離子自由基的清除率達到42.88%，從而說明黃酮類化合物可能是其抗氧化活性的主要成分。黃瓊等[50]通過正交試驗確定了微波輔助提取定心藤總黃酮的最佳工藝條件，并且進行了抗氧化活性實驗，結果顯示總黃酮對DPPH 有較強的清除作用，且清除能力呈濃度依賴性，表明其具有較強的抗氧化活性。

此外，阿西娜等[51]通過正交試驗確定了定心藤水溶性粗多糖的最佳提取工藝條件，并且進行了定心藤粗多糖和初步純化多糖體外清除自由基的活性研究，結果表明粗多糖和初步純化多糖均對OH、DPPH自由基有明顯清除作用，粗多糖對OH 自由基的清除作用大于初步純化多糖，而初步純化多糖對DPPH 自由基的清除作用大于粗多糖，可見定心藤多糖是一種良好的清除自由基抗氧化劑。

2.5 抗炎、鎮痛作用

Pang L X 等[52,53]通過建立二甲苯誘導小鼠耳廓腫脹模型以及對醋酸扭體試驗進行了實驗觀察，研究定心藤提取物的抗炎鎮痛作用，實驗結果表明，其可顯著抑制二甲苯致小鼠耳廓腫脹和扭體反應，具有顯著抗炎、鎮痛作用。蔣芝華[9]從定心藤莖中分離出來的木脂素類化合物進行了抗炎活性評價，建立脂多糖（LPS）誘導RAW264.7細胞釋放NO模型，并采用MTT法評價木脂素類化合物對細胞毒性影響，結果表明隨藥物濃度的增大能顯著抑制NO 的釋放，具有較好的抗炎活性作用，且對細胞無毒性。

3 毒性研究

唐春麗等[54]采用銅鉆貼膏對實驗小鼠進行皮膚急性毒性試驗,對家兔進行皮膚刺激性試驗以及對豚鼠進行皮膚過敏性試驗，結果表明，銅鉆貼膏對小鼠的完整和破損皮膚無急性毒性反應，對家兔皮膚無刺激性，對豚鼠皮膚無過敏反應，其貼膏為安全性的外用藥。

4 展望

瑤族醫藥作為傳統醫藥的重要組成部分,但他們的醫藥傳統知識依賴于醫者秘授親教、指物傳承、口授心記，缺乏典籍記載和系統整理[55-57]。銅鉆作為瑤族醫藥“十八鉆”中一味常用藥材，具有廣泛的民族民間實踐應用基礎，是一類具有開發前景的天然藥物[58]。目前，國內外仍缺乏對銅鉆民間傳統應用功效進行深入系統的研究，其確切的藥用機制及藥用價值未引起足夠重視。瑤族醫藥在抗腫瘤方面有自己獨特的治療原則和用藥方式，但其抗腫瘤機制的研究不夠深入。銅鉆的藥理活性研究多是針對粗提物進行的實驗，沒有確切到單體成分，因此，有必要進一步深入系統研究其化學成分和藥理作用，并結合功效和臨床應用，深入系統地闡述其物質基礎及藥效機制，為其質量控制、產品合理開發及利用提供參考依據。