椰棗早期性別鑒定研究綜述

賈博爽

摘? ?要：國內對椰棗早期性別鑒定的研究較少，筆者查閱了相關外文文獻，對椰棗進行了簡單概述，并對國外關于椰棗早期性別鑒定的方法進行了簡短論述，最后對未來椰棗早期性別鑒定的研究方向進行了展望。

關鍵詞：椰棗;早期;性別;鑒定

文章編號： 1005-2690（2019）06-0161-01? ? ? ?中圖分類號： S665.1? ? ? ?文獻標志碼： A

椰棗（英文名Date palm ，拉丁學名Phoenix dactylifera L.），是棕櫚科刺葵屬植物，《本草綱目》稱無漏子，是中東和北非地區重要的經濟作物。其經濟重要性在于雌株所結果實具有較高營養價值，富含果糖、礦物質、氨基酸和維生素，自古以來被人們視為良好的滋補營養食品。椰棗也可用于許多工業用途，如木材、家具、繩索、包裝材料[1]等。目前，椰棗在我國福建、廣西、云南、廣東、海南等地有種植。椰棗是多年生雌雄異株植物，生長速率緩慢，直到繁殖階段才能辨別雌雄，這個時間一般需要5～10年[2]。因此對早期椰棗進行性別鑒定，對提高土地合理利用率和增加椰棗經濟、種植價值尤為重要。

1? ?雄性特異序列擴增區標記（SCAR）

Kharb Pushpa 和Mitra Charu利用雄性特異性序列特征擴增區（SCAR）標記對椰棗樹進行早期性別鑒定[3]，試驗中，依次進行了DNA的提取與分離、DNA的定性和定量估計、用SCAR引物進行PCR擴增和對擴增得到的DNA進行瓊脂糖凝膠電泳的試驗步驟。用SCAR引物擴增雄性和雌性椰棗基因組DNA所得的電泳圖譜顯示，在雌性和雄性樣本中均發現了406 bp的擴增片段，但354 bp的擴增片段僅在雄性樣本中發現，因此基于此擴增模式，椰棗在幼苗期的性別得以預測。

2? ?微衛星DNA（ISSR）

ISSR（inter-simple sequence repeat）是Zietkeiwitcz等于1994年發展起來的一種基于微衛星基礎上的分子標記。Abdulhafed A. Al-Ameri，Fahad Al-Qurainy，Abdel-Rhman Z. Gaafar，Salim Khan和 M. Nadeem利用ISSR標記對椰棗的性別進行了分子鑒定，試驗中，從雌雄椰棗樹植物中共篩選出200個ISSR引物，其中只有2個引物與性別有關，分別為IS_A02和IS_A71，其中引物IS_A02僅在所有雌性植株中產生了獨特的390 bp的條帶，與此相反，引物IS_A71僅在所有雄性植株中產生了清晰的380 bp的條帶。這些特定片段被切除、純化和測序，可進一步用于椰棗的早期性別鑒定。

3? ?熒光原位雜交（FISH）

近年來，熒光原位雜交技術已經成為直接測定基因組特定DNA片段的強大而有力工具，其使得核酸探針在靶染色體、細胞核、細胞和組織中清晰可見。Mohamed A.M. Atia，Sami S. Adawy和 Hanaiya A. El-Itriby研究基于熒光原位雜交的椰棗性別鑒定，即利用熒光原位雜交技術定位45S and 5S rDNA標記在椰棗染色體上的位置，以此來鑒別椰棗樹的性別。

Jamal S.M. Sabir等人探討了ISSR和AFLP分子標記檢測沙特阿拉伯10個椰棗品種的特性，其標記確實提供了足夠的變異來識別沙特阿拉伯的椰棗，產生的一些AFLP標記可以用于今后椰棗育種計劃。Atia A. M. Mohamed和Adawy S. Sami采用了一種有效的3個新基因靶向標記方法（SCoT、CDDP and ITAP）作為AFLP的補充，試圖開發一種新的基于性別特異性PCR的標記物，有助于埃及椰棗的早期性別鑒定[4]。Eman K Al-Dous等人研究椰棗的從頭基因組測序和比較基因組測序，確立了一個與性別相關的基因組區域，并發現了椰棗采用XY性別遺傳系統的證據。

綜上所述，椰棗是中東和北非最重要的植物，近10年來研究的性別特異標記往往只適用于某一或某些品種，目前尚未有適用于大多數椰棗品種性別鑒定的分子標記方法。不久的將來，結合已有的分子標記方法和相應手段研究一種適用于大多數椰棗品種性別鑒定的分子標記，將對椰棗育種工作產生重要的經濟價值。

參考文獻：

[ 1 ] Jamal S.M. Sabir，Salah Abo-Aba，Sameera Bafeel，et al. Char-acterization of ten date palm （ Phoenix dactylifera L.） cultivars from Saudi Arabia using AFLP and ISSR markers[J]. Comptes rendus - Biologies，2013（11）：6-18.

[ 2 ] Al-Ameri Abdulhafed A，Al-Qurainy Fahad，Gaafar Abdel-Rhman Z，et al. Molecular Identification of Sex in Phoenix dactylifera Using Inter Simple Sequence Repeat Markers[J]. BioMed research international，2016（6）.

[ 3 ] Kharb Pushpa，Mitra Charu. Early Sex Identification in Date Palm by Male-Specific Sequence-Characterized Amplified Region （SCAR）Markers[J]. Methods in molecular biology （Clifton，N.J.），2017（7）：199-207.

[ 4 ] Atia Mohamed A M，Adawy Sami S，El-Itriby Hanaiya A. Date Palm Sex Differentiation Based on Fluorescence In Situ Hybridiza-tion （FISH）[J]. Methods in molecular biol-ogy （Clifton， N.J.），2017（5）：245-246.

（收稿日期：2019-05-15）