GC-MS分析梔子花香精成分

王利國，唐 燦

（西南醫(yī)科大學(xué)附屬中醫(yī)醫(yī)院，四川，瀘州 646000；2.西南醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院，四川，瀘州 646000）

梔子花為茜草科植物山梔子（Gardenia jasminoidesEllis）和大花梔子（G.J.var.grandifloraNakai.）及觀賞梔子的花朵，多數(shù)在每年5至7月開花，花色潔白無暇，氣香濃郁，是我國著名的八大香花之一[1]。梔子又名黃梔子、山枝子、大紅梔(江蘇)、白蟬(廣東)，主產(chǎn)于四川、重慶、湖北、江西、云南、貴州、湖南、福建、浙江等長江流域地區(qū)，全國大部分地區(qū)有栽培，南方有野生。梔子系常綠灌木，花單生于枝頂，芳香，花梗短，萼管倒圓錐形，有棱，裂片線形。花冠未開時(shí)旋卷，開放后呈高腳杯狀，5至多裂，初為白色，后變?yōu)槿辄S色。山梔子花多為單瓣，大花梔子及觀賞梔子的花朵多為疊瓣。植物精油是香料工業(yè)的重要原料和出口物質(zhì)。梔子花具有一種令人非常愉快的香味，目前關(guān)于梔子花香氣成分的研究報(bào)道，主要集中在梔子花超聲提取工藝的優(yōu)選研究[2]、梔子花揮發(fā)油超臨界CO2萃取以及通過超臨界CO2萃取分析其揮發(fā)油化學(xué)成分的分析等[3]。梔子花精油水蒸汽蒸餾的提取因該方法受高溫作用，對(duì)梔子花精油頭香影響很大，得到的精油質(zhì)量較差，沒有天然鮮花氣息，收率也低[4]。然而梔子花香精成分的氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)研究報(bào)道較少，不同花期的梔子花的香氣成分存在一定差異，包括香氣的特征以及香氣的濃郁程度[5]。本實(shí)驗(yàn)通過超聲提取優(yōu)選工藝提取梔子花香精成分，采用氣相色譜-質(zhì)譜法（GC-MS）分析不同花期的香精成分，為梔子花的日用化妝品的開發(fā)利用提供一定的理論基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 儀器、藥品與試劑

梔子花采自四川省瀘州市納溪區(qū)大渡口鎮(zhèn)和豐鄉(xiāng)青龍村和天仙鎮(zhèn)天仙硐，經(jīng)課題組蒲清榮主任中藥師鑒定品種為茜草科山梔子（Gardenia jasminoidesEllis）和大花梔子（G.J.var.grandifloraNakai.）。采摘后直接冷凍保存，防止成分揮發(fā)。試驗(yàn)所用各梔子花品種、采集地與編號(hào)如表1。

表1 梔子花采集地、品種與編號(hào)Table 1 Collection sites, varieties and serial numbers of Gardenia flowers

日本島津 GC-MS--QP2010plus氣質(zhì)聯(lián)用儀；Agilent 7890A氣相色譜儀；DB-5MS彈性毛細(xì)管色譜柱（30 m×0.25 mm×0.25 μm）；AS3120A 超聲波清洗儀（天津奧特賽恩斯儀器有限公司）；電子天平（上海民析精密科學(xué)儀器有線公司）；無水乙醇（分析純），重慶川東化工（集團(tuán)）有限公司；150 mL磨口塞錐形瓶；定量濾紙；500 mL燒杯；5 mL、25 mL容量瓶；0.22 μm微孔濾膜。

1.2 梔子花香精成分的提取

按照正交試驗(yàn)最佳工藝提取梔子花香精:無水乙醇加入量為梔子花的15倍，浸泡60 min，超聲提取60 min，提取2次，合并濾液即得供試品溶液[6]。

1.3 GC-2010色譜與質(zhì)譜條件

柱箱溫度：40.0 ℃，進(jìn)樣溫度：280.00 ℃；進(jìn)樣模式：分流；流量控制模式：總流量：14.0 mL/min、柱流量：1.00 mL/min、線速度：36.1 cm/sec、吹掃流量：3.0 mL/min、分流比：10.0；壓力：49.5 kPa、高壓進(jìn)樣模式：關(guān)；

載氣節(jié)省器：關(guān)；分流阻尼固定：關(guān)；柱溫箱溫度程序升溫：速率 溫度(℃) 保持時(shí)間(min)：-40.0 5.00；10.00 150.0 5.00；4.00 230.0 10.00；5.00 280.0 5.00；5.00 290.0 5.00。

＜ 加熱單元檢查完畢 ＞：柱溫箱：是；SPL1：是；MS：是；＜ 檢測(cè)器(FTD)檢查完畢 ＞；＜ 基線移動(dòng)檢查完畢 ＞；＜ 進(jìn)樣流量檢查完畢 ＞；SPL1 載氣：是；SPL1 吹掃：是；＜ APC流量檢查完畢 ＞ ；＜ 檢測(cè)器APC流量檢查完畢 ＞；外部等待：否；平衡時(shí)間：3.0 min；[GC 程序]：[GCMS-QP2010 Plus]：離子源溫度:200.00 ℃；接口溫度 :220.00 ℃；溶劑延遲時(shí)間：3.00 min；檢測(cè)器增益方式 :相對(duì)；檢測(cè)器增益：0.00 kV；閥值：0；[MS 表]：開始時(shí)間：3.50 min；結(jié)束時(shí)間：73.00 min；ACQ 方式：Scan；間隔：0.50sec；掃描速度：1250；開始m/z：33.00；結(jié)束 m/z :600.00；樣品進(jìn)樣單元：GC；[MS 程序]：使用MS程序：關(guān)。

2 方法與結(jié)果

在上述色譜與質(zhì)譜條件下，得到梔子花香精提取物總離子流圖，如圖1。使用Nist08譜圖庫進(jìn)行檢索分析，共分離出76個(gè)化學(xué)成分。其中13個(gè)化學(xué)成分匹配度不低于90%，占梔子花香精成分總量的40.97%；其中含量不低于1%有24個(gè)化學(xué)成分。梔子花香精成分鑒定結(jié)果見表2。

圖1 總離子流圖Fig.1 Total ion flow diagram

表2 梔子花香精成分Table 2 The essence components from Gardenia flowers

續(xù)表2 梔子花香精成分Table 2 The essence components from Gardenia flowers

3 討論

從四川省瀘州市納溪區(qū)大渡口鎮(zhèn)和豐鄉(xiāng)青龍村采集的梔子花中分離出來的成分至少有 76個(gè)之多，匹配度大于或等于90%的成分共13個(gè)，占梔子花香精成分總量的40.97%，其中相對(duì)含量大于或等于 1%有 24個(gè)化學(xué)成分，含量最高的為1,3-Propanediol,2-(hydroxymethyl)-2-nitro（三羥甲基硝基甲烷）（11.81%）。

從表2可知，梔子花香精成分保留時(shí)間31.209 min之前的為15個(gè)碳以下的小分子化合物，以不飽和烯烴、醛類、酮類、酚類等不飽和含氧化合物為主。

本次研究應(yīng)用gc-ms聯(lián)用分析四川省瀘州市納溪區(qū)大渡口鎮(zhèn)和豐鄉(xiāng)青龍村所產(chǎn)梔子花香精成分，共分析出至少 76種化合物，為進(jìn)一步完善梔子花香料和藥用資源、化學(xué)成分、藥理、臨床應(yīng)用提供了重要的科學(xué)依據(jù)，也為開發(fā)瀘州產(chǎn)梔子花香料資源提供了重要的基礎(chǔ)數(shù)據(jù)?譚誼談等學(xué)者[3]，采用gc-ms對(duì)不同花期梔子花的香氣成分進(jìn)行分析發(fā)現(xiàn)梔子花的香氣成分有36種，主要有酯類、萜烯類、烴類；本研究采用gc-ms發(fā)現(xiàn)梔子花香精成分除上述成分外，還發(fā)現(xiàn)醇類、酮類、脂肪酸類等化學(xué)成分?何天平等學(xué)者[4]采用 gc-ms檢測(cè)梔子花頭香精油化學(xué)成分發(fā)現(xiàn)芳樟醇含量高達(dá)46.02 %之多? 張國良等學(xué)者[7]采用gc-ms檢測(cè)梔子花超聲提取液，從中分離出 27種化學(xué)成分，其中萜類物質(zhì)含量相對(duì)較高?黃巧巧等學(xué)者[8]采用固相微萃取方法提取梔子鮮花的頭香成分,采用 gc-ms方法共鑒定了 54種化學(xué)成分，占總峰面積的 99.98%，主要成分(質(zhì)量分?jǐn)?shù))依次為合金歡烯(64.86%)、羅勒烯(29.33%)、芳樟醇(2.74%)、惕各酸順式葉醇酯（0.34%)和苯甲酸甲酯(0.25%)等?因此上述四篇報(bào)道中有關(guān)梔子花香料成分差異較大，推測(cè)主要原因可能與梔子花新鮮程度以及各自提取方法，尤其提取溫度與提取壓力差異較大有關(guān)，有待于進(jìn)一步深入研究闡明?