油茶餅粕提取條件優化及其在火龍果貯藏保鮮中的應用

謝國芳 陳歡歡 楊飛艷 謝玲 趙治兵 劉永玲

摘 ?要 ?為了充分利用油茶資源，以油茶餅粕為試材，通過提取劑篩選和均勻試驗設計等優化提取條件，采前1 d噴施粗提液，觀察其對火龍果采后貯藏品質的影響。研究表明：油茶餅粕最佳提取條件為是1 g餅粕15 mL 85%甲醇料液比在75?℃下超聲波輔助提取2 h，提取2次。采前噴施粗提液可顯著提高火龍果采收時果皮色澤b*和果實抗壞血酸含量（P<0.05），顯著降低果皮硬度、果肉黏度、TSS（總可溶性固形物）及還原糖含量（P<0.05）;采前噴施粗提液顯著延緩貯藏期間火龍果果肉黏度的急劇增加（P<0.05），維持果皮亮度L*、b*、果肉硬度、TSS及抗壞血酸含量，從而延緩霉爛指數的升高，維持火龍果的品質。

關鍵詞 ?油茶餅粕;提取;火龍果;保鮮

中圖分類號 ?TSS255.5 ?????文獻標識碼 ?A

Abstract ?In order to reduce the use of chemical bacteriostatic agents and make full use of camellia resources， the extraction conditions of Camellia oleifera cake were optimized by extraction agent screening and an uniform experimental design. The effect of pre-harvest spraying crude extract of camellia cake on the storage quality of pitaya was investigated. The optimum extraction conditions of C. oleifera cake were obtained as follows： 85% methanol， the ratio of material to liquid is 1 g： 15 mL， each time ultrasonic assisted extraction for 2 h at 75?℃， and extraction twice. The application of preharvest spraying crude extract could significantly improve the b* in peel and ascorbic acid content in pulp of pitaya （P<0.05）， significantly reduce the firmness in pericarp， viscosity in pulp， TSS， and reducing sugar content （P<0.05） at harvest. Preharvest spraying crude extract significantly delayed the rapid increase of viscosity in pulp （P<0.05）， and maintained the color （L* and b*）， firmness in pulp， TSS， and ascorbic acid content， thus delayed the increase of the rot index of pitaya， and thus had a good preservation effect on pitaya during storage.

Keywords ?Camellia oleifera cake; extraction; pitaya; preservation

DOI ?10.3969/j.issn.1000-2561.2019.07.022

火龍果（pitaya）為仙人掌科（Cactaceae）三角柱屬（Hylocereus）多年生植物，尤其是紅肉火龍果富含多種營養素，在預防便秘和尿酸、清除重金屬、抗衰老、養顏減肥、降血脂、降血糖、降血壓、抗腫瘤等方面功效顯著[1]。然而，采后貯藏期間鐮刀菌果腐病、炭疽病、黑腐病、病毒等嚴重制約其產業發展[2-5]，雖然吡唑醚菌酯和咪鮮胺等化學殺菌劑對炭疽病和鐮刀菌果腐病具有較好的毒力效果[5-7]，但存在食品安全隱患。

油茶是山茶科山茶屬植物，我國特有的木本食用油料經濟作物，與油棕、橄欖和椰子共同稱為世界四大木本食用油源[8]。按照國務院批準并印發的《全國油茶產業發展規劃（2009—2020年）》，到2020年油茶產量達到250萬t，如果全部用于榨油，每年將產生180余萬t油茶餅粕，是產品茶油的3倍[9]。近年來，隨著油茶餅粕有效成分的明確，油茶餅粕有效成分的提取及其利用成為關注的熱點[10-16]，油茶餅粕中含有較多的皂素、多糖和多酚類等抗菌成分，對食源性病原菌（如枯草桿菌、大腸桿菌、金黃色葡萄球菌等）和植物病害病原菌（稻瘟病菌、柑橘青霉病菌、炭疽病菌、黃瓜炭疽病菌、番茄小核病菌、玉米小斑病菌、茶白星病、香蕉枯萎病菌等）具有較好的抑制效果[17-20]，對番茄根結線蟲病具有良好的防治效果[21]，對圣女果和荔枝具有較好的保鮮效果[22-23]。

本文以油茶餅粕為原料，以皂素、總酚和多糖為評價指標開展提取溶劑篩選和提取條件研究，并將油茶餅粕粗提液用于火龍果貯藏保鮮研究中，為其在果蔬貯藏保鮮中應用、油茶餅粕開發利用提供理論依據。

1 ?材料與方法

1.1 ?材料

油茶果采于貴州省思南縣野生油茶樹，以液壓榨油后得到油茶餅粕為原料。

1.2 ?方法

1.2.1 ?油茶餅粕提取溶劑選擇 ?以水、70%的甲醇、乙醇、丙酮為擬考查的提取劑，稱取油茶餅粕2～5 g按1∶10 g/mL分別加入不同提取劑中，于60?℃下超聲波輔助提取1 h，提取2次。

1.2.2 ?油茶餅粕提取條件優化 ?以1.2.1確定的提取劑，對影響油茶餅粕提取的因素提取劑濃度（A）、提取溫度（B）、料液比（C）和提取時間（D）等進行均勻試驗設計，以皂素、總酚和多糖為考核指標，得出油茶籽餅粕最佳提取條件。各因素的水平范圍見表1[24-25]。

1.2.3 ?處理方法 ?在最優條件下進行提取得到油茶餅粕粗提液，在40?℃下真空濃縮4 h，得到提取濃縮液。以‘紫紅龍火龍果為試材，在同一果園，每處理選擇80株火龍果進行試驗。采前1?d

對火龍果噴施稀釋1600倍的油茶餅粕粗提濃縮液（記為粗提液），以果面滴水為止，記為T;以相鄰植株噴施水為對照，記為CK。八成熟時采摘于望謨縣火龍果種植基地，采后立即運回實驗室，剔除機械傷、病蟲害及果實成熟度差異較大的果實，挑選大小均勻一致的果實進行試驗，置于通風陰涼處散去田間熱，常溫愈傷24?h，按10?kg/袋分裝于周轉箱中，轉入（5.0±0.5）?℃、RH 90%冷庫，每個處理設3個平行，每平行1袋，每7?d出庫1次，統計霉爛指數，并開展硬度、色澤、TSS測定，每平行取5～8個代表性果實，液氮打漿，80?℃保存，待測。

1.2.4 ?油茶餅粕提取測定指標及方法 ?茶皂素含量測定陳瑩等[23]的方法;總酚含量測定參照Nuncio-Jauregui等[26]的方法;多糖含量測定參照王金華等[27]的方法;為更好的評價提取效果，皂素、總酚和多糖含量標準化分別按0.5、0.3和0.2權重因子計算綜合值。

1.2.5 ?火龍果貯藏測定指標及方法 ?霉爛指數參照Xie等[28]方法測定;火龍果果皮和果肉色澤采用色差儀測定，L*代表亮度，范圍在0～10之間，L*值越高表明樣品表面越白。a*代表紅（+）或綠（），b*代表黃（+）或藍（）;硬度和黏度參照楊玲等[29]方法測定;總可溶性固形物（TSS）采用手持糖度儀測定;可滴定酸參照GB/T 12456—2008《食品中總酸的測定方法》方法測定;還原糖含量：采用3，5-二硝基水楊酸（DNS）進行測定[30];甜菜色苷參照Fathordoobady等[31]方法測定;抗壞血酸含量參照Xie等[30]的方法測定。

1.3 ?數據處理

各指標均重復測3次，以平均值±標準偏差表示，采用IBM SPSS 22軟件對數據進行差異顯著性統計分析（P<0.05），采用Graphpad Prism 7.00軟件繪圖。

2 ?結果與分析

2.1 ?油茶籽餅粕提取條件

2.1.1 ?提取劑選擇 ?由圖1可知，與水相比，有機溶劑可顯著提高粗提液中皂素、總酚和多糖的含量，其中，70%甲醇對油茶籽餅粕中皂素和總酚的提取顯著（P<0.05）高于70%乙醇和70%丙酮，然而70%乙醇粗提液中多糖含量顯著（P<0.05）高于水、70%甲醇和70%丙酮，所得綜合值依次為70%甲醇（0.94）、70%乙醇（0.93）、70%丙酮（0.89）和水（0.76），因此甲醇是油茶籽餅粕綜合提取的最佳提取劑。

2.1.2 ?油茶籽餅粕提取條件優化 ?均勻設計試驗方案及觀測值見表2。

選取提取綜合值Y、提取劑濃度（A）、提取溫度（B）、料液比（C）和提取時間（D），采用Uniform Design Version 3.0軟件對均勻設計試驗結果進行逐步回歸分析，其回歸方差分析結果見表3，所得的綜合值隨各因素變化的四元二次回歸方程如下：

2.2 ?采前噴施粗提液對‘紫紅龍貯藏品質的影響

2.2.1 ?采前噴施粗提液對果實霉爛指數的影響 ?由圖2可知，火龍果低溫貯藏7 d時未發現明顯腐爛，貯藏14 d時霉爛指數顯著增加，采前噴施粗提液可顯著降低果實的霉爛指數（P<0.05），可能主要是抑制引起果實腐爛的微生物生長。

不同小寫字母表示處理間差異顯著（P<0.05）。

Different lowercase letters represent significant difference

between different treatment P<0.05）.

圖2 ?采前噴施粗提液對‘紫紅龍貯藏期霉爛

指數的影響

Fig. 2 ?Effect of preharvest spraying crude extract on rot index of pitaya during storage

2.2.2 ?采前噴施粗提液對果皮品質的影響 ?由圖3可知，處理對果實采摘時果皮硬度的影響不顯著（P>0.05）;貯藏期間處理和對照果皮硬度均呈現先增后降的趨勢;貯藏期間對照果皮厚度呈現先增后降的趨勢，處理則呈現先降后增趨勢，貯藏21 d時略高于對照;貯藏前14 d時處理與對照間果皮果膠含量差異不顯著（P>0.05），貯藏21?d時處理果皮果膠含量顯著高于對照（P<0.05）。