磷脂酰肌醇蛋白多糖-3和細胞角蛋白-19聯合免疫組化檢測在肝細胞肝癌診斷和鑒別診斷中的價值分析

李林

（巴中市中心醫院病理科 四川 巴中 636000）

肝癌主要包含肝細胞癌、膽管細胞癌、混合型癌三種類型，是一種比較常見的惡性腫瘤，在我國全部惡性腫瘤中排位第三，具有較高的發病率及致死率[1]。肝癌病癥傳統的治療手段為手術治療方式，但是肝癌患者通常由于各種因素無法開展手術治療，因此，放射治療技術逐漸成為不能應用手術治療方式的患者的主要治療手段，同時也是首選[2]。本次研究將巴中市中心醫院病理科于2014年7月－2018年8月期間接收診治的100例患者的肝癌組織作為研究樣本，探究在肝細胞肝癌診斷和鑒別診斷中聯合應用磷脂酰肌醇蛋白多糖-3(GPC-3)和細胞角蛋白-19(CK-19)免疫組化檢測方式的臨床療效。現報道如下。

1.資料與方法

1.1 一般資料

選取2014年7月—2018年8月期間，巴中市中心醫院病理科接收的100例患者的肝癌組織作為研究樣本，本次研究選取的病理樣本均為臨床已確診肝癌的首發病例，排除合并其他腫瘤及轉移等異常情況。100份肝癌組織樣本中，肝細胞肝癌、肝內膽管細胞癌、肝細胞肝癌伴隨肝內膽管細胞癌病例數分別為66例、23例、11例。其中男性患者及女性患者分別為57例、43例。

1.2 研究方法

對全部患者開展磷脂酰肌醇蛋白多糖-3(GPC-3)和細胞角蛋白-19(CK-19)免疫組化檢測處理，探究磷脂酰肌醇蛋白多糖-3(GPC-3)和細胞角蛋白-19(CK-19)在三種肝細胞癌患者中的檢測情況。

1.3 檢驗方法

標本經固定（10%甲醛溶液）后切取腫瘤組織并依次行脫水、透明、浸蠟、包埋、切片（厚度4um）等處理措施，染色使用蘇木素-伊紅染色法（hematoxylin and eosin,HE），之后利用Edmondson-Steiner法判斷標本分化程度（高分化、中分化、低分化）。免疫組化采用EnVision 2步法，即上述切片依次行烤片、脫蠟、逐級濃度乙醇脫水等步驟處理，之后利用過氧化氫溶液（3%）浸泡5min、PBS緩沖液浸泡3次（每次5min）。待上述步驟完成后將標本放于檸檬酸緩沖液中（pH6.0）行高溫高壓修復，即高壓鍋噴氣后予以2min加熱-中火2min-關火（燜）10min-37℃水浴冷卻。待上述步驟完成后經PBS緩沖液沖洗3次（時間同上）并加入鼠抗人單克隆抗體（GPC-3一抗）、4℃環境過夜，之后再次經PBS緩沖液沖洗3次（時間同上）并加入通用型抗體（二抗 PV6000，37℃、10min），經PBS緩沖液沖洗3次（時間同上）并行DAB染色，經PBS緩沖液終止染色，乙醇脫水（濃度由低至高）至入二甲苯、封片。應注意的是，CK-19、GPC-3免疫組化染色步驟相同，但CK-19于高溫高壓修復后應放入37℃胃酶消化（1min）并行經PBS緩沖液沖洗3次（時間同上），之后加入鼠抗人單克隆抗體后步驟同GPC-3。

1.4 統計學處理

對試驗數據采用SPSS18.0軟件進行統計分析，計量資料采取t檢驗，用±s表示；計數資料用χ2檢驗，用百分比（%）表示。若P＜0.05，則表明差異具有統計學意義。

2.結果

2.1 磷脂酰肌醇蛋白多糖-3及細胞角蛋白-19在肝細胞肝癌、肝內膽管細胞癌、肝細胞肝癌伴隨肝內膽管細胞癌情形中的表達情況見表1、表2。

表1 磷脂酰肌醇蛋白多糖-3在各癌腫中的表達情況

表2 細胞角蛋白-19在各癌腫中的表達情況

2.2 聯合應用磷脂酰肌醇蛋白多糖-3及細胞角蛋白-19在肝細胞肝癌、肝內膽管細胞癌、肝細胞肝癌伴隨肝內膽管細胞癌情形中的表達情況見表3。

表3 聯合應用免疫組化檢測在各癌腫中的表達情況

3.討論

原發性肝癌是一種在中國和東亞地區具備高發性特征的惡性腫瘤疾病，遵照世界衛生組織測算發布的相關研究數據，在每10萬人口中，肝癌疾病的年均報告病死例數介于20～40之間，是臨床中常見的惡性腫瘤，其報告病死率長期占據第二位，對人群健康造成嚴重威脅。

原發性肝癌患者尤其是原發性肝細胞肝癌患者合并發生肝硬化疾病的可能性長期處于較高水平，在我國為64.25%～84.16%。在肝硬化患者的臨床病程發生發展過程中，患者通常會發生肝臟組織基礎細胞變性壞死病理過程，患者的間質結締組織逐漸發生病理性增生，以及形成纖維間隔結構條件下，患者肝硬化病理組織周圍殘余的細胞通常會發生結節狀再生病理現象，而且在患者肝臟細胞發生損害病理現象和增生病理現象的背景下，處于增生狀態的細胞極有可能會發生間變病理變化，或者是癌變病理變化，繼而給患者的綜合性生存質量造成極其嚴重的不良影響，切實做好肝硬化患者的早期診斷治療干預，對于優化患者的生存質量有重要意義。

從基礎性形態學理論和細胞遺傳學理論的角度展開闡釋分析，通常將原發性肝癌疾病的病理類型具體劃分為三個類型：肝細胞肝癌（HCC）、肝內膽管細胞癌（ICC），以及肝細胞癌合并肝內膽管細胞癌（CHC）。在常規性檢查診斷技術方法的應用背景下，通常較難實現對上述三種病理表現類型肝癌患者的有效鑒別區分，需要臨床醫學工作者切實探索和研究具備實際應用價值的診斷與鑒別診斷技術。磷脂酰肌醇蛋白多糖-3物質是一種在血清學和組織學研究背景下具備充分代表性的肝臟腫瘤病理組織檢測標志物，且磷脂酰肌醇蛋白多糖-3物質本身在良性肝細胞肝癌病理組織和惡性肝細胞肝癌病理組織中的表達程度具備顯著的差異化特征，在因丙型肝炎病毒感染誘導的肝硬化疾病背景患者的病程早期發展階段，原發性肝細胞肝癌患者病理組織中磷脂酰肌醇蛋白多糖-3物質的表達可能達100.00%，而在其他類型肝臟器官良性疾病病理組織和健康肝臟器官中的表達可能為0。我國部分學者研究報道，磷脂酰肌醇蛋白多糖-3物質在原發性肝癌患者病理組織中的表達比率通常可以達到81.50%，同時在癌癥病理組織周圍和遠端性肝癌病理組織中通常不會表達，這一基本特點對于臨床醫師檢查診斷原發性肝癌患者的基礎性病理組織。具備一定的參考價值。

磷脂酰肌醇蛋白多糖-3歸屬于磷脂酰肌醇蛋白聚糖，同時也是一種癌胚蛋白，在胚胎中及生長發育過程中實現表達過程，對形態的形成過程及生長過程具有重要的控制作用[3]。磷脂酰肌醇蛋白多糖-3借助于糖基磷脂酰肌醇實現與細胞膜的連接過程，進而實現對細胞生長及分化的重要作用。在胚胎發育及胎兒時期，磷脂酰肌醇蛋白多糖-3的表達具備顯著的器官組織特異性[4]。肝實質細胞的表達過程貫穿整個孕期。本次選取我院接收診治的100例患者的肝癌組織樣本作為樣本，對全部患者開展磷脂酰肌醇蛋白多糖-3(GPC-3)和細胞角蛋白-19(CK-19)免疫組化檢測，探究磷脂酰肌醇蛋白多糖-3(GPC-3)和細胞角蛋白-19(CK-19)在三種患者中的檢測情況。發現，經磷脂酰肌醇蛋白多糖-3免疫組化檢測處理后，肝細胞肝癌、肝內膽管細胞癌、肝細胞肝癌伴隨肝內膽管細胞癌情形的陽性檢測率分別為84.8%、17.4%、100.0%，三組陽性檢測率對比存在顯著性差異；經細胞角蛋白-19免疫組化檢測處理后，肝細胞肝癌、肝內膽管細胞癌、肝細胞肝癌伴隨肝內膽管細胞癌情形的陽性檢測率分別為0、95.7%、100.0%，三組陽性檢測率對比存在顯著性差異。

綜上所述，磷脂酰肌醇蛋白多糖-3免疫組化檢測處理在肝細胞肝癌、肝內膽管細胞癌方面具備顯著的靈敏性及特異性，而聯合應用磷脂酰肌醇蛋白多糖-3(GPC-3)和細胞角蛋白-19(CK-19)免疫組化檢測方式在肝細胞肝癌、肝內膽管細胞癌、肝細胞肝癌伴隨肝內膽管細胞癌情形的臨床診斷方面均具有顯著作用。