探究新生兒溶血病三項檢測方法及臨床意義

何 杰

（揚州市江都婦幼保健院，江蘇 揚州 225200）

新生兒溶血病（hemolytic disease of newborn，HDN）是指由于母子血型不合，母親體內產生與胎兒血型抗原不配的血型抗體。新生兒溶血三項檢測是臨床診斷新生兒溶血病的常用方法[1]，可為新生兒溶血癥的診斷及治療提供依據，對預后改善有重要意義。本文旨在進一步分析新生兒溶血病三項檢測方法及臨床意義，報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料：選取我院自2018年1月至2018年12 月收治的80例高膽紅素血癥患兒做為此次研究對象，納入標準：符合《中華兒科雜志》中的診斷標準，臨床表現為貧血及黃疸，患兒家屬理解并簽署該研究制定的知情同意書，自愿參與本次研究。排除標準：無合并免疫系統疾病者、精神病者。男性患兒45例，女性患兒35例；年齡0～18 d，平均年齡（11.34±3.45）d；總膽紅素水平255～345 μmol/L，平均水平（278.67±14.78）μmol/L。

1.2 方法：①母嬰血型檢測。正定型：制備1.0%紅細胞鹽水懸液，撕開檢測卡的封膜，將1%待檢RBC生理鹽水各加50 mL到蘭A、黃B、灰D及其Control微柱管反應腔中，按照每分鐘1800 r，2 min；每分鐘2500 r，1 min離心，取出檢測卡，判定結果。反定型：離心操作取出血漿待檢驗，制備1.0%紅細胞鹽水懸液。于白色A、B、O及自身管中分別加入待檢血漿50 mL，然后再加入相對應的1%A1、B、O試劑紅細胞、待檢紅細胞生理鹽水懸液50 mL。放置10 min后，按照每分鐘1800 r，2 min；每分鐘2500 r，1 min離心，取出檢測卡，判定結果。②溶血三項檢測。采用微柱凝膠免疫法測定紅細胞直接抗人球蛋白試驗、游離抗體試驗、抗體釋放試驗。紅細胞直接抗人球蛋白試驗（直抗試驗）：采用生理鹽水洗滌新生兒紅細胞，洗滌3次，制作1%的紅細胞懸液，將50 μL紅細胞懸液加入到Liss/Coombs卡第一管中。游離抗體試驗（游離試驗）：與患者相同血型的50 μL 1%紅細胞懸液加入到Liss/Coombs卡第二管中，然后加入25 μL患兒血清。抗體釋放試驗（釋放試驗）：將處理的患兒紅細胞散液50 μL與25 μL 1%標準紅細胞加入到Liss/Coombs卡第三管中。將所有加完樣本的Liss/Coombs卡管均放入到恒溫孵育箱中，孵育15 min，均放入到離心機內離心10 min，判定結果。新生兒溶血病的判斷標準：抗體釋放試驗為陽性。

1.3 統計學分析：臨床所有數據均采用SPSS19.0軟件進行統計分析，計數資料采用例數和百分比（%）表示，組間行χ2檢驗，以P＜0.05時，表示具有統計學意義。

2 結 果

2.1 測定結果：80例高膽紅素血癥患兒中，確診為ABO-HDN有12例，占15.00%。抗體釋放試驗陽性11例，陽性率91.61%，直抗試驗陽性6例，陽性率50.00%；游離試驗陽性10例，占83.33%。溶血三項測定模式情況見表1。

表1 溶血三項測定模式及結果

2.2 新生兒溶血病血型分布情況：新生兒AB0-HDN血型中，母嬰血清O/A陽性率最高，占58.23%，均高于其他血型，其差異有統計學意義（P＜0.05），見表2。

表2 新生兒AB0-HDN血型分布情況

2.3 新生兒溶血病陽性與患兒日齡關系分析：患兒日齡0～4 d內，陽性率18.52%；患兒日齡＞4 d，陽性率為7.69%，二者經比較，有顯著差異（P＜0.05），見表3。

表3 新生兒溶血病陽性與患兒日齡關系分析

3 討 論

新生兒溶血病的溶血三項檢測是當前普遍認為有效的檢測方法，包括紅細胞直接抗人球蛋白試驗、游離抗體試驗、抗體釋放試驗，紅細胞直接抗人球蛋白試驗陽性表明新生兒紅細胞上存在免疫性抗體IgG，其陽性強度與溶血程度相關，且呈正相關[2-3]。游離抗體試驗主要是檢測新生兒血液中是否存在與紅細胞不合的ABO以外抗體，可為疾病程度提供參考依據[4]。若血清中多余的抗體并未結合到紅細胞中，當產生新的紅細胞后，仍會致敏，有著較長的病程[5]。以上兩種試驗陽性并不能確診新生兒溶血病，而抗體釋放試驗可檢測放散液及酶處理的患兒紅細胞血型IgG抗體。若檢測為陽性，則表明患兒紅細胞與母親的IgG抗體相結合，可直接診斷新生兒溶血病[6]。在本次研究中，80例高膽紅素癥患兒中，有12例為ABO溶血病，抗體釋放試驗陽性率91.83%，均高于其他兩種試驗陽性率，充分證明了抗體釋放試驗有著較高靈敏度，可為新生兒溶血病的診斷提供給依據。且本研究還發現新生兒ABO-HDN血型中母嬰血清O/A陽性率最高58.33%，可能是由于O型血母親缺乏新生兒父親所繼承的血型抗原A或者B型，此種抗原在母親懷孕及分娩時，可進入到母體激活母體免疫系統，進而產生抗A及抗B的IgG抗體，最終引發新生兒溶血病[7]。本次研究還發現新生兒日齡0～4內，陽性率18.52%高于＞4 d的患兒，主要由于新生兒血液中有著較多的游離IgG抗體及致敏的紅細胞，且隨著發病時間的延長，IgG抗體以游離的抗原體抗體復合物而存在，失去反應原性，進而降低了陽性率。因此，應盡早送檢患兒血液，提高新生兒溶血病的診斷率，以免誤診及漏診。

綜上所述，新生兒溶血病三項檢測方法中抗體釋放試驗陽性率最高，溶血病的診斷與送檢時期相關，可為臨床診斷及治療提供參考依據。