黃真
摘 要 為預防動物疫病需要進行建設獸醫實驗室,抗體檢測屬于獸醫實驗室重要工作內容。獸醫實驗室抗體檢測結果受多種因素影響,包括動物自身因素、疫苗因素、實驗室風險因素等均會導致抗體檢測結果失真。本文旨在分析獸醫實驗室中影響抗體檢測結果的因素,提出相關的應對策略。
關鍵詞 獸醫實驗室;影響因素;抗原檢測結果
1 免疫因素
1.1 實驗室物種因素
獸醫實驗室選擇實驗物種之初,需要根據物種綜合情況決定是否將其選入實驗對象,物種患有遺傳性疾病,物種存在長時間營養不良狀況,以及物種所接種的免疫抑制劑對其影響較大。當有上述情況時,會導致實驗室抗體檢測結果失真,影響檢測結果。
1.2 實驗室疫苗因素
獸醫實驗室用于抗體檢測所選用的疫苗質量以及使用期限均對免疫應答現象具有較大影響。為保障抗體檢測結果精密度,需要確??贵w檢測實驗所用疫苗質量良好,獸醫實驗室負責人需要從正規渠道購入實驗所用疫苗,確保選購的疫苗經過國家檢驗審核[1]。
2 樣品因素
2.1 樣品采集時間
完成疫苗注射后一段時間,需要對實驗動物進行樣品收集,測量其抗原確定疫苗作用的最高閾值和最低閾值,計算平均閾值。需要注意樣品采集時間,務必在疫苗作用最高閾值點進行樣品采集,對比不同類型疫苗接種后的最高閾值檢測結果。
2.2 樣品采集方法
向實驗動物注射注射疫苗后,需要采集接種實驗動物的血清樣本作為檢測樣品。死亡的實驗動物血清成分會發生變化,故而必須要采集有生命特征的實驗動物血清樣本進行檢測。抽取動物血液樣本后,需要使用離心機將其進行離心處理獲得血清樣本。
2.3 樣品處理與保存
樣品保存溫度對其質量影響較大,不作處理的實驗物種血清樣品中存在的天然凝血因子會使得血清發生凝固,因此采集到血清樣本后需要添加特殊化學試劑,同時經離心處理以保障其不會發生變質現象[2]。
2.4 樣品分裝
樣品分裝過程中的交叉污染以及實驗器械管理不當均對樣品檢測質量造成嚴重影響,無法保障檢測精密度。
3 實驗室因素
3.1 實驗器械質量
獸醫實驗室研究工作必須依賴實驗器械,實驗器械質量對于實驗檢測結果影響較大,因此需要嚴格把控實驗室器械質量。
3.2 實驗試劑檢測
抗體檢測所用的實驗試劑對與實驗檢測結果影響較大,雖然在購買實驗試劑時選用的廠家均是正規廠家,也是根據國家有關驗收標準進行驗收的,但是不同廠家所生產的實驗試劑所含有的成分元素在一定程度上存在一些差異,這些差異對于抗體實驗檢測結果均存在一定影響。
3.3 實驗室溫度
實驗室溫度是抗體檢測實驗中的重要影響因素,當抗體檢測實驗過程中出現長時間溫度波動變化將會導致抗體檢測結果失真。當實驗室溫度過高時,會導致抗原抗體反應速率偏高,而實驗室溫度過低又會導致抗原抗體反應速率偏低,因此實驗室環境溫度需要穩定在固定范圍內。實驗室設定溫度值通常為25攝氏度,偏離2攝氏度以內情況允許存在。
3.4 時間因素
實驗時間也會影響到抗體檢測結果精確度,實驗時間無法精確到秒引起實驗誤差,實驗順序不同將會導致實驗結果發生偏差。
4 針對影響獸醫實驗室抗體檢測結果的有關對策
4.1 免疫因素干預對策
針對物種因素引發的不良影響,一次實驗選擇同一物種,選擇物種后不宜立即開展實驗研究,需要先經過一段時間人工飼養,觀察物種行為舉止,無遺傳性疾病,營養狀況良好后在開始進行實驗,徹底排除因物種因素引發的實驗途中非正常因素死亡,確保實驗動物在實驗中途死亡是正常死亡,不會誤導研究方向。
鑒于目前市面上假冒偽類疫苗數量較多,以次充好的疫苗不再少數,因而需要從疫苗進貨源頭端把控疫苗質量,購買實驗疫苗需要到貨后需要開箱檢驗,先小批量使用,待質量檢測結果穩定后再加大投入使用量。此外,抗體檢測實驗需要遵循單一變量原則,進行抗體檢測實驗只能在一段時間內注入同一種疫苗,避免注入疫苗數量過多影響抗原檢測結果,無法得出正確判斷。
4.2 樣品因素干預對策
根據實驗疫苗活性越高則實驗物種體內抗原產生速度越快的特點,需要注射活性較高的疫苗進行樣品采集。疫苗一旦被滅活后,實驗物種產生抗體的速度將會減弱,屆時樣品采集時間也勢必會延長,極易發生測不準的情況,為保障采集時間無誤,需要選用生物活性較高的疫苗。
檢驗樣品采集中需要注意不能采集無生命特征的實驗動物血清樣本作為檢測樣品,為保障血清樣本不受污染,順利得到血清檢測結果,工作人員在整個血清樣本獲取和檢測過程中嚴格遵守無菌操作。
樣品處理對于后續實驗數據采集影響較大,因此需要經過特殊抗凝處理,不能直接添加抗凝劑,需要將抗凝劑稀釋后備用。血清樣品必須放置于高溫消毒過的離心試管中,必須要放置在2-4攝氏度環境下進行低溫保存,部分血清樣本需要冷凍保存。低溫下樣品保存時間有一定期限,需要及時檢測。
為保障樣品分裝質量,需要嚴格做好樣品分裝制度管理,在進行分裝過程中,每一份實驗所用血清樣本必須要配備單獨的試劑滴管,不同血清實驗樣本嚴禁混用試劑滴管。結束一輪實驗操作后,需要及時將使用過的實驗器具進行消毒處理,不能留作下一輪實驗使用。
4.3 實驗室因素干預策略
進行抗體檢測前,需要檢查實驗器械靈敏度,發現實驗器械失靈后需要及時維修。實驗室所用抗體檢測器械質量對于抗體檢測結果影響較大,因此需要定期進行檢修保養,使其正常運轉。
在投入新的實驗試劑前,務必要先小批量檢測使用,待檢測結果無偏差后,再進行大量使用,以滿足實驗需求。
實驗室需要設立溫度管理機制,安排工作人員間隔二小時檢測并記錄環境溫度,發現異常時需要及時使用空調設備調整環境溫度。維護實驗環境溫度穩定,可保障抗體檢測結果的實驗嚴謹性,避免實驗結果失真。
為降低實驗時間對實驗造成的干擾,可采取多組實驗法,用以縮小實驗誤差。
5 結語
綜上所述,獸醫實驗室抗體檢測結果偏離正常范圍的影響因素非常多,可通過人為干預將影響因素對檢測結果影響降低最低。為保障獸醫實驗室抗體檢測結果正常,需要加強實驗室管理建設,制定完善的人員管理措施,確保獸醫實驗室工作質量。
參考文獻:
[1]唐春花.血凝試驗檢測結果質量的影響因素及質量改善對策分析[J].臨床醫藥文獻電子雜志,2018,5(40):185+189.
[2]高曉波,黃東風,姚學軍,邱海蓮,劉潔,王彬彬.溶血樣本對禽流感血凝抑制試驗檢測結果的影響[J].當代畜牧,2017(27):47-48.