檜木醇通過mTOR通路抑制自噬誘導卵巢癌SKOV3細胞凋亡①

瞿小玲 曾 儀 姚 利 蔡 政

(南陽市中心醫院產二科，南陽473000)

卵巢癌是導致女性癌癥死亡的第四主要原因，也是死亡率最高的一類女性生殖腫瘤[1]。研究表明，卵巢癌好發于絕經后的女性。但近年來，隨著我國人口老齡化，卵巢癌的發病率呈逐年上升的趨勢，并且其好發人群趨于年輕化[2]。目前，卵巢癌的治療仍以化療為主，但化療僅對早期卵巢癌具有較好療效，化療抵抗性使化療的應用進一步受限[3]。大量研究表明，自噬是癌細胞化療抵抗性形成的主要機制[4]。抑制自噬可降低卵巢癌細胞的化療抵抗性，促進癌細胞死亡，從而減緩癌癥的發展[5]。近年來研究發現草本藥物尤其是植物揮發油在治療癌癥方面具有較大的優勢[6]。檜木醇是提取自臺灣扁柏的一類單貼類化合物，是扁柏精油的主要有效成分，具有抗菌及抗腫瘤活性[7]。Wang等[8]研究發現，檜木醇能誘導乳腺癌和結腸癌細胞自噬性死亡，抑制癌細胞增殖，提示檜木醇能調控癌細胞自噬。但檜木醇對卵巢癌細胞自噬的作用尚未見報道。因此，本文以卵巢癌SKOV3細胞為研究對象，探究檜木醇對卵巢癌細胞自噬的作用及機制，以期為卵巢癌的治療提供新的潛力藥物。

1 材料與方法

1.1材料 DMEM細胞培養液、胎牛血清和0.25%胰蛋白酶購自美國Hyclone公司。檜木醇購自美國Sigma公司，純度 ≥ 99%。RIPA裂解液、CCK8試劑盒和BCA試劑盒購自北京索萊寶生物科技公司。Annexin-FITC/PI試劑盒購自上海銳賽生物技術有限公司。Beclin1、P62、LC3、雷帕霉素靶蛋白 (mammalian target of rapamycin,mTOR) 和UNC-51樣激酶(UNC-51 like kinase 1,Ulk1)一抗購自美國Millipore公司，山羊抗小鼠和山羊抗兔二抗購自北京康為生物科技公司。……