黃芪多糖治療和預防性給藥對感染PR8小鼠的保護作用及機制研究①

盧春化 馬艷梅 王紅霞 薛 凌

(錦州醫科大學附屬第一醫院，錦州121000)

流感病毒感染所致的“細胞因子風暴”是高發病率和病死率的主要原因，機體感染后可產生一系列細胞因子，如TNF-α、IFN-α、IFN-β、IL-6、IL-1、MCP-1等[1-2]。炎癥介質失衡的同時產生過量的氧自由基，引起脂質過氧化，直接誘導組織損傷。MDA、GSH-Px及SOD水平是監測脂質過氧化的代表性指標。MDA是脂質過氧化作用的終產物，反映脂質過氧化程度[3]。而SOD、GSH及GSH-Px是維持機體氧化系統平衡的關鍵酶。當損傷性刺激破壞內膜氧化呼吸鏈，激發氧化應激時，產生的活性氧、脂類、氧化蛋白質等激活Caspase-3、Caspase-8，誘導細胞凋亡[4]。

近來研究發現黃芪多糖具有抗癌、抗病毒、抗凋亡、抗氧化等多種生物活性[5]。本實驗通過構建小鼠流感肺損傷模型，應用黃芪多糖干預，探討其對PR8所致小鼠肺損傷的保護機制。

1 材料與方法

1.1材料

1.1.1實驗動物 SPF級C57BL/6小鼠40只，6周齡，雌性，體質量18～20 g，購自北京維通利華有限公司。

1.1.2主要試劑 黃芪多糖(C10H7ClN2O2S，分子量254.69)購自中國藥品生物制品檢定所；SOD、MDA、GSH試劑盒購自南京建成生物工程研究所；RNA提取及qPCR檢測試劑盒購自QIAGEN；Caspase-3、8、9及β-actin抗體購自Abcam。

1.2方法

1.2.1小鼠模型的建立及給藥 分為正常對照組、PR8模型組、黃芪多糖治療組、黃芪多糖預防組、利巴韋林對照組，每組8只。黃芪多糖預防組:于感染流感病毒PR8前7 d，給予黃芪多糖200 mg/(kg·d)，灌胃給藥，連續給藥7 d。之后用乙醚將各組小鼠麻醉，正常對照組滴鼻30 μl無菌PBS，其余各組滴鼻30 μl PR8稀釋液(滴度:103pfu/鼠)[6]。除預防組外，各組小鼠在PR8感染24 h 后灌胃，1次/d，連續4 d。正常對照組和PR8模型組:灌胃100 μl無菌PBS；……