西羅莫司對大鼠腎間質纖維化的防治作用及機制研究

米海燕 羅湘俊

(南華大學附屬南華醫院腎內科,衡陽421002)

腎間質纖維化(Renal interstitial fibrosis，RIF)是由多種原因引起的細胞外基質(Extracellular matrix,ECM)在腎間質中的過度累積和成纖維細胞的增殖而形成，是發生于多種類型腎臟病的共同途徑和主要病理轉歸，其主要病理特征為腎間質炎癥細胞浸潤以及腎小管萎縮等[1]。自20世紀70年代開始，大多數學者認為單側輸尿管梗阻動物的腎臟病理改變與人體腎間質纖維化相似[2]，可以在一定程度上反映人類腎纖維化的病理特征，所以后來采用動物單側輸尿管梗塞制作腎臟間質纖維化實驗模型被廣泛應用于實驗研究中[3]。西羅莫司(Sirolimus，Sir)主要應用于腎臟、肝臟、胰島移植患者，屬哺乳動物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)抑制劑，具有明顯改善慢性移植物腎病作用，主要表現在延緩腎纖維化[4]。本實驗采用大鼠單側輸尿管梗阻手術制備腎間質纖維化模型，首先對大鼠進行單側輸尿管結扎，以時間分組，觀察不同時間點腎間質纖維化大鼠腎臟的病理變化，記錄成造模時間節點。根據該方法，在手術當天復制模型并將西羅莫司胃內注射給模型大鼠，通過分析阻塞性腎間質病變情況、TGF-β1表達及其相關基因表達等情況，探討西羅莫司減輕大鼠腎間質抗纖維化的可能機制。

1 材料與方法

1.1材料 健康雄性SD大鼠36只，體重(180±20)g。西羅莫司購于輝瑞公司。山羊抗兔TβR-Ⅰ(CST 公司)，山羊抗小鼠α-SMA(Sigma 公司)、兔抗大鼠TGF-β1抗體(武漢博士德生物工程有限公司)，Trizol 試劑盒(美國 Invitrogen公司)。逆轉錄和 PCR 反應試劑(日本 TaKaRa 公司)。……