FGF-21對酒精性肝病的保護作用及其機制研究①

楊國燦 劉 琪

(紹興市人民醫院，紹興312000)

酒精性肝病(Alcoholic liver disease，ALD)是因長期、大量飲用各種含酒精的飲料所致的肝臟損害性病變，主要表現為酒精性脂肪肝、酒精性肝炎和酒精性肝纖維化3種形式[1,2]。酒精性肝病的致病因素單一，即長期大量的酒精攝入。但其發病機制較為復雜，可能與酒精及其代謝產物對肝臟的毒性作用、氧化應激、細胞凋亡、遺傳多態性等多種因素有關[3]。成纖維細胞生長因子(FGF)是由20多個成員組成的、具有多種生物功能的一類細胞因子家族[4]。研究表明FGF-21具有內分泌因子的功能，參與機體物質代謝，維持機體脂肪和糖代謝的平衡[5]。本文旨在研究FGF-21對酒精性肝病的保護作用及其機制。

1 材料與方法

1.1材料 C57/6小鼠由溫州醫科大學劉彥隆教授提供。TaqMan?Universal PCR Master Mix(Thermo Fisher)；SuperScriptTMIII cDNA Kit(Invitrogen)；TRIzol Reagent(Invitrogen)；TG kit(北京普利萊基因技術有限公司)；cDNA 第一鏈合成試劑盒(Invitrogen)。

1.2方法

1.2.1建立ALD小鼠模型 根據文獻[6]報道，采用Lieber-DeCarli(PF)飲食配方和酒精(AF)的處理方法喂養C57/6小鼠4周，建立酒精性肝病模型。最后1周注射重組人FGF-21。頸椎脫臼處死小鼠，留取血清，各組小鼠血液中ALT和AST含量均在全自動生化分析儀上檢測。取其肝臟組織待用。

1.2.2H&E染色觀察各組小鼠肝組織的病理學變化 肝組織于10%中性甲醛中固定，常規方法制作石蠟切片，撈片，烤片；常規脫蠟至水，并進行蘇木素染液2 min，鹽酸酒精分化30 s，自來水返藍，伊紅染液1 min，蒸餾水洗3 min，乙醇梯度酒精脫水，二甲苯透明，中性樹膠封片，拍照，運用Image-ProPlus6.0軟件對圖片進行分析。

1.2.3RNA抽提 應用RNeasy Mini試劑盒提取動物組織總RNA。所得RNA即可用于cDNA合成或-80℃短暫保存備用。……