次側(cè)交叉配血必要性的探討

楊義中

(阜寧縣人民醫(yī)院輸血科，江蘇 阜寧224400)

《臨床輸血技術(shù)規(guī)范》要求輸注紅細(xì)胞成分或含紅細(xì)胞的成份在輸血前必須進(jìn)行交叉配血[1]。交叉配血是保障臨床輸血安全的最后且是最重要的一步，可發(fā)現(xiàn)血型鑒定錯(cuò)誤、是否亞型、是否存在不規(guī)則抗體和直抗陽(yáng)性等因素，確保安全輸血的同時(shí)尚能發(fā)現(xiàn)或診斷某些血液疾病。由于微柱凝膠法靈敏度高、特異性好、操作簡(jiǎn)單、易標(biāo)準(zhǔn)化、結(jié)果可長(zhǎng)時(shí)間保存等優(yōu)點(diǎn)，在各醫(yī)院普遍使用[2]。目前采供血機(jī)構(gòu)提供的絕大多數(shù)為紅細(xì)胞懸液，因含的血漿已經(jīng)很少，故有學(xué)者認(rèn)為可取消次側(cè)交叉配血[3]。現(xiàn)將我們工作中遇到的47例ABO次側(cè)交叉配血不合情況報(bào)告如下。

1 材料與方法

1．1 研究對(duì)象 2011年9月至2017年4月本院申請(qǐng)輸血的患者中，篩選出交叉配血試驗(yàn)出現(xiàn)次側(cè)凝集的紅細(xì)胞共47例。年齡3d～91歲，中位年齡66歲。

1．2 試劑與儀器 抗A、抗B標(biāo)準(zhǔn)血清由上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司提供；A、B、O標(biāo)準(zhǔn)試劑紅細(xì)胞由本室自制，分別來(lái)自3名獻(xiàn)血者。不規(guī)則抗體檢測(cè)試劑(人紅細(xì)胞)由上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司提供，凝聚胺試劑由珠海貝索生物技術(shù)有限公司提供；微柱凝膠卡由長(zhǎng)春博迅生物技術(shù)有限責(zé)任公司提供。FYQ型免疫微柱孵育器、DT-3A血型血清學(xué)離心機(jī)由長(zhǎng)春博研科學(xué)儀器有限責(zé)任公司提供。Baso2005-1血清學(xué)專用離心機(jī)(臺(tái)灣貝索公司)，顯微鏡。

1．3 交叉配血方法 常規(guī)使用微柱凝膠卡式法，嚴(yán)格按試劑說(shuō)明書(shū)操作規(guī)程操作。次側(cè)交叉不合時(shí)，復(fù)核供受者ABO血型（正反定型），再對(duì)獻(xiàn)血者血漿作不規(guī)則抗體篩查和對(duì)患者紅細(xì)胞作自身對(duì)照和直接抗人球蛋白試驗(yàn)，患者直接抗人球蛋白試驗(yàn)陽(yáng)性時(shí)，觀察其是否高于或等于次側(cè)交叉凝集強(qiáng)度，并用凝聚胺法再次進(jìn)行交叉配血。

2 結(jié)果

次側(cè)交叉配血不合47例中，受血者直抗陽(yáng)性36例，占總數(shù)的76．6%，患者血型鑒定錯(cuò)誤8例，獻(xiàn)血者血型錯(cuò)誤1例，獻(xiàn)血者不規(guī)則抗體陽(yáng)性2例，分別占 17．0%，2．1%和 4．3%。 47 例交叉配血次則不合原因分析見(jiàn)表1。

表1 47例交叉配血次則不合原因分類

3 討論

臨床輸血前必須進(jìn)行交叉配血，確定供血者與受血者血液是否相合，以避免溶血性輸血反應(yīng)的發(fā)生。

進(jìn)行次側(cè)交叉配血，能夠發(fā)現(xiàn)供血者、受血者血型錯(cuò)誤。當(dāng)遇到配血次側(cè)有凝集時(shí)必須先復(fù)核患者和獻(xiàn)血者的ABO血型。附表結(jié)果顯示有8例患者血型錯(cuò)誤被發(fā)現(xiàn)，有臨床醫(yī)生申請(qǐng)單填寫錯(cuò)誤，輸血科工作人員未按先檢測(cè)血型，再交叉配血流程，而是根據(jù)所填血型直接交叉配血，此行為嚴(yán)重違反操作規(guī)程，應(yīng)杜絕。患者標(biāo)本標(biāo)識(shí)錯(cuò)誤也不能忽視，我們?cè)诮徊媾溲l(fā)現(xiàn)次側(cè)不符時(shí)，復(fù)核受血者血型錯(cuò)誤，與入院初查血型不符，追查原因?yàn)樽o(hù)理人員同時(shí)采集兩個(gè)患者標(biāo)本，致張冠李戴。目前采供血機(jī)構(gòu)對(duì)獻(xiàn)血者也進(jìn)行ABO正反定型，但仍存在血型標(biāo)識(shí)錯(cuò)誤或血型誤定的可能性[4]。我們就遇到1例在常規(guī)交叉配血次側(cè)凝集時(shí)，復(fù)核獻(xiàn)血者血型是“A”被標(biāo)識(shí)為“AB”，從而避免了一次輸血事故。

我們的結(jié)果表明患者紅細(xì)胞直抗陽(yáng)性是引起次側(cè)交叉配血凝集的主要因素，占76．6%。直接抗人球蛋白試驗(yàn)是用于檢測(cè)患者體內(nèi)紅細(xì)胞是否被不完全抗體和（或）補(bǔ)體致敏。DAT陽(yáng)性是AIHA的重要診斷依據(jù)[5]。故遇此情況時(shí)可向臨床醫(yī)生反饋結(jié)果，協(xié)助診斷AIHA。而交叉配血次側(cè)凝集且DAT陽(yáng)性的病例，其凝集程度均小于或等于DAT凝集強(qiáng)度，說(shuō)明次側(cè)交叉不合的原因是來(lái)自DAT陽(yáng)性，而非抗原抗體反應(yīng)[6]。即可斷定交叉配血試驗(yàn)配合，紅細(xì)胞可以輸注。雖然DAT陽(yáng)性是診斷AIHA的一個(gè)重要指標(biāo)，但是DAT陽(yáng)性并不意味著一個(gè)人紅細(xì)胞存活期的縮短，其并不是導(dǎo)致輸血無(wú)效的真正原因[7]。對(duì)于DAT陽(yáng)性大多數(shù)醫(yī)生選擇洗滌紅細(xì)胞。近來(lái)認(rèn)為DAT陽(yáng)性的非AIHA患者及AIHA患者輸注去白紅細(xì)胞同樣是安全有效[8]。

供血者體內(nèi)存在抗受血者紅細(xì)胞的抗體也是交叉配血次側(cè)不合的一個(gè)因素。我們?cè)谌粘＝徊媾溲校蝹?cè)不合有2例為獻(xiàn)血者血漿含不規(guī)則抗體抗E引起。在我國(guó)，目前沒(méi)有規(guī)定獻(xiàn)血者須進(jìn)行不規(guī)則抗體篩查[9]。但基于獻(xiàn)血人群中存在一定比例的不規(guī)則抗體，紅細(xì)胞血型不規(guī)則抗體在正常人群中檢出率為0．2～3%[10]。國(guó)內(nèi)也曾有專家提出有必要開(kāi)展對(duì)獻(xiàn)血者 （特別是有妊娠史和輸血史）進(jìn)行抗體篩選和鑒定[11]，以減少不規(guī)則抗體進(jìn)入受血者體內(nèi)的可能性，確保輸血安全。當(dāng)進(jìn)行次側(cè)交叉配血出現(xiàn)不合，即對(duì)獻(xiàn)血者進(jìn)行不規(guī)則抗體篩選，證實(shí)存在不規(guī)則抗體時(shí)，輸血科將試驗(yàn)結(jié)果向采供血機(jī)構(gòu)反饋，避免其血漿類制品用于臨床。同時(shí)反饋獻(xiàn)血者，告之有關(guān)情況，特別是計(jì)劃生育女性，評(píng)估其孕育發(fā)生新生兒溶血病風(fēng)險(xiǎn)。特殊罕見(jiàn)的抗體還可貯存作稀有血型檢測(cè)使用。隨著重復(fù)獻(xiàn)血者增多，經(jīng)過(guò)臨床的反復(fù)交叉配血，可提高不規(guī)則抗體檢出率，此不適為目前我國(guó)在獻(xiàn)血者中篩選不規(guī)則抗體既經(jīng)濟(jì)又有效的方法。既發(fā)現(xiàn)抗體消除隱患，又避免在獻(xiàn)血者中大規(guī)模篩選，節(jié)約人力、物力、財(cái)力，符合我國(guó)國(guó)情。根據(jù)規(guī)定，目前臨床上輸注血漿、冷沉淀和機(jī)采血小板時(shí)，患者和供血者不進(jìn)行交叉配血，只是同型或相容輸注，這樣就有可能使供者體內(nèi)的不規(guī)則抗體輸入患者體內(nèi)。如患者紅細(xì)胞正好有相對(duì)應(yīng)的抗原，就會(huì)發(fā)生溶血性輸血不良反應(yīng)，不但輸血無(wú)效，而且對(duì)患者生命安全構(gòu)成危害。在日常工作中，存在將這種含不規(guī)則抗體的血漿和冷沉淀早于紅細(xì)胞用于臨床的現(xiàn)象。故我們建議采供血機(jī)構(gòu)血漿制劑應(yīng)在紅細(xì)胞使用后再發(fā)于臨床使用（最好在紅細(xì)胞有效期35d后再發(fā)于臨床）。

兩種交叉配血方法結(jié)合使用，可取長(zhǎng)補(bǔ)短。微柱凝膠和凝聚胺均為可檢測(cè)IgG抗體的方法。凝聚胺法只有當(dāng)反應(yīng)介質(zhì)中存在紅細(xì)胞抗原特異性的同種抗體或自身抗體并在紅細(xì)胞與紅細(xì)胞之間形成鉸鏈時(shí)才能發(fā)生凝集反應(yīng)，而DAT陽(yáng)性的非AIHA患者紅細(xì)胞表面粘附的非紅細(xì)胞抗原特異性抗體，不能在紅細(xì)胞間形成鉸鏈，不會(huì)發(fā)生凝集反應(yīng)。故可通過(guò)凝聚胺法和紅細(xì)胞釋放試驗(yàn)來(lái)判斷微柱凝膠中的次側(cè)陽(yáng)性究竟是由患者紅細(xì)胞造成的還是獻(xiàn)血者血漿存在不規(guī)則抗體造成的，也有助于區(qū)分AIHA和非AIHA。