血清標本在雅培輔理善越佳型血糖儀比對試驗中應用的可行性探討

邱海山，張桂花，陳莉

(1．惠州市第二人民醫院檢驗科，廣東 惠州 516001；2．惠州市第三人民醫院檢驗科，廣東 惠州 516000；3．廣東醫科大學檢驗學院，廣東 廣州 523808)

床旁（point of care testing，POCT）血糖儀是一種快捷、簡便、不受場所限制。可由非專業人員在靠近患者床旁操作的檢驗篩查辦法，可以明顯縮短檢驗周期，隨時監測血糖變化。與大型生化儀相比，具有攜帶方便，操作簡單，檢測快速，能保存多個結果等優點[1，2]，從而得到醫療機構和糖尿病患者的普遍認可，近年來在非專業的醫學檢驗機構應用愈加廣泛。但它也具有一定局限性，血糖過高、過低、或操作不當易造成檢測偏差[3]。為了保證血糖儀的準確性，衛生部發文規定血糖儀檢測結果與實驗室生化儀要定期進行比對，每半年一次。醫療機構必須建立健全POCT血糖儀臨床使用管理的的相關規章制度，規范POCT血糖儀的質量管理[4]。由此可見，在比對試驗在保證POCT血糖儀結果準確性的重要性。但常規比對試驗中采用的全血標本存在血糖在室溫下易降解，檢測結果受紅細胞壓積及血氧分壓影響，獲取低水平及高水平標本困難等問題，而血清標本中血糖濃度穩定，標本容易獲取。本研究旨在探討血清標本在便攜式血糖儀與全自動生化儀血糖測定結果對比性驗證試驗中的可行性。雅培輔理善越佳型便攜式血糖儀為本院主要機型，因此選擇它作為本次試驗的對象。

1 材料與方法

1．1 儀器與試劑 通過比對驗證的雅培輔理善越佳型便攜式血糖儀1臺，使用配套試紙條，該臺儀器參加當年的衛生部室間質評，成績滿意；雅培CI162000全自動生化儀，試劑為上海科華葡萄糖氧化酶法試劑盒，該檢測系統通過衛生部室間質評及正確度驗證。

1．2樣本準備 按照血糖濃度選擇當天采集的門診患者及體檢科客戶的分離膠靜脈血標本200例，離心分離血清備用，每份標本應有足夠的量（6ml），將200例血清按照血糖濃度水平分為2組，分別為低水平組：血糖濃度＜4．2mmol/L；中高水平組：血糖濃度≥4．2mmol/L。

1．3 方法

1．3．1 樣本檢測 將收集到的符合要求的200例靜脈血標本進行編號為1號到200號，并分為兩組：低水平組（1號到100號）、中高水平組（101號到200號）。檢測操作嚴格按照科室SOP文件的比對試驗操作流程進行，檢測前將200例標本進行離心，取適量的1號標本的血清于玻片上，雅培便攜式血糖儀通過虹吸的方式吸取樣本檢測血糖并記錄數據，然后用全自動生化儀完成檢測并記錄數據。剩下的標本以相同的方法進行檢測和數據記錄。

1.3.2 判斷規則 參照衛生部辦公廳關于 《醫療機構便攜式血糖檢測儀管理和操作規范[5]》血糖濃度<4.2mmol/L時，至少95%的檢測結果誤差在±0.83mmol/L范圍內，血糖濃度≥4.2mmol/L時，至少95%的檢測結果誤差在±20%范圍內。以該標準為判斷規則，達到標準即判斷為合格，反之，為不合格。

1.4 統計方法 統計數據導入Excel，計算偏倚，統計總合格率和各組合格率。

2 結果

100例低水平組（血糖濃度：<4.2mmol/L）血清標本全部通過比對試驗，通過率為100%，100例中高水平組（血糖濃度：≥4.2mmol/L）血清標本有71例通過比對試驗，通過率為71%，總通過率為85.5%，結果見表1。

表1 低、中高水平血糖濃度二組的合格率

3 討論

糖尿病作為一種現代的常見疾病，近年來的發病率呈現不斷上升趨勢，全球約有1.5億2型糖尿病患者[6]。在我國2型糖尿病患病率達到了11.6%[7]。POCT檢驗設備因其自身方便快捷的優勢，在非專業的檢驗機構應用越來越普遍。但是，POCT血糖儀在檢測過程中可干擾因素較多[8]，這就給管理帶了不少問題，保證POCT設備檢測結果的準確性是各大醫療機構急需面對的問題，其對于醫療安全保障、提高人員培訓效率、減輕臨床工作負擔、降低醫療成本都有決定性作用[9]。2010年衛生部辦公廳下發了 《醫療機構便攜式血糖檢測儀管理和臨床操作規范（試行）》的通知，醫療機構應對POCT血糖儀與檢驗科實驗室生化方法結果比對與評估，至少每半年做一次[10]。在實際的比對實驗過程中，由于血糖儀檢測全血標本而大型生化儀檢測血清或血漿標本，多數情況下需要采用抗凝全血作為比對標本，先血糖儀檢測離心后生化儀同時檢測，而全血標本作為實驗會帶來以下問題：首先，全血的葡萄糖會不斷的降解，血糖濃度每小時可下降5%～10%，有研究發現，離體的抗凝血中，葡萄糖通過自然降解不斷降解，在參考區間（3.9～6.1mmol/l）濃度水平附近，血液樣本中葡萄糖通過糖酵解損失的速率大約為5%～7%/h[11]。所以對比實驗應在30min內完成才能有效減少紅細胞降解對血糖濃度的影響[12]，這給大批量的比對試驗帶來了難度，特別是對于大型的三甲醫院，床旁血糖儀數量較多，為了避免血糖降解造成的影響，往往需要分多批次進行實驗，需要消耗大量時間和精力，而采用氟化鈉抗凝的標本雖然能有效抑制血糖的降解，但往往因對POCT血糖儀存在干擾也不能采用，如采用立即分離的血漿或血清，則可穩定24h[13]，從而能使比對實驗基本不受時間的限制。其次，葡萄糖溶于自由水，而紅細胞中所含的自由水較少，所以全血葡萄糖比血清或血漿葡萄糖低10%～15%，且受紅細胞比容影響，一般用血清或血漿測定結果更為可靠；另外全血標本血糖的不穩定性給尋找和留取不同濃度的血糖樣本也造成了困難。因此用POCT血糖儀檢測血清的葡萄糖濃度代替檢測全血中的葡萄糖濃度，能避免以上的情況的影響，簡化比對試驗的流程，具有較高的實際應用價值。

參照衛生部辦公廳關于 《醫療機構便攜式血糖檢測儀管理和操作規范》的血糖儀測量結果判斷準則，100例血糖低水平血清標本比對試驗通過率為100%；100例血糖高水平血清標本比對試驗通過率為71%。研究數據表明不能完全采用血清標本替代全血標本應用于雅培輔理善越佳型便攜式血糖儀與全自動生化儀的比對試驗，只有低水平血糖濃度的血清標本可以代替常規比對試驗的新鮮全血標本，不建議用中水平和高水平血糖濃度的血清標本用于對比試驗。在以后我院比對試驗中，可以采用低濃度血糖的血清標本代替全血做比對試驗，有效降低葡萄糖降解和低濃度血糖標本獲取困難的影響；而中、高水平血糖濃度的血清標本不能完全通過檢測試驗，其原因可能是細胞外液糖濃度明顯高于細胞中，血清標本不含有紅細胞，因此血清葡萄糖更密集，意味著以血清為樣本測得的血糖比末梢血和全血測得的血糖高而超出了血糖儀檢測的線性范圍[14]；從血糖儀設計原理方面來講，紅細胞壓積對其結果影響最大，根據生化儀器的檢測原理，欲獲得信號與被測液體中分子濃度呈函數關系，必須在過程設計上使分子向信號產生表面擴散的一步為最慢步驟，采用測量穩態信號的方式時，要想得到信號-濃度之間的線性關系，就必須按上述原理來設計檢測過程。以酶反應為基礎的葡萄糖傳感器為例來說，就要求酶層外面的擴散控制層（通常為高分子層）能夠有效調節各個擴散分子的通量，使葡萄糖分子通過該層膜的速率是最慢步驟。擴散層厚度直接影響檢測器的信號-濃度關系，擴散層足夠大時，說明擴散控制膜無效，進入反應層的速率太高，無法獲得穩態信號，而血清標本可以看做是極低壓積標本，其中紅細胞極其微量，葡萄糖的擴散速率快于全血標本，擴散控制膜效果不大，低水平血糖因為在血清中分布分散，密度小，進入反應層的速率比中高水平的緩慢，而使得結果穩定且較接近全血；當血糖濃度升高，會使患者丟失很多水分，從而滲透壓升高影響檢測結果[15]。鑒于中高水平標本也有71%的通過率，在實際操作試驗過程中也可采用中高濃度血清標本進行初篩，對于未通過的標本再改用傳統的全血標本進行試驗的方式，也可達到簡化試驗流程，減少影響因素的目的。