羅氏cobas c 702全自動生化分析儀性能驗證

唐妮娜

(泰州市中醫(yī)院檢驗科，江蘇 泰州 225300)

我院于2017年下半年新裝了羅氏cobas 8000全自動流水線，根據(jù)《醫(yī)療機構臨床實驗室管理辦法》[1]和CNAS-CL02《醫(yī)學實驗室質(zhì)量和能力認可準則》[2]的要求，檢測系統(tǒng)在應用于臨床之前應對其性能進行驗證，證明系統(tǒng)性能達到臨床檢測要求的標準[3]。本文對該流水線生化模塊c 702的檢測項目總膽紅素（TBIL）、總蛋白（TP）、丙氨酸氨基轉移酶 （ALT）、γ-谷氨酰基轉移酶 （GGT）、 尿素（UREA）、葡萄糖（GLU）、氯（Cl-）、甘油三酯（TRIG）的分析性能進行驗證，現(xiàn)報道如下。

1 材料與方法

1．1 儀器與試劑 儀器為羅氏cobas 8000全自動流水線的生化模塊c 702，試劑、校準品為原裝羅氏生化試劑。

1．2 樣本來源 羅氏多項生化質(zhì)控物 （低值：PCCC1，批號 132859；高值：PCCC2，批號 144527）；2018年全國臨檢中心常規(guī)化學第一次室間質(zhì)評樣本（201811-201815）；我科臨床病人標本的剩余血清，排除脂血、溶血、黃疸。

1．3 方法

1．3．1 精密度 采用傳統(tǒng)穩(wěn)定樣品多次測量的方法[4，5]，以羅氏多項生化質(zhì)控物為評價樣本。批內(nèi)精密度：兩個水平的質(zhì)控物連續(xù)重復檢測20次，記錄結果并計算`X、SD、CV。批間精密度：兩個水平的質(zhì)控物復溶后分裝20份，-20℃保存，連續(xù)20個工作日各取一份，平衡至室溫機檢，記錄結果并計算`X、SD、CV。以衛(wèi)生行業(yè)標準 WS/T 403-2012《臨床生物化學檢驗常規(guī)項目分析質(zhì)量指標》[6]為評價依據(jù)，批內(nèi)精密度＜1/2CV，日間精密度＜CV進行驗證。

1．3．2 正確度 參考 CLSI EPl5-A2文件[7]， 檢測2018年全國臨檢中心發(fā)放的第一次生化室間質(zhì)評樣本3次，記錄結果并計算均值與靶值的相對偏倚，以＜TEa（WS/T 403-2012）評價正確度。

1．3．3 線性范圍 參考行標文件 WS/T 408-2012《臨床化學設備線性評價指南》[8]的多項式線性評價方法，選取接近廠家申明的線性范圍上下限的高值（H）和低值（L）樣本，將 H和 L樣本按 6H、5H+1L、4H+2L、3H+3L、2H+4L、H+5L、6L 的比例進行配制，充分混勻后機檢，每個濃度測定兩次，記錄結果并進行多項回歸分析。對非線性回歸系數(shù)作t檢驗，選擇最優(yōu)擬合方程。如非線性系數(shù)無統(tǒng)計學意義（P＞0．05），則數(shù)據(jù)組為符合統(tǒng)計學標準的線性（一階線性）。如任一非線性系數(shù)有統(tǒng)計學意義（P＜0．05），則作臨床標準的線性與非線性檢驗，計算ADL（最優(yōu)擬合曲線與直線的平均差異值），查 ADL 臨界值表（WS/T 408-2012 文件表 5、6），如ADL小于臨界值且未標注字母“P”，則判定為臨床可接受的非線性，反之為臨床不可接受的非線性。同時，根據(jù)測定的平均濃度（C）和最優(yōu)擬合方程的回歸標準誤（σ）計算不精密度（σ/C），對數(shù)據(jù)作精密度檢驗。

1．3．4 統(tǒng)計學處理 采用EXCEL 2003辦公軟件和SPSS 19．0統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)處理和統(tǒng)計分析。

2 結果

2．1 精密度驗證 各項目兩個水平的批內(nèi)CV均小于行標文件WS/T 403-2012的分析質(zhì)量指標1/2 CV，批間CV均小于分析質(zhì)量指標CV，驗證通過。見表 1、表 2。

2．2 正確度驗證 2018年全國臨檢中心發(fā)放的第一次生化室間質(zhì)評樣本檢測結果的偏倚均小于行標文件WS/T 403-2012的分析質(zhì)量指標TEa驗證通過。見表3。

2．3 線性范圍驗證 八個項目的最優(yōu)擬合方程分別是：TBIL、BUN、GLU 為一階方程，TP、ALT、K+為二階方程，GGT、TRIG為三階方程。測定數(shù)據(jù)的精密度檢驗，根據(jù)PctBnd（有臨床意義的臨界相關界值）小于5%為臨床可允許的誤差，PctBnd取0．05，測定次數(shù)為12次，計算出不精密度判斷界值分別為 6．9%（一階和二階）、6．79%（三階），各項目的不精密度均小于界值，說明試驗數(shù)據(jù)精密度好，可用作線性評價。查臨界值表，各項目最優(yōu)擬合方程的ADL值均小于臨界且未標注字母“P”，廠家聲明的線性范圍驗證通過。其中，TBIL、BUN、GLU為具有統(tǒng)計學標準的一階線性，TP、ALT、K+為臨床可接受的二階線性，GGT、TRIG為臨床可接受的三階線性。見表4。

表1 批內(nèi)精密度實驗統(tǒng)計結果

表2 批間精密度實驗統(tǒng)計結果

表4 線性范圍實驗統(tǒng)計結果

3 討論

定量試驗的性能驗證包括精密度、正確度及線性范圍的驗證等[9，10]。精密度是指在規(guī)定條件下，對被測對象重復測量所得測量值間的一致程度[11]，反映檢測系統(tǒng)的隨機誤差，是評價檢驗方法、儀器或試劑盒分析性能的首要指標[12]。表1、表2結果顯示本試驗中八個項目的批內(nèi)精密度為0．40%～1．21%，批間精密度為 0．61%～3．42%，分別均小于行標文件WS/T 403-2012的分析質(zhì)量指標1/2CV和CV水平，說明該流水線的c702生化模塊重復性良好，精密度高。正確度是指多次檢測均值與參考值的一致程度[11]，用“偏倚”表示，反映系統(tǒng)誤差大小的程度。本試驗采用2018年全國臨檢中心發(fā)放的第一次生化室間質(zhì)評樣本進行正確度測定，所有結果的偏倚均小于WS/T 403-2012的分析質(zhì)量指標TEa，說明正確度符合臨床要求。

線性范圍是指在給定的測量范圍內(nèi)，使測定結果與樣本中分析物的量直接成比例的能力[8]，是評價檢測系統(tǒng)的重要指標之一[13]，可以認為，線性范圍越寬越適用于臨床[14]。本次線性評價使用了衛(wèi)生行業(yè)標準的多項式回歸分析法，分析結果表明廠家聲明的線性范圍均為臨床可接受。多項式回歸分析法首先假定數(shù)據(jù)組為非線性，檢驗非線性多項式是否較線性多項式與數(shù)據(jù)更為相符，評估最適非線性多項式與線性多項式間的差異是否小于預先設定的允許誤差，同時檢驗測定結果的精密度[8]。此方法能夠敏感的檢出非線性關系，避免低功效的統(tǒng)計學分析，并且計算簡單，可操作性強，具有較好的臨床實用性[15，16]。

羅氏cobas 8000全自動流水線的c 702模塊是羅氏最新的生化檢測設備，采用封閉的檢測系統(tǒng)，所用的試劑和耗材均為羅氏原裝，使檢測的穩(wěn)定性更加可控。本次試驗所分析的結果表明該系統(tǒng)的精密度、正確度及線性范圍能夠滿足臨床檢測要求。