川西北地區人乳頭瘤病毒感染與宮頸病變程度的相關性研究

胥明勇，吳泳樺

(綿陽市中心醫院檢驗科，四川 綿陽 621000)

目前認為宮頸上皮內瘤變（CIN）及宮頸癌發生與人乳頭狀病毒 (Human Papillomaviruses，HPV)感染密切相關[1]。為了了解本地區女性感染HPV的年齡分布情況，以及宮頸病變與HPV感染之間的關系，我們使用HPV基因分型（PCR-反向點雜交法）檢測技術，進行HPV分型檢測研究，探討本地區HPV亞型感染與年齡分布、宮頸病變程度的相關性。

1 材料與方法

1．1 標本來源 收集2015年7月至2016年8月來自我院門診及住院女性患者3947例，年齡14～87歲，平均39．15歲，其中宮頸炎患者955例，宮頸上皮內瘤變140例（CINⅠ～Ⅲ），宮頸癌110例。

1．2 儀器與試劑 珠海黑馬9600擴增儀 （廣州珠海），YN-H16型雜交儀(深圳亞能)；HPV 基因分型試劑(深圳亞能）。

1．3 檢測方法

1．3．1 HPV樣本采集及保存 臨床醫生使用宮頸采集器采集脫落細胞，放入專用取樣管中，貯存于2～8℃冰箱中保存備用。

1．3．2 HPV分型檢測 由工作人員嚴格按HPV基因分型進行檢測，在YN-H16型雜交儀中完成雜交。質控標準：陰性質控品只有內控位點顯色，陽性質控品必須在相應的HPV基因型位點及內控位點顯色；結果判讀：根據顯色信號的有無及位置判斷HPV基因型。該試劑盒能檢測23個亞型，其中包含有 18 種高危亞型：HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68、73、82、83，5 種 低危型：HPV6、11、42、43、81。

1．4 統計學方法 采用SPSS 19．0統計軟件包進行統計學分析，計數資料以率表示，比較采用χ2檢驗，P＜0．05 為差異有統計學意義。

2 結果

2．1 HPV總感染率及亞型分布情況 在3947例臨床標本中21種亞型全部檢出，共檢出HPV陽性1140例，總陽性率為28．88%，其中感染高危型HPV為737例，陽性率為18．67%；感染低危型HPV為182例，陽性率為4．61%；感染混合型（高危型與低危型）HPV為221例，陽性率為5．60%，高危亞型HPV52、16、58檢出率居前3位。

2．2 各年齡組HPV感染情況 HPV感染人群分布以≤40歲年齡組為主，≤20歲組感染率最高，陽性率為 85．29%，明顯高于其它年齡組（P＜0．05），21歲后隨著年齡的增加，其檢出率呈下降趨勢，但大于60歲檢出率又有明顯上升。見表1。

2．3 宮頸病變患者感染HPV結果 三種不同程度宮頸病變患者感染HPV陽性率相比較，P＜0．05，差異具有統計學意義；HPV高危型在三種不同程度宮頸病變患者感染HPV陽性率相比較，P＜0．05，差異有統計學意義。見表2。

表1 各年齡組HPV感染情況

表2 宮頸病變患者感染HPV結果[n（%）]

2.4 HPV亞型在宮頸病變中分布 在955例宮頸炎患者中，陽性率前4位的亞型為HPV16、52、58、51；在140例CIN患者中，陽性率前4位的亞型為HPV16、58、52、33；在 110 例宮頸癌患者中，陽性率前 4 位的亞型為 HPV16、52、53、39。通過對 HPV各亞型在三種不同程度宮頸病變陽性率中相比較，HPV16、58、56、33 差異有統計學意義，P＜0.05（χ2值分別為 31.477、13.138、7.74 和 13.179；P 值分別為 0.000、0.001、0.021和 0.001）， 其余亞型的差異無統計學意義(P＞0.05)。見表3。

3 討論

目前已鑒定出HPV有200多個基因型，其中約50余型可以感染人生殖道[2]。根據發生宮頸癌的風險性將HPV基因型分成高危型和低危型[3]，特別是高危亞型持續感染，可以引起宮頸上皮內瘤病變甚至宮頸癌的發生[4]，故對HPV進行分型研究具有重要的臨床價值。

基因芯片技術被認為宮頸癌篩查首選HPV分型檢測方法，對于宮頸癌的預后評估具有重要的臨床價值。通過該方法檢測發現本地區HPV總陽性率為28.88%，高于三亞地區[5]，而低于浙江地區[6]、貴州地區[7]，其中感染高危型HPV的陽性率為18.67%，卻高于景德鎮地區[8]報道，這些差異也許與地域分布、環境有關，還與研究者選擇的研究對象，選取的檢測方法有關[9]。各亞型在本地區檢出率前3位分別為HPV52、16、58，三亞地區檢出率前3位分別為HPV16、6、58；浙江地區檢出率前3位分別為HPV16、11、58；貴州地區檢出率前3位分別為HPV16、52、58，顯然感染的HPV亞型分布存在一定的地區差異性，這對于HPV疫苗的研發及使用，都具有一定的指導作用[10]。

表3 HPV亞型在宮頸病變中分布[n（%）]

HPV感染的年齡分布結果顯示，HPV感染率與年齡有一定關系。本組資料中≤20歲組陽性率最高為85.29%，明顯高于其它年齡組（P＜0.05），21歲后隨著年齡的增加，其陽性率呈下降趨勢，但大于60歲陽性率又有明顯上升，表明年輕女性及老年女性是本地區HPV感染的主要高發人群。就這感染特點，年輕女性陽性率高也許與患者性生活開始早及生育年齡較小，因這一時期是處于宮頸鱗柱上皮轉化期，易受HPV感染[11]，以及與該年齡段總樣本量太少有關。而老年女性陽性率高可能是由于與機體絕經前后激素水平的改變有關，若宮頸遭到持續的HPV高危型感染，可能進一步引起宮頸惡變，又特別是絕經前感染了HPV高危型沒有及時清除，在絕經后尤其易于發展成為宮頸癌[12]。據李巖[13]研究表明HPV高危型感染與女性陰道內環境的改變存在密切關系，這也許是引起本地區年輕女性及老年女性HPV感染率高的另一個誘因，應引起臨床上高度重視。所以，年輕女性及老年女性成為本地區宮頸癌篩查的主要人群，對預防宮頸癌的發生和早期干預治療具有重要意義。

從宮頸病變患者感染HPV結果可以看出，感染HPV高危型陽性率隨宮頸病變程度的增加而增加，本研究結果與顏曉慧等[14]報道一致，從而說明了HPV高危型感染是引起發生CIN、宮頸癌的首要因素。在宮頸病變患者感染HPV亞型中，經分析陽性率前4位的亞型，HPV16、52為宮頸病變患者共同感染亞型，而HPV58只出現在宮頸炎、CIN中，HPV51只出現在宮頸炎中，HPV33只出現在CIN中，HPV53、39只有出現在宮頸癌中。由此可見， 本地區 HPV16、52、58、53、51、39 和 33 是常見的高危型，在宮頸癌篩查中應引起釋重視。

通過對HPV各亞型陽性率在宮頸病變中相比較，HPV16、58、56和33型與宮頸病變程度相關。對宮頸癌患者進行Meta分析，發現HPV16為宮頸癌患者中最常見亞型[3]，這是因為HPV16在促癌物的作用下能引起人胚宮頸上皮細胞的惡性轉化[15]。在本文研究中，HPV16在宮頸病變陽性率中位于首位，因此針對宮頸炎患者適時篩查、及時治療，對于防止感染了HPV的宮頸炎患者向CIN、宮頸癌轉化具有十分重要的臨床意義。在國內外報道中，宮頸癌患者感染HPV的主要致病型中，HPV18僅次于HPV16，但在本文的研究中HPV18既不是常見的亞型，又不是主要的致病型，這可能是本地區HPV基因型分布特點。在宮頸病變中，雖然HPV52檢測陽性率居于2、3位，但是與宮頸病變程度不相關，然而陽性率相對較低的HPV56、33型，卻與宮頸病變程度相關，還有待進一步研究。本研究認為，在宮頸癌篩查中如發現HPV16、58、56和33型陽性的患者，要及時干預、治療，以防止其發展為宮頸癌。

綜上所述，女性感染HPV，特別是感染了HPV高危型，是引起CIN和宮頸癌發生的主要原因，所以，HPV基因分型檢測對于本地區HPV感染的診斷以及流行病調查具有十分重要的臨床意義。