轉(zhuǎn)基因食品分析檢測(cè)技術(shù)研究進(jìn)展

辛建偉 佟新龍 葛偉強(qiáng)

青島譜尼測(cè)試有限公司

引言：轉(zhuǎn)基因食品具有優(yōu)良的形狀，它的誕生很大程度上解決了糧食短缺、農(nóng)藥污染、食品品質(zhì)低下等問(wèn)題。然而轉(zhuǎn)基因食品所產(chǎn)生的安全隱患值得引起社會(huì)各界的重視。因此，必須使用相關(guān)的食品安全檢測(cè)技術(shù)來(lái)保障轉(zhuǎn)基因食品的安全。

一、轉(zhuǎn)基因食品概論

（一）轉(zhuǎn)基因食品概述。在整個(gè)基因工程中，通過(guò)使用DNA重組技術(shù)，可將外源性基因逐漸轉(zhuǎn)移到其他不同的生物體，而此生物體則會(huì)顯示出具有一定特殊性的遺傳特征，進(jìn)而產(chǎn)生新的基因重組生物體。

（二）轉(zhuǎn)基因食品所存在的問(wèn)題。傳統(tǒng)食品通常被認(rèn)為是安全的，所以在轉(zhuǎn)基因食品出現(xiàn)后引起了廣泛的爭(zhēng)論。在我國(guó)轉(zhuǎn)基因水稻已經(jīng)商品化。那么，轉(zhuǎn)基因植物是不是有危險(xiǎn)？截至目前，并沒(méi)有任何實(shí)驗(yàn)?zāi)軌驕?zhǔn)確地證明轉(zhuǎn)基因植物有不利的方面，當(dāng)然也沒(méi)有實(shí)驗(yàn)證明轉(zhuǎn)基因植物沒(méi)有風(fēng)險(xiǎn)。所以對(duì)轉(zhuǎn)基因的理解僅僅停留在理論方面。在本人看來(lái)，轉(zhuǎn)基因不過(guò)是在基因水平上對(duì)植物進(jìn)行改造，而且在人體內(nèi)會(huì)對(duì)食物進(jìn)行重新的分解利用，所以轉(zhuǎn)基因食品應(yīng)該不會(huì)造成損失。轉(zhuǎn)基因是人類生命科學(xué)史上一次非常重要的發(fā)明，只要合理利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)，就可以解決人類本來(lái)難以解決的問(wèn)題，提高人類的生存質(zhì)量。轉(zhuǎn)基因是在基因的水平上對(duì)動(dòng)植物進(jìn)行改造，表達(dá)出來(lái)的產(chǎn)物是生物有機(jī)分子，在人體內(nèi)也會(huì)被重新利用，合成人體所需的各種物質(zhì)。所以從本質(zhì)上來(lái)看，轉(zhuǎn)基因應(yīng)該不會(huì)對(duì)人類造成傷害。技術(shù)無(wú)罪，關(guān)鍵在于掌握技術(shù)的人。我們應(yīng)該相信我們的生物學(xué)家是為了人類的發(fā)展而努力的。

（三）轉(zhuǎn)基因食品檢測(cè)技術(shù)的內(nèi)容和分類。根據(jù)相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)可知，相關(guān)部門對(duì)轉(zhuǎn)基因食品的安全性檢測(cè)，主要是通過(guò)對(duì)轉(zhuǎn)基因食品的分析檢測(cè)而進(jìn)行的。針對(duì)轉(zhuǎn)基因食品的整個(gè)分析檢測(cè)過(guò)程，主要對(duì)3類物質(zhì)進(jìn)行重點(diǎn)測(cè)定，分別是DNA、蛋白質(zhì)和核酸。在實(shí)際中，因蛋白質(zhì)水平的檢測(cè)方法多用在沒(méi)有經(jīng)過(guò)加工的食品檢測(cè)，且在使用中的局限性比較大，當(dāng)前廣泛使用的是外源基因測(cè)定方法。

二、特異性蛋白檢測(cè)技術(shù)

（一）試紙條法。試紙條法是近些年興起的方法，其通過(guò)反應(yīng)膜毛細(xì)管與示蹤分子結(jié)合到一起，并與固定生物識(shí)別分子發(fā)生反應(yīng)，生成復(fù)合物，同時(shí)在檢測(cè)區(qū)域顯示出顏色，進(jìn)而展開有效的檢測(cè)。在試紙條中，反應(yīng)膜通常具備較好的吸附能力，且有一定的孔隙和濕潤(rùn)度，現(xiàn)階段最為常見的反應(yīng)膜是硝酸纖維素膜。在實(shí)際情況中，試紙條法還可以根據(jù)檢測(cè)物質(zhì)的不同而分為免疫層析試紙條法以及核酸試紙條法。其中，免疫層析試紙條法主要是指利用抗原抗體免疫學(xué)反應(yīng)以及層析反應(yīng)達(dá)到快速檢測(cè)的目的。

（二）酶聯(lián)免疫吸附法

酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)主要是指將抗原抗體與固相載體結(jié)合到一起，利用抗原抗體的特異性反應(yīng)將待測(cè)物與酶連接到一起，繼而通過(guò)顯色情況進(jìn)行快速檢測(cè)。在實(shí)際情況中，根據(jù)操作步驟的不同，可以將該測(cè)定方法分為夾心法、間接法以及競(jìng)爭(zhēng)法等不同的方法。酶聯(lián)免疫吸附法有很多優(yōu)點(diǎn)，如：操作簡(jiǎn)單、檢測(cè)成本低廉、檢測(cè)速度較快、易于操作等，因此，該方法被廣泛引用于生物學(xué)、醫(yī)學(xué)研究等研究領(lǐng)域。現(xiàn)階段，ELISA試劑盒已經(jīng)成功研發(fā)出來(lái)，廣泛應(yīng)用于轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品的檢測(cè)。需要注意的是，ELISA所標(biāo)記的酶需要與其他試劑結(jié)合到一起才能夠產(chǎn)生反應(yīng)，進(jìn)行進(jìn)一步的測(cè)定。

（三）蛋白芯片檢測(cè)技術(shù)

蛋白芯片檢測(cè)技術(shù)是以基因芯片技術(shù)為基礎(chǔ)而發(fā)展起來(lái)的快速檢測(cè)技術(shù)之一，是除了質(zhì)譜技術(shù)、酵母雙雜交技術(shù)之外的另外一種重要技術(shù)。該技術(shù)主要是指將已知序列的蛋白、多肽分子、抗原抗體以及酶等物質(zhì)以預(yù)先設(shè)計(jì)好的方式固定在載體上，進(jìn)行有序排列，待到靶分子以及探針?lè)肿映浞纸Y(jié)合后，再借助激光掃描系統(tǒng)進(jìn)行全面檢測(cè)和分析。該技術(shù)具有很多優(yōu)點(diǎn)，能夠?yàn)檗D(zhuǎn)基因植物蛋白的檢測(cè)提供有效手段。

三、PCR檢測(cè)技術(shù)

（一）PCR檢測(cè)技術(shù)。PCR檢測(cè)技術(shù)是當(dāng)前使用最為廣泛的轉(zhuǎn)基因檢測(cè)技術(shù)，根據(jù)其檢測(cè)原理的不同，可以將其分為定性PCR檢測(cè)技術(shù)以及定量PCR檢測(cè)技術(shù)。其中定性PCR檢測(cè)技術(shù)又包括普通PCR、巢式PCR以及多重PCR等，巢式PCR技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)是可以檢測(cè)出大多數(shù)轉(zhuǎn)基因作物中的CaMV35S啟動(dòng)子以及NOS終止子；而多重PCR具有檢測(cè)快速、準(zhǔn)確性高、效率高、靈敏度高等優(yōu)點(diǎn)。定量PCR則包括競(jìng)爭(zhēng)性定量PCR以及實(shí)時(shí)熒光定量PCR等，二者均在轉(zhuǎn)基因作物的定量檢測(cè)中得到了廣泛的應(yīng)用。現(xiàn)階段，業(yè)界的研究者Hardegger、王小花、白月等人都在對(duì)PCR技術(shù)做進(jìn)一步研究，具有一定的發(fā)展前景。

（二）分子雜交技術(shù)

核酸分子雜交技術(shù)是當(dāng)前應(yīng)用較為廣泛的檢測(cè)技術(shù)之一，該技術(shù)利用已知序列的DNA以及RNA片段來(lái)進(jìn)行未知核酸的檢測(cè)，將外源基因與探針進(jìn)行雜交，形成帶有特殊標(biāo)記的特異性雜交體，并根據(jù)反應(yīng)情況來(lái)做進(jìn)一步檢測(cè)分析。通常情況下，常見的雜交種類主要包括以下幾種：Southern雜交法、Northern雜交法、菌落原位雜交法、斑點(diǎn)雜交法等。在該技術(shù)發(fā)展的過(guò)程中，Sidorov等相關(guān)學(xué)者利用Southernblot技術(shù)對(duì)轉(zhuǎn)基因植株進(jìn)行了檢測(cè)，結(jié)果表明轉(zhuǎn)化效率較低。因此，該方法還在進(jìn)一步的研究中。

結(jié)束語(yǔ)：轉(zhuǎn)基因食品分析檢測(cè)技術(shù)應(yīng)用的主要目的，是評(píng)價(jià)轉(zhuǎn)基因食品的安全性。但是，在現(xiàn)階段，轉(zhuǎn)基因食品分析檢測(cè)的技術(shù)越來(lái)越多，相關(guān)人員在轉(zhuǎn)基因食品分析檢測(cè)中，需要根據(jù)轉(zhuǎn)基因食品的基因片段來(lái)選擇相應(yīng)的檢測(cè)技術(shù)和方法，只有這樣，才能夠在最大程度上保證檢測(cè)技術(shù)的有效性和可靠性。