乳腺癌HER-2基因表達與彩色超聲表現(xiàn)的關(guān)聯(lián)性

劉慧平 牛 艷

乳腺癌是一種婦科常見腫瘤，近些年在我國的發(fā)病率顯著上升，且發(fā)病年齡也呈現(xiàn)年輕化趨勢[1-2]。目前的研究結(jié)果顯示，乳腺癌的發(fā)病原因眾多，病情發(fā)展為階段性，臨床上通常將組織學分級、病理學分級、腫瘤轉(zhuǎn)移情況和腫瘤體積等作為病情和預后的判斷依據(jù)[3-4]。表皮生長因子受體(EGFR)通路是影響腫瘤的重要通路，包括HER-1、HER-2、HER-3和HER-4等成員[5]。HER-2是由原癌基因HER-2/neu編碼的一種分子量為185 KD的跨膜糖蛋白p185，HER-2基因表達與細胞分化、轉(zhuǎn)移、遷移等密切相關(guān)[6-7]。研究表明，25%～30%的浸潤性乳腺癌患者有HER-2基因擴增或蛋白過表達，檢測HER-2表達能為乳腺癌患者的預后判定提供依據(jù)[8]。在乳腺癌的影像學診斷中，鉬靶X線操作技術(shù)簡單，但是在臨床診斷中對患者有一定的損傷[9]。MRI具有無電離輻射、可進行功能成像、軟組織對比性良好等特點，但是檢查費用比較貴，很難進行普及[10]。超聲檢查具有無創(chuàng)傷、簡便快速等優(yōu)點，其中彩色多普勒超聲完善了傳統(tǒng)超聲指標不足的缺點，從全新的視角為腫瘤的評價提供了更多的信息[11]。本文具體探討了乳腺癌HER-2基因表達與彩色超聲表現(xiàn)的關(guān)聯(lián)性，先將研究結(jié)果做如下報告。

1 資料與方法

1.1 一般資料

采用回顧性、總結(jié)研究方法，選擇2013年8月到2018年1月在我院就診的140例乳腺腫塊患者為研究對象，納入標準：女性患者，首次診治，年齡20～80歲，臨床資料完整、詳細。排除標準：合并嚴重心肝腎異常患者；處于哺乳期與懷孕期的女性。140例中經(jīng)病理診斷為乳腺癌80例(惡性組)，包括浸潤性導管癌48例，浸潤性小葉癌32例；良性乳腺腫塊60例(良性組)，包括乳腺纖維腺瘤25例，乳腺腺病20例，乳腺導管內(nèi)乳頭狀瘤15例。本研究得到醫(yī)院倫理委員會的批準。

惡性組患者年齡24～78歲，平均年齡(45.22±5.13)歲；平均體重指數(shù)為(23.45±2.19)kg/m2；平均病程為(7.29±1.28)年；絕經(jīng)狀態(tài)：未絕經(jīng)16例，絕經(jīng)64例；臨床分期：Ⅰ期34例，Ⅱ期30例，Ⅲ期16例；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移40例；組織學分化類型：高分化30例，中分化30例，低分化20例。

良性組患者年齡25～76歲，平均年齡(45.14±3.89)歲；平均體重指數(shù)為(22.65±1.83)kg/m2；平均病程為(4.11±1.82)年；絕經(jīng)狀態(tài)：未絕經(jīng)18例，絕經(jīng)42例。

1.2 超聲檢查

超聲檢查：采用GE Logiq E9超聲診斷儀，配有ML6-15線陣探頭。患者取仰臥位，充分暴露雙側(cè)乳腺及腋窩，于乳腺部位進行橫向、縱向、扇形掃查。在彩色多普勒超聲診斷中，囑患者吸氣后屏氣，獲得多普勒血流頻譜，觀察腫瘤內(nèi)及其周邊的血流分布情況，顯示胸外側(cè)動脈，測定記錄血流峰值速度、阻力指數(shù)。

1.3 HER-2表達檢測

兔抗HER-2單克隆抗體、即用型快捷免疫組化試劑盒購自福州邁新生物技術(shù)開發(fā)有限公司，其余生化試劑都購自北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司。2組患者手術(shù)切除的病灶組織標本離體后立即用10%中性福爾馬林固定，制作成4 μm切片后進行免疫組化分析。腫瘤切片免疫組化染色后，置于光學顯微鏡下觀察，并分析和處理。本實驗的陽性分析用雙盲法，每張切片圖片分別由兩位資深病理科醫(yī)師做出判斷。Her-2陽性細胞染色結(jié)果顯示棕黃色均勻細顆粒主要分布在胞質(zhì)和細胞膜上，根據(jù)病變細胞中陽性細胞所占百分比以及著色深淺來判斷和進行分級，HER-2蛋白(-)或(+)列入陰性范圍；(++)及其以上列入陽性范圍。將已知Her-2陽性腫瘤標本作為陽性對照，將PBS液代替探針混合液作為陰性對照。

1.4 統(tǒng)計方法

對所獲得的計量和計數(shù)數(shù)據(jù)利用SPSS 18.00軟件進行分析，以均數(shù)±標準差或構(gòu)成比表示，差異性檢驗用t檢驗或卡方χ2檢驗，相關(guān)性分析采用直線相關(guān)分析，檢驗水準為α=0.05。

2 結(jié)果

2.1 HER-2表達情況對比

惡性組與良性組的HER-2表達陽性率分別為60.0%(48/80)和10.0%(6/60)，惡性組顯著高于良性組(χ2=54.945，P<0.05)。

2.2 彩色超聲表現(xiàn)

惡性組的胸外側(cè)動脈血流峰值速度和阻力指數(shù)高于良性組，對比差異都有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表1。

表1 2組超聲動脈血流情況對比

2.3 乳腺癌不同病理特征的HER-2表達、血流峰值速度及阻力指數(shù)差異分析

在80例乳腺癌患者中，HER-2表達情況、血流峰值速度、阻力指數(shù)在不同臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、組織學分化中的對比，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表2。

2.4 乳腺癌HER-2表達與彩色超聲表現(xiàn)的關(guān)聯(lián)性

在80例乳腺癌患者中，直線相關(guān)分析顯示HER-2表達陽性與胸外側(cè)動脈血流峰值速度、阻力指數(shù)都有顯著正相關(guān)性(P<0.05)。見表3。

3 討論

乳腺癌一直居婦科腫瘤的首位，利用目前的治療方法治療后的中晚期癌癥患者的5年生存率不高，治療效果仍舊不理想[12]。目前的腫瘤學研究結(jié)果顯示，除腫瘤細胞增殖外，信號傳導通路的變化也是惡性腫瘤生物發(fā)生和發(fā)展因素[13]。HER-2的表達觸發(fā)信號下游的蛋白磷酸化，進而調(diào)節(jié)血管生成和細胞增殖。一些乳腺癌患者體內(nèi)HER-2蛋白表達顯著上調(diào)，從而促發(fā)下游信號通路，引起下游蛋白磷酸化，從而加快腫瘤的發(fā)生和發(fā)展[14]。

表2 乳腺癌不同病理特征的HER-2表達、血流峰值速度、阻力指數(shù)差異分析

表3 乳腺癌HER-2表達與彩色超聲表現(xiàn)的關(guān)聯(lián)性(n=20)

本研究顯示惡性組與良性組的HER-2表達陽性率分別為60.0%和10.0%，惡性組顯著高于良性組(P<0.05)。HER-2能夠編碼一種跨膜酪氨酸激酶受體，調(diào)節(jié)細胞的生長、分化和增殖，通過與EGFR家族成員及其配體之間相互作用在細胞間傳遞信號[15]。相關(guān)研究表明，HER-2的過度表達可加快腫瘤新生血管生成、抑制細胞凋亡，提高腫瘤細胞遷移和侵襲能力，延長腫瘤細胞存活周期，破壞機體組織抗侵襲屏障等[16]。

我國近年來的乳腺癌發(fā)病率正以每年2.0%的速度遞增，嚴重威脅著女性身心健康。早期發(fā)現(xiàn)乳腺癌、早期治療有助于改善患者的預后。目前早期診斷與篩查乳腺癌的方法包括MRI、鉬靶、超聲等。超聲是診斷乳腺癌的常見影像學檢查方法，相關(guān)研究認為乳腺癌的超聲聲像圖表現(xiàn)可見病灶直徑均大于3 cm，認為乳腺腫塊的良惡性可能與病灶的直徑大小有關(guān)[17]。不過常規(guī)超聲的早期診斷率比較低，誤診率也比較高。彩色多普勒超聲具有高靈敏度、特異性和準確率的特點，對乳腺胸外側(cè)動脈進行檢測時，不僅能對其動脈血流量的半定量測定，還可以顯示動脈實質(zhì)、血管及血流動力學等狀況[18]。本研究顯示惡性組的胸外側(cè)動脈血流峰值速度和阻力指數(shù)高于良性組，主要原因是由于乳腺癌腫瘤的的快速增殖，使得胸外側(cè)動脈變細、狹窄結(jié)締組織增加，導致胸外側(cè)動脈血流速度減慢。

只有對HER-2表達狀態(tài)進行科學準確的分析，才能做到既有助于乳腺癌的有效診治，又能為患者的預后提供依據(jù)[19]。本研究顯示在80例乳腺癌患者中，HER-2表達情況在不同臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、組織學分化中的對比差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。HER-2同腫瘤細胞增殖或轉(zhuǎn)移直接相關(guān)，乳腺癌中HER-2的高表達可增強腫瘤的細胞的遷移能力。有研究通過分析認為過表達HER-2可觸發(fā)多種轉(zhuǎn)移機制，進而提高腫瘤細胞轉(zhuǎn)移能力，過表達HER-2可調(diào)節(jié)上皮細胞鈣黏蛋白等黏附因子的表達，進而提高腫瘤細胞轉(zhuǎn)移能力[20]。

典型的乳腺癌因其向周圍組織浸潤，使得周邊呈毛刺樣生長，縱橫比例大于1，部分內(nèi)部可見較豐富血流。典型的良性結(jié)節(jié)則具有邊界清晰，形狀規(guī)則，有包膜，后方回聲增強等特點。然而良惡性腫瘤內(nèi)部血流會出現(xiàn)一定的重疊，診斷特異性不高[21]。本研究直線相關(guān)分析顯示乳腺癌患者的HER-2表達陽性與胸外側(cè)動脈血流峰值速度、阻力指數(shù)都有顯著正相關(guān)性(P<0.05)。當前也有研究表明30%以上的人類惡性腫瘤的上皮源性腫瘤都普遍過量表達HER-2，可見HER-2基因的過表達可能同腫瘤的發(fā)生發(fā)展直接相關(guān)[22]。HER-2表達通過調(diào)節(jié)上皮細胞鈣黏蛋白等黏附因子的表達來促進遷移，也可啟動多種轉(zhuǎn)移機制來加快腫瘤細胞轉(zhuǎn)移[23-24]。

總之，乳腺癌HER-2基因多呈高表達狀況，胸外側(cè)動脈血流峰值速度、阻力指數(shù)也顯著增高，兩者存在顯著關(guān)聯(lián)性。