吳金梅,胡迎利
(河南牧業經濟學院,河南 鄭州 450046)
微生物發酵技術不僅可以提高中藥活性成分含量、提高藥效、降低毒副作用,同時中藥中的成分可促進或抑制其次生代謝產物的產生,生產出包含多種活性成分的制劑或新藥[1]。中醫認為,黨參與黃芪或紅芪配伍,具有補中益氣、健脾益肺、提高生長性能、增強機體免疫力與抗病能力等功效。本實驗利用地衣芽孢桿菌和屎腸球菌的相互促進作用,在不添加C源、N源、礦物質等外源營養因子的條件下,對中藥藥對黨參黃芪(11)和黨參紅芪(11)進行固態發酵,探究復合益生菌固態發酵技術對中藥主要活性成分多糖轉化的影響,研究中藥發酵物中小肽含量變化規律,為中草藥固態發酵技術和開發中藥微生態產品提供理論依據。
地衣芽孢桿菌與屎腸球菌由北京龍科方舟生物工程技術有限公司提供;黨參、黃芪、紅芪 (仲景堂中藥批發有限公司,1年生);無水葡萄糖標準品(貴州迪大生物科技有限責任公司);其它試劑均為分析純。
(1)MRS液體培養基:MRS肉湯(北京奧博星生物技術有限責任公司),在溫度121 ℃條件下滅菌15 min;(2)MRS固體培養基:MRS肉湯、1.5%瓊脂粉,在溫度121 ℃條件下滅菌20 min;(3)LB液體培養基:蛋白胨1.0%、酵母浸粉0.5%、氯化鈉0.5%,在溫度121 ℃條件下滅菌20 min;(4)LB固體培養基:蛋白胨1.0%、酵母浸粉0.5%、氯化鈉0.5%、瓊脂粉1.5%,在溫度121 ℃條件下滅菌20 min。
(1)屎腸球菌種子液制備:將冷凍保存的屎腸球菌菌種接種于MRS固體平皿中,37 ℃靜置培養24 h;……