王利紅,張 偉,2,曹玉嬌
(1.江蘇農(nóng)牧科技職業(yè)學(xué)院,江蘇泰州 225300;2.江蘇姜曲海種豬場,江蘇泰州 225300)
沉默蛋白(Sir2-related Enzymes,Sirtuin)或者沉默信息調(diào)節(jié)因子2(Silence Information Regulator 2,Sir2)最初是在釀酒酵母中發(fā)現(xiàn)的一類高度保守的煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)依賴的組蛋白去乙酰化酶(HDAC)。此后研究發(fā)現(xiàn),從古細菌到人類的生命活動,沉默蛋白都發(fā)揮著重要作用。哺乳動物有7 種Sirtuin同源基因SIRT1-SIRT7,它們具有不同的亞細胞定位和功能[1]。這些蛋白能夠結(jié)合轉(zhuǎn)錄因子、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)因子、細胞骨架蛋白等多種因子,通過去乙酰化反應(yīng)或ADP(Adenosine Diphosphate)核糖轉(zhuǎn)移反應(yīng)參與能量代謝、基因沉默、DNA 損傷修復(fù)、細胞周期調(diào)控和細胞分化等功能過程,是生物學(xué)功能十分廣泛并且作用較為重要的酶類[2]。SIRT5 因具有更大的賴氨酸酰基結(jié)合口袋的結(jié)構(gòu)特點,使其除了具有較弱的去乙酰化酶活性外,還有很強的去琥珀酰化、去丙二酰化和去戊二酰基化酶活性,通過不同的酶活性,參與調(diào)控葡萄糖、氨基酸、脂質(zhì)等多種物質(zhì)代謝過程,并發(fā)揮抗氧化、調(diào)控細胞和線粒體凋亡和炎性反應(yīng)等生物學(xué)功能[3-5]。截至目前,有關(guān)豬SIRT5 基因在組織中表達的研究較少,且尚未見在蘇姜豬組織中表達的研究報道。本研究以蘇姜豬為研究對象,進行SIRT5 基因組織表達和定位檢測分析,旨在從分子遺傳方面深入了解SIRT5基因在豬組織中的表達特征,進而為優(yōu)質(zhì)豬種的選育提供理論參考。
1.1 組織樣的采集 選取體重在85 kg 左右的蘇姜豬6頭(公、母各半)。屠宰后立即采集豬的心臟、肝……