可溶性CD14亞型檢測(cè)作為膿毒血癥標(biāo)志物的探討

趙元明,陸書(shū)華,申愛(ài)華,李曉哲,山鳳蓮

(濟(jì)寧醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院 檢驗(yàn)科,山東 濟(jì)寧272029)

膿毒癥是一種由感染誘發(fā)的以全身炎癥反應(yīng)和器官功能損害為特征的復(fù)雜臨床綜合征，已成為重癥監(jiān)護(hù)病房(ICU)患者的主要死亡原因，病死率可達(dá)30-50%[1,2]。根據(jù)新的膿毒血癥治療指南，早期診斷膿毒血癥對(duì)臨床醫(yī)療救治ICU 患者至關(guān)重要[3]。本研究通過(guò)對(duì)89例血培養(yǎng)陽(yáng)性的膿毒癥患者進(jìn)行血清降鈣素原、C反應(yīng)蛋白、可溶性CD14亞型檢測(cè)，探討可溶性CD14亞型與血培養(yǎng)的相關(guān)性及其對(duì)膿毒癥早期診斷的臨床價(jià)值。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

選取2016年6月至2017年12月本院住院患者，陽(yáng)性病例組：臨床診斷為膿毒癥且血培養(yǎng)陽(yáng)性患者89例，診斷標(biāo)準(zhǔn)符合2012年國(guó)際膿毒癥會(huì)議診斷標(biāo)準(zhǔn)[4]；陰性對(duì)照組：同期住院的非感染SISR患者且血培養(yǎng)陰性259例。兩組臨床資料見(jiàn)表1。

表1 兩組臨床資料

1.2 方法所有患者應(yīng)用抗生素前空腹采血,采集靜脈血 3-5 ml于真空采血管中，3 000 r/min 離心10 min ，分離血清后置于-80℃保存用于檢測(cè) sCD14-ST、PCT、CRP。同時(shí)無(wú)菌操作采集患者靜脈血 15-20 ml，分別注入需氧培養(yǎng)瓶和厭氧培養(yǎng)瓶中。sCD14-ST的測(cè)定：采用ELISA法檢測(cè)患者血清內(nèi)sCD14-ST水平(試劑來(lái)源abbexa)；采用全自動(dòng)生化分析儀(Cobas c702)免疫比濁法檢測(cè)血清CRP 的水平；Roche Cobas e601化學(xué)發(fā)光分析儀檢測(cè)降鈣素原(PCT)；血培養(yǎng)檢測(cè)方法：血培養(yǎng)瓶置于 Bact-ALTERT 3D 血培養(yǎng)儀中進(jìn)行培養(yǎng)，鑒定儀器為法國(guó)生物梅里埃公司生產(chǎn)的 VITEKⅡ，以上均采用設(shè)備配套試劑，所有操作嚴(yán)格按照使用說(shuō)明書(shū)要求進(jìn)行。

1.3 觀察指標(biāo)

血培養(yǎng)以培養(yǎng)出致病細(xì)菌為陽(yáng)性，sCD14-ST>365 pg/mL為陽(yáng)性；CRP>10 mg/ml為陽(yáng)性；PCT>0.5 μg/L為陽(yáng)性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用 SPSS 18.0 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，計(jì)量資料采用t檢驗(yàn)，P<0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。繪制受試者工作特征曲線(ROC)并計(jì)算曲線下面積來(lái)評(píng)價(jià)各指標(biāo)的診斷價(jià)值。

2 結(jié)果

2.1 陽(yáng)性組與陰性對(duì)照組各檢測(cè)指標(biāo)結(jié)果比較陽(yáng)性組與陰性對(duì)照組血清 sCD14-ST、PCT、CRP結(jié)果見(jiàn)表2，陽(yáng)性組患者血清sCD14-ST、PCT、CRP結(jié)果均顯著高于陰性對(duì)照組(P<0.01)。

表2 陽(yáng)性組與陰性對(duì)照組sCD14-ST 、PCT、CRP結(jié)果比較

與陰性對(duì)照組比較：※P<0.01差別有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2.2 可溶性CD14亞型、PCT、CRP與血培養(yǎng)結(jié)果對(duì)比以血培養(yǎng)為診斷膿毒血癥的金標(biāo)準(zhǔn)，sCD14-ST、PCT、CRP與血培養(yǎng)結(jié)果比較見(jiàn)表3。將分析結(jié)果進(jìn)行一致性分析，表明可溶性CD14-ST檢測(cè)結(jié)果與金標(biāo)準(zhǔn)血培養(yǎng)相比，兩種檢測(cè)方法高度一致，Kappa值為0.835；PCT檢測(cè)結(jié)果與血培養(yǎng)相比，兩種檢測(cè)方法基本一致，Kappa值為0.612；CRP檢測(cè)結(jié)果與血培養(yǎng)相比，兩種檢測(cè)方法一致性較差，Kappa值為0.412，表明CRP并不是膿毒癥的理想標(biāo)志物。

表3 sCD14-ST、PCT、CRP檢測(cè)結(jié)果與血培養(yǎng)結(jié)果分析

2.3 sCD14-ST與PCT、CRP預(yù)測(cè)膿毒癥的ROC曲線及AUC值sCD14-ST與PCT、CRP預(yù)測(cè)膿毒癥的ROC曲線見(jiàn)圖1，sCD14亞型AUC值最大，說(shuō)明sCD14亞型在診斷敗血癥的準(zhǔn)確性方面高于PCT、CRP(見(jiàn)表4)。

3 討論

膿毒癥可導(dǎo)致SIRS，但并不是所有的SIRS是有膿毒癥所致，因此,如何鑒別非炎癥性SIRS和膿毒癥性SIRS、早期識(shí)別感染性疾病成了近年來(lái)多學(xué)科討論的熱點(diǎn)和研究的方向。血培養(yǎng)是診斷膿毒血癥的金標(biāo)準(zhǔn)已為臨床共識(shí)[5,6]，但由于各種原因如采血部位、時(shí)間、采血量，抗菌素的應(yīng)用等造成陽(yáng)性率低，并且檢測(cè)周期需48-72小時(shí)，耗時(shí)長(zhǎng)，延誤病情。

圖1 sCD14亞型、PCT、CRP預(yù)測(cè)膿毒癥的ROC曲線

表4 sCD14亞型、PCT、CRP水平診斷膿毒癥ROC曲線的AUC評(píng)價(jià)

2004 年 Shirakawa K發(fā)現(xiàn)了一種新型的生物標(biāo)記物即可溶性 CD14 亞型(soluble CD14 subtype，sCD14-ST)[7]，研究顯示可溶性 CD14 亞型在感染患者中明顯升高，其血清濃度明顯高于非感染患者，認(rèn)為 Presepsin 是機(jī)體應(yīng)對(duì)細(xì)菌感染產(chǎn)生的，對(duì)膿毒血癥診斷的敏感性、特異性均為較好的生物標(biāo)記物[8]。本文研究結(jié)果表1顯示：血培養(yǎng)陽(yáng)性患者組血清可溶性CD14亞型濃度明顯高于血培養(yǎng)陰性患者組(P<0.01)，表明可溶性CD14亞型可作為膿毒癥診斷的標(biāo)志物。

表4結(jié)果顯示sCD14亞型診斷膿毒癥敏感度為82.0%、特異度為98.1%、準(zhǔn)確性為94.0%，將sCD14亞型結(jié)果與血培養(yǎng)結(jié)果進(jìn)行一致性檢驗(yàn)(表3)，Kappa=0.835，表明sCD14亞型結(jié)果與血培養(yǎng)陽(yáng)性結(jié)果有高度的一致性，提示sCD14亞型對(duì)膿毒癥的診斷有一定的優(yōu)勢(shì)。PCT診斷膿毒癥敏感度為77.5%、特異度為86.9%、準(zhǔn)確性為84.5%，將PCT結(jié)果與血培養(yǎng)結(jié)果進(jìn)行一致性檢驗(yàn)，Kappa=0.612，通過(guò)對(duì)比分析兩者間不同的結(jié)果，可溶性CD14亞型的檢測(cè)結(jié)果更符合血培養(yǎng)檢測(cè)結(jié)果(金標(biāo)準(zhǔn))。表明可溶性CD14亞型作為膿毒癥標(biāo)志物優(yōu)于PCT，與Liu等[9]研究的結(jié)果：sCD14-st較PCT和CRP更能準(zhǔn)確地判斷膿毒癥相同。

比較sCD14亞型與降鈣素原、C反應(yīng)蛋白的AUC值，sCD14亞型的AUC值最大，說(shuō)明可溶性CD14亞型檢測(cè)在診斷膿毒癥的準(zhǔn)確性方面高于降鈣素原、C反應(yīng)蛋白。綜上所述：可溶性CD14亞型檢測(cè)結(jié)果與血培養(yǎng)陽(yáng)性結(jié)果高度相關(guān)性、總符合率高，為提供了一個(gè)依靠血培養(yǎng)檢查來(lái)判斷膿毒癥的又一指標(biāo)，為基層醫(yī)院或不具備血培養(yǎng)條件的醫(yī)院提供簡(jiǎn)單、易行的檢測(cè)手段，且將診斷時(shí)間可提前 48-72 h，有助于臨床對(duì)膿毒癥的早期診斷提供有價(jià)值指標(biāo)。