山東省某豬場暴發(fā)豬偽狂犬病病毒和支原體肺炎混合感染的調(diào)查

劉林青,蘭鄒然,董雅琴,李 艷,李 印,張淼潔,翟新驗(yàn)

(1.中國動物疫病預(yù)防控制中心,北京 朝陽 100125；2.山東省動物疫病預(yù)防控制中心,山東 濟(jì)南 250022；3.中國動物衛(wèi)生與流行病學(xué)中心,山東 青島 266032；4.山東省莒南縣動物疫病預(yù)防控制中心,山東 臨沂 276600)

2017年10月15日,山東省某養(yǎng)豬場報(bào)告,該場豬群出現(xiàn)大規(guī)模咳嗽、氣喘等癥狀,并伴有豬只死亡。經(jīng)當(dāng)?shù)乜h級動物疫病預(yù)防控制中心獸醫(yī)專家到現(xiàn)場核實(shí)為該豬場暴發(fā)呼吸道疫病,隨后調(diào)查組到現(xiàn)場開展調(diào)查,報(bào)告如下。

1 方法

1.1 病例定義

1.1.1 可疑病例 2017年9-11月,上述報(bào)告疫病豬場中,出現(xiàn)眼結(jié)膜炎、精神不振、咳嗽、氣喘、噴嚏、體溫升高、神經(jīng)癥狀或死亡的豬只。

1.1.2 確診病例 可疑病例采集的肺臟等組織,經(jīng)實(shí)驗(yàn)室檢測為豬偽狂犬病病毒陽性和/或豬支原體陽性。

1.2 現(xiàn)場調(diào)查 與養(yǎng)殖場場主、場長、飼養(yǎng)員、當(dāng)?shù)匾呖刂行呐R床獸醫(yī)人員進(jìn)行座談交流,詳細(xì)了解了疫病發(fā)生過程、周邊養(yǎng)殖狀況、豬調(diào)運(yùn)情況、飼料來源、人員進(jìn)出、發(fā)病后采取的主要措施等,查閱養(yǎng)殖戶發(fā)病、死亡記錄,了解養(yǎng)殖場對發(fā)病后的診斷和用藥情況。根據(jù)病例定義,尋找可疑病例,進(jìn)行病理剖檢,并采集樣品送實(shí)驗(yàn)室檢測。

1.3 實(shí)驗(yàn)室檢測 采集組織樣品進(jìn)行豬偽狂犬病、豬流感、豬瘟、豬藍(lán)耳病、豬圓環(huán)病毒病的病原學(xué)檢測,檢測方法為PCR或RT-PCR。

1.4 數(shù)據(jù)分析 對該起暴發(fā)的發(fā)生特征進(jìn)行時間和空間描述,以利于發(fā)現(xiàn)病因,驗(yàn)證病因假設(shè),并針對假設(shè)病因提出針對性防控措施,及時控制該疫情。對收集到的數(shù)據(jù)利用Excel、Epi InfoTM7軟件進(jìn)行整理和分析。

2 結(jié)果

2.1 發(fā)病豬場基本情況

2.1.1 地理信息 該養(yǎng)殖場建于2017年8月,位于山東省魯南地區(qū),有育肥舍5棟,每棟舍面積1 200 m2,棟舍內(nèi)劃分38欄,棟舍間距為10 m,該場生活區(qū)和生產(chǎn)區(qū)未設(shè)置物理隔離,場內(nèi)生物安全措施粗放。養(yǎng)殖場周邊空曠,3 km內(nèi)無居民區(qū)和其他養(yǎng)殖場戶。豬場現(xiàn)狀見圖1,場區(qū)布局見圖2。

圖1 發(fā)病豬場的現(xiàn)場

圖2 發(fā)病豬場的場區(qū)分布示意圖

2.1.2 生產(chǎn)情況 該豬場僅飼養(yǎng)育肥豬,9月7日首次引購體重25 kg育肥豬1 300頭,引自河北省某商品豬場(下文簡稱為A豬場),均圈養(yǎng)在1號育肥舍。隨后1個月內(nèi)從山東省某商品豬場(下文簡稱為B豬場)分別引購3批體重15 kg育肥豬,每批1 300余頭,第2批圈養(yǎng)在2、3號育肥舍,第3批圈養(yǎng)在3、4育肥舍,第4批圈養(yǎng)在3、5號育肥舍(見表1)。

2.1.3 人員情況 養(yǎng)殖場有場長1名,飼養(yǎng)員5名,分別負(fù)責(zé)5個棟舍的飼養(yǎng)管理。5位飼養(yǎng)人員吃、住均在一起,要求飼養(yǎng)員進(jìn)出棟舍更換工作服,但并未嚴(yán)格執(zhí)行。

表1 各棟舍存欄及發(fā)病情況

2.1.4 豬偽狂犬疫苗免疫情況 9月21日對第1批(1號育肥舍)豬只免疫豬偽狂犬病疫苗,9月23日對第2批豬免疫豬偽狂犬病疫苗,9月28日對第3批豬免疫豬偽狂犬病疫苗,10月1日對第4批豬免疫豬偽狂犬病疫苗。所用疫苗均為同一生產(chǎn)廠家C,均為Bartha-K61疫苗。

2.2 發(fā)病經(jīng)過 經(jīng)調(diào)查了解,該場9月7日引購進(jìn)育肥豬后,全部圈養(yǎng)在1號育肥舍,當(dāng)日死亡3頭,個別豬只出現(xiàn)氣喘癥狀,隨后陸續(xù)有豬只出現(xiàn)咳嗽、氣喘等癥狀,9月21日出現(xiàn)豬只死亡,隨后豬只持續(xù)出現(xiàn)死亡,發(fā)病豬數(shù)量不斷增加,豬只死亡數(shù)量增加。整個疫病發(fā)生期間,1號育肥舍有近870頭豬發(fā)病,疫病襲擊率為66.9%,病死率為6.21%。10月15日2號育肥舍出現(xiàn)個別豬只咳嗽、發(fā)燒癥狀,2號育肥舍累計(jì)21頭豬發(fā)病,襲擊率為2.1%,無病死豬。根據(jù)豬場記錄進(jìn)行病死豬追溯,繪制流行病學(xué)曲線見圖3。

圖3 豬場發(fā)病豬死亡時間分布圖

該養(yǎng)殖場場長最初判斷為豬流感,并以治療流感的措施給豬只用藥：9月17日,口服電解多維、板藍(lán)根、卡巴匹林,對發(fā)病嚴(yán)重的豬只進(jìn)行抗生素注射治療,個別豬只治愈康復(fù),但仍有陸續(xù)死亡,疫情未見好轉(zhuǎn)；9月21日,對1號育肥舍的豬只實(shí)施偽狂犬病疫苗免疫,免疫劑量為2頭份/頭；9月27日,用氟苯尼考拌料進(jìn)行治療,經(jīng)治療豬只部分康復(fù),但仍有陸續(xù)死亡,整體并未抑制疫情的發(fā)展。10月15日2號育肥舍出現(xiàn)個別豬只咳嗽、發(fā)燒癥狀,場主當(dāng)日報(bào)告當(dāng)?shù)貏游镆卟☆A(yù)防控制中心。疫病發(fā)生期間,3、4、5號育肥舍豬只均未發(fā)病。

周邊發(fā)病情況：場主介紹臨近村有豬場發(fā)生類似疫病,豬只同樣引購自A場。

2.3 臨床診觀察及病理剖檢變化 發(fā)病豬只食欲下降,精神不振,被毛粗亂,皮膚蒼白,消瘦,有咳嗽,氣喘,打噴嚏等癥狀,測量體溫升高(40.5℃ ～41℃),個別豬只出現(xiàn)神經(jīng)癥狀、結(jié)膜炎。發(fā)病4 d后,豬只開始出現(xiàn)死亡。現(xiàn)場剖檢5頭發(fā)病豬只,可見病理變化(見中插彩版圖4)：頜下淋巴結(jié)腫大、出血,切面有壞死灶,肝臟有針尖樣灰白色壞死灶,腎臟有零星灰白色壞死灶,肺臟心葉尖葉對稱性肉變、膈葉有點(diǎn)狀出血、灰白色壞死灶,氣管內(nèi)有黏液,扁桃體有壞死灶[1-2]。根據(jù)臨床癥狀和剖檢病理變化,懷疑為豬偽狂犬病和支原體肺炎混合感染。

圖4 發(fā)病豬剖檢病理變化

2.4 實(shí)驗(yàn)室檢測 無菌采集5頭剖檢豬的肺臟、肝臟、脾臟,送至實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行豬偽狂犬病病毒、豬流感、豬瘟、豬藍(lán)耳病、豬圓環(huán)病毒病的PCR檢測,結(jié)果5份組織樣品均為豬偽狂犬病病原核酸陽性,其中4份組織樣品為豬支原體病原核酸陽性,其余病原均為陰性。

2.5 疑似病因 結(jié)合該場發(fā)病豬的流行病學(xué)特征、臨床癥狀、病理剖檢變化及實(shí)驗(yàn)室檢測結(jié)果,判定引起該豬場發(fā)病、死亡疫情的原因?yàn)樨i偽狂犬病病毒和支原體混合感染。

2.6 干預(yù)治療效果 根據(jù)病因假設(shè),指導(dǎo)該豬場于10月17日緊急免疫豬偽狂犬病疫苗(Bartha-K61),免疫劑量為4頭份/頭,疫苗購自生產(chǎn)廠家D。10月17日針對1號育肥舍和2號育肥舍豬只用藥治療：強(qiáng)力霉素、枝原凈、甘草顆粒拌料1周,氟尼辛葡甲胺飲水3 d。采取措施4 d后電話回訪,采取措施后豬群發(fā)病癥狀明顯好轉(zhuǎn),新發(fā)病例數(shù)明顯下降,死亡數(shù)量下降,10月19日后未再出現(xiàn)新發(fā)病例,10月26日后未再出現(xiàn)病死豬。

3 病因分析

綜合該起疫情暴發(fā)的流行病學(xué)特征、臨床癥狀、病理剖檢、實(shí)驗(yàn)室檢測結(jié)果,以及干預(yù)措施效果,確定引起該豬場發(fā)病的原因?yàn)樨i偽狂犬病病毒與支原體肺炎混合感染,其原因分析如下：

3.1 引購豬苗選場不當(dāng) 該養(yǎng)殖場為新建豬場,并且在引購豬苗前經(jīng)過了嚴(yán)格的沖欄、消毒以及7天以上的空欄時間,不存在豬舍中帶有病原的可能。該養(yǎng)殖場周邊環(huán)境空曠,遠(yuǎn)離主干道,3 km內(nèi)無其他豬場,從周邊豬場通過空氣傳播病原的可能性極小。該場9月份先后在A、B兩個豬場分4批引購豬苗,其中自A場引購的豬苗圈養(yǎng)在1號育肥舍,自B場引購的豬苗圈養(yǎng)在2、3、4、5號育肥舍,且所有豬只的飼料、飲水來源相同。該起疫情最先發(fā)病豬群為1號育肥舍內(nèi)豬群(引購自A場),20 d后,距離1號育肥舍最近的2號育肥舍出現(xiàn)個別豬只發(fā)病,3～5號育肥舍豬群均未發(fā)病,懷疑A場豬苗在到達(dá)該場前已經(jīng)攜帶病原,引購自A場的豬只發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)比是B場的373.7倍(見表2)。在后續(xù)的調(diào)查中發(fā)現(xiàn),臨近村與該場引豬來源相同的養(yǎng)豬場也發(fā)生了相似的疫情,并造成了近10%的死亡率；同時了解到A場為偽狂犬病野毒陽性場,且仔豬沒有免疫支原體疫苗。根據(jù)以上信息推測引購進(jìn)攜帶病原的豬苗可能是引起此次疫情暴發(fā)的最主要原因。

表2 不同引購來源豬只發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)分析

3.2 免疫不合理 在調(diào)查中了解到A場新生仔豬在3日齡進(jìn)行偽狂犬病疫苗滴鼻免疫時并沒有使用專用的噴鼻器,可能導(dǎo)致黏膜免疫效果不佳或免疫失敗。引購到該養(yǎng)殖場后,并未進(jìn)行母源抗體檢測,未根據(jù)母源抗體消漲規(guī)律制定免疫程序,而是根據(jù)經(jīng)驗(yàn)選擇在75日齡進(jìn)行免疫。很可能母源抗體在之前的某一時期已經(jīng)迅速下降,出現(xiàn)了較長的免疫空白期,再加之長途運(yùn)輸?shù)膽?yīng)激導(dǎo)致豬只免疫力下降,從而容易引起疫病的暴發(fā)。此外,推測9月21日的第一次偽狂犬免疫效果不佳,一方面可能因?yàn)槊庖邉┝坎蛔?另一方面可能疫苗質(zhì)量不可靠。

3.3 隔離措施不到位 據(jù)調(diào)查,在個別豬只出現(xiàn)咳嗽、氣喘的疫病早期,沒有及時設(shè)立臨時隔離場所將發(fā)病豬只和疑似豬只挑出進(jìn)行隔離飼養(yǎng),而是圈養(yǎng)在原來欄位,造成疫病在1號育肥舍迅速傳播,并引起鄰近的2號育肥舍個別豬只發(fā)病。

3.4 疫病診斷不準(zhǔn)確 在發(fā)病初期,該養(yǎng)殖場人員并未尋求專業(yè)獸醫(yī)人員進(jìn)行病豬的剖檢及實(shí)驗(yàn)室檢測,而是根據(jù)經(jīng)驗(yàn)判斷為豬流感疫情,從而導(dǎo)致錯過最佳疫病控制時間,造成了大規(guī)模暴發(fā)。后期的病理剖檢檢查及實(shí)驗(yàn)室檢測也證實(shí)了養(yǎng)殖場人員最初的判斷有誤。

3.5 生物安全措施執(zhí)行不嚴(yán)格 雖然該養(yǎng)殖場制定了生物安全措施,但是執(zhí)行不嚴(yán)格、不到位,比如人員可以隨意進(jìn)出豬場、入口處沒有消毒設(shè)施,也是導(dǎo)致疫情擴(kuò)散的原因之一。

4 小結(jié)

通過本次調(diào)查,確定該起疫情由豬偽狂犬病病毒和支原體混合感染所致。傳染源為引進(jìn)的攜帶病原的豬只,免疫不合理導(dǎo)致豬只發(fā)病,未及時對病豬隔離治療導(dǎo)致疫情擴(kuò)散。建議：(1)引購豬苗前了解母豬場背景信息,包括疫病情況、免疫情況、抗體監(jiān)測情況,要求母豬場提供根據(jù)母源抗體監(jiān)測制定的合理免疫程序；(2)盡量從偽狂犬病凈化場引購豬苗,同一飼養(yǎng)批次盡量從同一母豬場引購；(3)豬舍在引購豬苗前要進(jìn)行徹底的沖洗、消毒,空欄7天以上；(4)豬苗到場后應(yīng)電解多維飲水,降低長途運(yùn)輸應(yīng)激,并根據(jù)母豬場疫病情況,制定預(yù)防性用藥措施,避免引進(jìn)豬只免疫水平下降導(dǎo)致發(fā)病；(5)強(qiáng)化飼養(yǎng)人員生物安全意識,嚴(yán)格執(zhí)行生物安全措施,禁止飼養(yǎng)人員串舍,禁止工具交叉使用,定期進(jìn)行場區(qū)環(huán)境消毒；(6)發(fā)生疫情后,及時對發(fā)病豬只進(jìn)行隔離,并送實(shí)驗(yàn)室檢測病原,及早針對病因進(jìn)行治療,將損失降至最小。