氟尼辛葡甲胺對患呼吸道疾病奶牛的解熱效果

王宏磊,劉義明,吳連勇,徐 飛,亢繼俊,陳孝杰,李秀波

(1.中國農業科學院飼料研究所國家飼料藥物基準實驗室,北京 海淀 100081；2.齊魯動物保健品有限公司,山東 濟南 250100)

1 材料與方法

1.1 實驗動物 在北京市郊3個規模化奶牛場中,選擇75頭患有急性呼吸道炎癥的泌乳期黑白花病牛開展試驗。病牛選入標準：病牛表現出急性呼吸道炎癥的一般癥狀,如食欲不振,呼吸困難,流出粘液狀或膿性鼻涕,直腸溫度≥40℃,呼吸頻率≥45次/min。同時患有其他疾病或者動物在試驗前一周之內接受過類固醇類激素或NSAIDs(非甾體抗炎藥)治療的,將被剔除出本試驗。

1.2 試驗藥物 受試藥物：氟尼辛葡甲胺注射液,規格：100 mL含5 g,齊魯動物保健品有限公司生產,批號為1402001。土霉素注射液,齊魯動物保健品有限公司生產,批號為1401001,規格：50 mL含10 g。對照藥物：氟尼辛葡甲胺注射液(福乃達),由先靈葆雅動物保健品公司(法國)提供,批號為CNXC 4598,規格：100 mL 含 5 g。

1.3 主要試劑與耗材 注射器、醫用棉拭子,均購自上海康壽醫療器械有限公司；營養肉湯、營養瓊脂、麥康凱培養基和革蘭染料,均購自北京奧博星生物技術有限責任公司；棉簽和醫用酒精,均購自上海治宇醫療器械有限公司。

1.4 給藥 高、中、低受試藥物組分別經頸靜脈注射 4.4 mg/kg·bw、2.2 mg/kg·bw、1.1 mg/kg·bw的氟尼辛葡甲胺注射液,每日1次,連用5 d,并單次肌肉注射土霉素注射液20 mg/kg·bw,連用5 d；土霉素注射液組,單次肌肉注射20 mg/kg·bw,連用5 d；藥物對照組頸靜脈注射福乃達2.2 mg/kg·bw,連用不超過5 d,并單次肌肉注射土霉素注射20 mg/kg·bw,連用 5 d。

1.5 臨床癥狀觀察評分 在整個試驗期間對患病奶牛進行詳細觀察,記錄給藥前和最后一次給藥后各組奶牛一般臨床癥狀的表現以及癥狀的發展和轉歸情況。在給藥前0 d和最后一次給藥后的第1、2、3、7、14天,記錄各試驗組奶牛的直腸溫度以及呼吸頻率、食欲、呼吸困難以及咳嗽情況等臨床癥狀。在本試驗中,參考Friton G M[20-21]和Bednarek[22]報道的相關文獻并結合臨床實際情況,制定了奶牛臨床癥狀評分表。根據臨床癥狀評分表對各個時間點試驗奶牛進行臨床癥狀評分。根據該評分表,臨床癥狀最嚴重得分為20分,而臨床得分6分意味著奶牛臨床健康。

1.6 細菌分離 在給藥前0 d,每個試驗組抽取5頭牛,采集1次鼻腔分泌物樣本,用多種選擇性培養基培養分離病原菌。將鼻腔分泌物接種至選擇性培養基分離各種病原菌,分離菌株經純化培養后,依據菌落形態、染色特征、生化特點鑒定其種類。主要分離巴氏桿菌、葡萄球菌、鏈球菌等。

表1 奶牛臨床癥狀評分

1.7 臨床效果判定

1.7.1 顯著性檢驗 在給藥前0 d和最后一次給藥后的1、2、3、7、14 d 對奶牛進行臨床檢查并記錄各試驗組奶牛的直腸溫度以及呼吸頻率、食欲、呼吸困難以及咳嗽情況等,根據臨床癥狀評分表對各個時間點試驗奶牛進行臨床癥狀評分。采用SPSS 18.0軟件對各試驗組得分進行重復測量資料的差異顯著性檢驗,比較各試驗組臨床癥狀得分的差異顯著性。

1.7.2 治愈率 (1)治愈：癥狀得分=6分治愈率：給藥后奶牛呼吸道疾病的治愈動物數占組內給藥動物數的百分比,按下列公式計算治愈率。治愈率=(組內治愈動物數/組內給藥動物數)×100%(2)有效率：給藥后奶牛呼吸道疾病病例的有效動物數(包括治愈動物數和有效但未治愈的動物數)占組內給藥動物數的百分比,按下列公式計算有效率。有效率=(組內有效動物數/組內給藥動物數)×100%；(3)無效率：給藥后奶牛呼吸道疾病病例的無效動物數(治療無效的動物數)占組內給藥動物數的百分比,按下列公式計算無效率。無效率=(組內無效動物數/組內給藥動物數)×100%；(4)死亡率：給藥后奶牛呼吸道疾病病例的死亡動物數占組內給藥動物數的百分比,按下列公式計算死亡率。死亡率=(組內死亡動物數/組內給藥動物數)×100%。

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1.8 數據分析 用SPSS 18.0統計軟件對試驗數據進行差異顯著性檢驗,用平均值±標準差的形式表示結果,差異顯著性結果用P≤0.05表示。

2 結果

2.1 奶牛的直腸溫度 由表2可知,經過藥物治療后,各組試驗牛的體溫均由40℃以上降到40℃以下,各時間點奶牛體溫逐漸恢復正常。在最后一次給藥后的第1天,高劑量組和中劑量組與低劑量組和土霉素組相比較,均有顯著性差異(P≤0.05),藥物對照組和高、中、低劑量組及土霉素組之間均無顯著性差異(P＞0.05)。在最后一次給藥后的第1、2、3、7天和14天,高劑量組、中劑量組和藥物對照組之間,直腸溫度無顯著性差異(P＞0.05)。在最后一次給藥后的第14天,高劑量組與低劑量組、土霉素組相比,直腸溫度具有顯著性差異(P≤0.05),中劑量組與土霉素組相比,直腸溫度具有顯著性差異(P≤0.05),高劑量組與中劑量組、藥物對照組之間,直腸溫度無顯著差異(P＞0.05)。高劑量組與中劑量組均比土霉素組在降低動物直腸溫度方面具有更顯著的效果(P≤0.05)。而藥物對照組和其他試驗組之間,均無顯著性差(P＞0.05)。各試驗組奶牛的直腸溫度隨著最后一次給藥后時間的延長逐漸降低,并且在停止給藥后的第1天,奶牛的直腸溫度下降的最快,下降到40℃以下。在試驗結束時,高、中劑量組與藥物對照組的試驗奶牛體溫均低于低劑量組以及土霉素組,而此時土霉素組的奶牛直腸溫度最高。

2.2 奶牛的呼吸頻率 由表3可知,在給藥前各試驗組奶牛呼吸頻率均在50次/min以上。在最后一次給藥后的第1天,各組試驗牛的呼吸頻率均由50次/min以上降到50次/min以下。在最后一次給藥后的第2、3、7、14天,各時間點奶牛呼吸頻率逐漸恢復正常。

2.3 奶牛用藥前鼻腔分泌物病原菌檢測結果 本次試驗中,試驗前0 d各組奶牛所采集鼻腔分泌物樣品中均分離出了巴氏桿菌屬、葡萄球菌屬及鏈球菌屬的細菌。各試驗組之間在所分離細菌的種類上并無明顯的種屬差異,說明本次試驗結果不受各試驗組之間病牛所感染的呼吸道疾病致病菌種類的影響。

表2 各組試驗奶牛給藥前后直腸溫度結果 (℃)

表3 各組試驗奶牛給藥前后呼吸頻率結果 (次/min)

2.4 奶牛臨床癥狀評分 由表4可知,給藥前各試驗組奶牛臨床癥狀評分均無顯著性差異(P＞0.05)。在各試驗組最后一次給藥后的第1天,與本組給藥前相比,臨床癥狀均有顯著性改善(P≤0.05)；高劑量組與土霉素組相比,臨床癥狀改善更顯著(P≤0.05)。最后一次給藥后的第2、3天和7天,高、中、低劑量組、藥物對照組和土霉素組之間相比,臨床癥狀評分之間均無顯著差異(P＞0.05)。最后一次給藥后的第14天,高、中劑量組與土霉素組相比,臨床癥狀得分降低更顯著(P≤0.05)；高、中、低劑量組與藥物對照組相比,臨床癥狀得分雖然無顯著性差異(P＞0.05),但是臨床癥狀得分數值上,高、中劑量組均略低于藥物對照組。

表4 各組試驗奶牛給藥前后癥狀評分顯著性檢驗結果 (平均值)

由表5可知,各試驗組均可以改善奶牛呼吸道疾病臨床癥狀。其中高劑量組對奶牛呼吸道疾病臨床癥狀的改善方面具有更好的效果,中、低劑量組和對照藥物組相比,對奶牛呼吸道疾病臨床癥狀的改善作用較接近,介于高劑量組和土霉素組之間,而土霉素組在奶牛呼吸道疾病臨床癥狀改善方面效果不理想。

表5 各組試驗奶牛給藥前后癥狀評分結果 (總分)

2.5 試驗藥物與對照藥物的臨床效果 高、中、低劑量組、土霉素組和藥物對照組的有效率都是100%,死亡率都是0。由表6可知,試驗組和藥物對照組對奶牛呼吸系統疾病的輔助治療均有良好的效果,其中高、中、低劑量組對奶牛呼吸道疾病第7天的治愈率分別為66.67%、60.00%和46.67%,藥物對照組為60.00%,而土霉素組的治愈率為40.00%。高、中、低劑量組對奶牛呼吸道疾病第14天的治愈率分別為80.00%、73.33%和60.00%,藥物對照組為66.67%,土霉素組為53.33%。在最后一次給藥后的第7天和第14天,各試驗組之間的治愈率沒有顯著性差異(P＞0.05)。

表6 受試藥物和對照藥物對奶牛呼吸道疾病的治愈率

3 討論

氟尼辛葡甲胺屬于非甾體類抗炎藥,對COX-2有選擇性的抑制作用,從而阻止PGs炎癥因子的合成,具有很強的解熱、鎮痛、抗炎效果,能夠改善動物的疾病癥狀[23-24]。本試驗中患病奶牛在給予氟尼辛葡甲胺注射液和土霉素注射液后,患病奶牛的呼吸、咳嗽、直腸溫度和食欲等癥狀都有明顯的好轉,說明氟尼辛葡甲胺對患呼吸道疾病的奶牛具有良好的藥效。

陳大健[25]等通過家兔蛋白胨致熱法研究了氟尼辛葡甲胺的解熱作用。高劑量組(4 mg/kg·bw)的解熱效果強于安乃近和氨基比林組。中劑量組(2 mg/kg·bw)比安乃近組稍差,但是差異不顯著(P＞0.05)。低劑量組(1 mg/kg·bw)和氨基比林的效果相當。丁煥中[2]等對人工感染豬肺炎鏈球菌的豬進行氟尼辛葡甲胺的解熱效果研究,結果表明,氟尼辛葡甲胺比復方氨基比林的解熱效果好,肌肉注射比口服給藥的效果顯著。表明氟尼辛葡甲胺具有解熱效果,這和本試驗對患呼吸道疾病牛的研究結果一致。李世江[14]等對人工感染巴氏桿菌的豬的試驗表明,在給藥后的24 h,高(2.2 mg/kg·bw)中(1.1 mg/kg·bw)、低(0.55 mg/kg·bw)的氟尼辛葡甲胺和氟苯尼考注射液聯合用藥,能夠使豬的體溫由開始的41℃以上下降到正常體溫38.0℃～39.5℃,氟尼辛葡甲胺和氟苯尼考聯合用藥能夠降低巴氏桿菌感染的豬的體溫。而本試驗使用高(4.4 mg/kg·bw)、中(2.2 mg/kg·bw)、低(1.1 mg/kg·bw)劑量的氟尼辛葡甲胺和土霉素聯合用藥,在給藥后第3天,能夠使患呼吸道疾病的牛的體溫降到正常溫度。這說明氟尼辛葡甲胺分別和抗生素氟苯尼考或土霉素聯合用藥都能夠降低患病動物的體溫。高劑量組和中劑量組的臨床癥狀評分都低于低劑量組和藥物對照組,說明高、中劑量組的臨床效果優于低劑量組和藥物對照組,這與本試驗的臨床癥狀評分結果一致。Friton G M[21]等研究了氟尼辛葡甲胺和美洛昔康治療患急性呼吸道疾病牛的效果。將201頭患呼吸道疾病的牛均注射土霉素(20 mg/kg·bw),并將分為氟尼辛葡甲胺(101)和美洛昔康(100)兩組,氟尼辛葡甲胺組按2.2 mg/kg·bw,靜脈注射,美洛昔康組按0.5 mg/kg·bw,皮下注射。試驗對牛的直腸溫度、呼吸頻率、食欲、呼吸困難、咳嗽等進行了考察。結果表明：氟尼辛葡甲胺和美洛昔康作為牛呼吸道疾病抗菌治療中的輔助藥物,具有明顯的效果。這與本試驗得出的結果一致,并推薦的氟尼辛葡甲胺的使用劑量也是2.2 mg/kg·bw。

在給藥后的14 d,高、中、低劑量組的治愈率分別為80.00%、73.33%、60%,氟尼辛葡甲胺在不同的給藥劑量上存在量效關系,并且中劑量組的藥效與高劑量組沒有顯著的差異(P＞0.05),這與陳大健[25]等在家兔上的研究結果一致。Odensvik K[27]等在家兔上的試驗表明：氟尼辛葡甲胺以2 mg/kg·bw的給藥劑量與安乃近以0.2 mg/kg bw的解熱效果一致,而且藥效優于氨基比林。本試驗氟尼辛葡甲胺(2.2 mg/kg·bw)與福乃達(2.2mg/kg·bw)的藥效接近,在最后一次給藥后的7 d和14 d,兩組動物的治愈率沒有顯著差異(P＞0.05)。說明氟尼辛葡甲胺以2.0 mg/kg·bw左右的給藥劑量與安乃近以0.2 mg/kg·bw和福乃達以2.2 mg/kg·bw的給藥劑量具有相近的藥效。Pairis-Garcia M D[28]等對氟尼辛葡甲胺在成年豬上以靜脈給藥、肌肉注射和口服給藥3種形式進行了藥代動力學研究,在Cmax(最大血藥濃度)和F(生物利用率)等方面,靜脈給藥和肌肉注射優于口服給藥,表明口服給藥沒有靜脈給藥和肌肉注射的效果好。

4 結論

與中劑量(推薦劑量)組相比,2倍推薦劑量的高劑量組在降低呼吸道疾病奶牛的高熱和其他癥狀時并無更顯著的臨床效果,增加一倍的用藥支出并無顯著意義,而中劑量組可以得到令人滿意的臨床效果。因此,建議氟尼辛葡甲胺注射液臨床上用于控制呼吸道疾病引起的奶牛高熱時,給藥方式為靜脈給藥氟尼辛葡甲胺注射液2.2 mg/kg·bw,每日1次,連用5 d,并單次肌肉注射土霉素注射液20 mg/kg·bw,連用 5 d。