亞甲基四氫葉酸還原酶基因多態(tài)性與妊娠期高血壓疾病的關(guān)系研究

姚小鳳 徐少勇 張曉萍 薛潔好

廣東省清遠(yuǎn)市婦幼保健院產(chǎn)科，廣東清遠(yuǎn) 511500

妊娠期高血壓是妊娠期特有的疾病，近年來發(fā)病率正在逐年上升，嚴(yán)重危害了母嬰健康?；颊咴谌焉?0周會出現(xiàn)高血壓、水腫等情況，輕者無明顯癥狀，可能出現(xiàn)血壓輕度的升高，伴隨水腫；嚴(yán)重的患者會出現(xiàn)頭痛，且惡心嘔吐，血壓明顯升高，蛋白尿增多[1]?？筛鶕?jù)患者的病史、臨床表現(xiàn)等輔助檢查做出診斷，治療上需要保證患者足夠的休息狀態(tài)，密切觀察患者的生命體征，保證足夠的營養(yǎng)支持[2]。根據(jù)患者的情況適當(dāng)采取降壓措施，必要可進(jìn)行鎮(zhèn)靜處理，對于宮頸條件成熟的患者進(jìn)行引產(chǎn)或剖宮產(chǎn)處理。目前就改疾病的病因尚未明確，但隨著生物技術(shù)的不斷發(fā)展，大量的研究表明，同型半胱氨酸與患者之間有一定的關(guān)系[3]。本文通過選取2016年7月～2017年7月妊娠期高血壓與同期無妊娠期高血壓患者，相互進(jìn)行對比，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2016年7月～2017年7月收治于我院的無妊娠期高血壓患者64例為對照組，選擇同期妊娠期高血壓的患者54例為研究組。其中（1）研究組患者均經(jīng)過臨床專業(yè)醫(yī)師與常規(guī)檢查；（2）兩組患者均無其他疾病影響術(shù)后預(yù)后；（3）無嚴(yán)重心血管疾病及肢體功能障礙患者；（4）病情穩(wěn)定，意識清楚；（5）愿意參與本研究，簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）合并有嚴(yán)重肝腎疾病及精神疾病患者；（2）晚期乳腺癌及其他惡性腫瘤者；（3）溝通障礙、文盲、不愿配合者；（4）臨床資料不全者。對照組患者年齡19～35歲，平均（25.9±4.5）歲；孕周35～38周，平均（37.5±1.5）周；患者文化程度：小學(xué)文化12例，初中文化25例，高中及以上文化27例；研究組患者年齡20～34歲，平均（26.4±5.1）歲；孕周為35～38周，平均孕周（37.1±1.2）周；患者文化程度：小學(xué)文化9例，初中文化21例，高中及以上文化24例。本研究實(shí)施前已獲得醫(yī)學(xué)倫理委員會批準(zhǔn)。兩組患者在年齡以文化水平等方面資料對比上，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。

表1 兩組患者M(jìn)THFR基因C667T多態(tài)性比較[n（%）]

表2 兩組MTHFR基因與A1298C多態(tài)性比較[n（%）]

1.2 方法

兩組患者入院后均抽取空腹12h的外周靜脈血10mL，分別置于兩個(gè)試管中，并標(biāo)明1號試管與2號試管。其中1號試管采用乙二胺四乙酸二鈉抗凝后，使用過注法對基因組DNA進(jìn)行提取，而2號試管通過EDTA抗凝，充分搖勻后，3000r/min離心10min，將上層清液取出，放置于-80℃的超低溫冰箱中保存。使用熒光定量PCR技術(shù)，檢測MTHFR、C677T、A1298C的基因多態(tài)性。反應(yīng)條件：95℃預(yù)變性 10min，60℃延伸 1min，92℃變性 15s，20個(gè)循環(huán)；60℃延伸 90s，89℃變性15s，30個(gè)循環(huán)。反應(yīng)完成后讀取樣品孔中的終點(diǎn)熒光，使用軟件分析確定所有樣本的基因分型結(jié)果。

1.3 觀察指標(biāo)

觀察兩組患者M(jìn)THFR基因C667T多態(tài)性；MTHFR基因與A1298C多態(tài)性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS18.0統(tǒng)計(jì)軟件，計(jì)量資料用（）表示，采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料用百分比表示，采用χ2檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者M(jìn)THFR基因C667T多態(tài)性比較

兩組患者在MTHFR基因頻率TT型、等位基因頻率C*、T#上差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），但MTHFR基因頻率上CC型、CT型的明顯高于對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見表1。

2.2 兩組MTHFR基因與A1298C 多態(tài)性比較

兩組患者在MTHFR基因頻率的AA型、AC型、CC型、等位基因頻率A、C上差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞ 0.05），見表 2。

3 討論

妊娠期高血壓作為臨床上發(fā)病較高的疾病之一，嚴(yán)重威脅了母嬰健康。目前關(guān)于該疾病的發(fā)病機(jī)制尚無明確的研究，給妊娠期高血壓的治療帶來了一定的困難[4]。目前雖然有較多的研究指出該病的發(fā)病問題，但尚無明確的解釋[5]。隨著分子生物技術(shù)的不斷發(fā)展，需要及時(shí)預(yù)測高血壓疾病的風(fēng)險(xiǎn)[6]。

妊娠期高血壓在臨床會出現(xiàn)產(chǎn)后出血且感染，合并其他心臟病等慢性疾病，均會對孕產(chǎn)婦造成死亡。有研究指出[7]，妊娠期高血壓發(fā)病會伴隨不同程度的同型半胱氨酸水平升高，能夠通過誘導(dǎo)細(xì)胞快速進(jìn)入細(xì)胞分裂期達(dá)到繁殖的作用，促進(jìn)并激活血小板聚集，進(jìn)而對血管內(nèi)皮造成一定傷害，導(dǎo)致患者抵抗高血壓等疾病能力下降[8]。臨床上妊娠期高血壓多在患者妊娠20周后發(fā)病，在生產(chǎn)后絕大部分患者的體征與癥狀均會消失，血液能夠恢復(fù)正常[9]。主要是由于母體相關(guān)代謝的變化，導(dǎo)致母體的血壓升高，但隨著胎兒的分娩，能夠使得相應(yīng)的異常蛋白被母體分解，導(dǎo)致血壓不斷的下降[10]。本文通過選取同期妊娠期高血壓患者與妊娠期高血壓，兩組患者在MTHFR基因頻率TT型、等位基因頻率C*、T#上差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），但MTHFR基因頻率上CC型、CT型的明顯高于對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），兩組患者在MTHFR基因頻率的AA型、AC型、CC型、等位基因頻率A、C上差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。因此可推測妊娠期高血壓疾病的發(fā)病與MTHFR基因多態(tài)性有有一定的關(guān)系，其中C667T點(diǎn)能夠作為臨床上較為常見的突變[11]。妊娠期高血壓作為突發(fā)性的高血壓綜合征，在晚期患者會出現(xiàn)腦蛋白與浮腫的情況，甚至導(dǎo)致母嬰出現(xiàn)死亡的情況[12]。且本文結(jié)果能夠說明MTHFR基因是導(dǎo)致妊娠期高血壓的重要因素，不同的位置會有一定的特異性，但不一定能夠引起疾病的出現(xiàn)。在臨床基因的研究中，隨著同型半胱氨酸的升高，會導(dǎo)致內(nèi)皮細(xì)胞損傷，引起內(nèi)皮功能出現(xiàn)紊亂[13]。在本次的研究結(jié)果中，能夠發(fā)現(xiàn)C667T多態(tài)性屬于妊娠期高血壓的危險(xiǎn)指標(biāo)，能夠?qū)⑵渥鳛樵\斷預(yù)后的標(biāo)準(zhǔn)，臨床中可通過該指標(biāo)判斷發(fā)病的風(fēng)險(xiǎn)，及時(shí)采取有效的措施[14]。并在后期的治療中，將其作為治療是否有效的標(biāo)準(zhǔn)之一。隨著胎兒的長大，因基因異常所產(chǎn)生的異常蛋白的增加作用于母體，使之血壓升高，而隨著胎兒的分娩，胎盤的排出，胎兒異?；蛩碌漠惓５鞍字饾u被母體分解代謝，母體血壓也隨之下降，胎兒基因的異常表達(dá)可能是產(chǎn)生妊娠期高血壓疾病的原因之一。因此，我們認(rèn)為可以把胎兒基因作為一項(xiàng)重要的妊娠期高血壓疾病的預(yù)測，檢測父母雙方的基因型，或者通過妊娠早期的遺傳學(xué)檢測，確定胎兒的基因型，對可能發(fā)生的情況，從而進(jìn)行早期預(yù)防[15]。

綜上所述，通過對懷疑有妊娠期高血壓的患者實(shí)施MTHFR基因C677T判斷，作為預(yù)后評價(jià)的重要標(biāo)準(zhǔn)，臨床診斷檢測工作得到有效的提升，對改善母嬰健康有重要的意義。