張慧恩 王彩霞 楊 華*
(1 浙江萬里學(xué)院生物與環(huán)境學(xué)院 浙江寧波315100 2 寧波御坊堂生物科技有限公司 浙江寧波315100)
新鮮度是水產(chǎn)品的重要評價指標(biāo),目前衡量水產(chǎn)品新鮮度最常用的指標(biāo)是K 值。K 值是以水產(chǎn)品體內(nèi)核苷酸在降解過程中產(chǎn)生的一系列化合物作為指標(biāo)的鮮度判定方法[1]?;铙w水產(chǎn)品的肌肉運(yùn)動和生理代謝都需要來自三磷酸腺苷(ATP)轉(zhuǎn)化提供的能量,而水產(chǎn)品死后其體內(nèi)所含的ATP在酶和微生物的共同作用下會降解為二磷酸腺苷(ADP)、腺苷酸(AMP)、肌苷酸(IMP)、次黃嘌呤核苷(HxR)和次黃嘌呤(Hx)[2]。K 值就是次黃嘌呤核苷(HxR)、次黃嘌呤(Hx)量之和與ATP 及降解產(chǎn)物總量的百分比[3]。K 值的大小,能反映魚體在死亡至自溶階段的新鮮程度,是水產(chǎn)品質(zhì)評價的重要鮮度指標(biāo)[4-5]。準(zhǔn)確測定水產(chǎn)品中ATP 關(guān)聯(lián)化合物對水產(chǎn)品的鮮度評價具有重要意義。
目前,K 值的測定方法主要通過各種分離手段,測定樣品中各ATP 關(guān)聯(lián)化合物的含量。常見的分離手段有毛細(xì)管電泳法[6-7]、離子色譜法[8]、反相高效液相色譜法[9-10]等。毛細(xì)管電泳對ATP 關(guān)聯(lián)化合物的分辨率較高,而儀器昂貴;離子色譜法在分離過程中分離柱需要長時間平衡,分析時間長;反相高效液相色譜法具有操作簡單,儀器普及等優(yōu)點(diǎn),如水產(chǎn)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)SC/T3048-2014 魚類鮮度指標(biāo)K 值的測定就是用反相高效液相色譜法測定,然而傳統(tǒng)的反相高效液相色譜法分離核苷酸種類有限,特別是對ATP 關(guān)聯(lián)化合物分析測定時,往往各組分之間的分離度較低,達(dá)不到完全分離的效果?!?br>