不同級別宮頸病變中HR-HPV亞型分布研究

趙現立,高文麗,高巧蓮,賀同強

西北婦女兒童醫院(西安 710061)

我國每年新發的宮頸癌患者約10萬例，在女性生殖系統惡性腫瘤中宮頸癌的發病率和死亡率位居于第一[1]。人乳頭瘤病毒(Human papilloma virus,HPV)與宮頸癌癌前病變和宮頸癌有直接的關系，高危型人乳頭瘤病毒(High risk human papilloma virus,HR-HPV)感染是宮頸癌癌前病變和宮頸癌的病因。不同地域和國家的既往報道中，HR-HPV各個亞型的感染率不盡相同，我們統計宮頸病變不同階段的患者HR-HPV亞型的分布情況，希望對HPV疫苗的研究提供相關數據依據。

資料和方法

1 一般資料 收集2015年1月至2018年6月就診于西北婦女兒童醫院婦科的宮頸病變患者，所有患者均行陰道鏡活檢或錐切后病理報告確診為宮頸鱗狀細胞癌Ⅰ期患者120例，年齡25～66歲，平均年齡(41.1±7.9)歲；宮頸高度鱗狀上皮內病變(High-grade squamous intraepithelial lesion,HSIL)患者120例，年齡22～68歲，平均年齡(40.1±8.9)歲；低度鱗狀上皮內病變(Low-grade squamous intraepithelial lesion,LSIL)患者120例，年齡20～65歲，平均年齡(40.3±6.5)歲。病理診斷的組織蠟塊切片采用蘇木精-伊紅染色法(Hematoxylin-eosin staining,HEL)法(Hematoxylin-eosin staining,HE染色),所有病理報告根據世界衛生組織(WHO)分類法診斷,由本院經驗豐富的病理科醫生做出診斷。當宮頸活檢和宮頸錐切及手術的診斷前后不一致時，則以病變級別更高者為最終診斷。所有患者均無接種宮頸疫苗史。

2 研究方法 所有患者初診時均進行HPV檢查。①標本取樣：膀胱截石位，充分暴露宮頸，將宮頸HPV檢測專用刷放置宮頸管內,順時針旋轉5周,將取好標本的宮頸刷放入專用的標本管內，交實驗室進行檢測。②HPV檢測：采用深圳亞能科技公司HPV分型檢測盒,檢測技術為PCR及膜雜交技術，可以檢測出的HPV高危亞型有以下13種：16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68。

結 果

1 不同宮頸病變中HR-HPV感染率比較 見表1。120例宮頸LSIL的HR-HPV感染者為106例，陽性率88.3%。120例宮頸HSIL的HR-HPV感染者為113例，陽性率94.2%。120例宮頸鱗狀細胞癌Ⅰ期的HR-HPV感染者為114例，陽性率95%。宮頸LSIL與宮頸HSIL兩組比較，感染率差異無統計學意義(χ2=2.557，P=0.11)；宮頸LSIL與宮頸鱗狀細胞癌Ⅰ期兩組比較，感染率差異無統計學意義(χ2=0.315，P=0.062)；宮頸HSIL與宮頸鱗狀細胞癌Ⅰ期兩組比較，感染率差異無統計學意義(χ2=3.491，P=0.062)。120例宮頸LSIL的HR-HPV單一感染者為82例，占比68.3%。120例宮頸HSIL的HR-HPV單一感染者為85例，占比70.8%。120例宮頸鱗狀細胞癌Ⅰ期的單一HR-HPV感染者為86例，占比71.6%。宮頸LSIL與宮頸HSIL兩組比較，感染率差異無統計學差異(χ2=0.177，P=0.674)；宮頸LSIL與宮頸鱗狀細胞癌Ⅰ期兩組比較，感染率差異無統計學差異(χ2=0.317，P=0.573)；宮頸HSIL與宮頸鱗狀細胞癌Ⅰ期兩組比較，感染率差異無統計學意義(χ2=0.20，P=0.887)。120例宮頸LSIL的HR-HPV多重感染者為24例，占比20%。120例宮頸HSIL的HR-HPV多重感染者為28例，占比23.3%。120例宮頸鱗狀細胞癌Ⅰ期的多重HR-HPV感染者為28例，占比23.3%。宮頸LSIL與宮頸HSIL兩組比較，感染率差異無統計學意義(χ2=0.393，P=0.531)；宮頸LSIL與宮頸鱗狀細胞癌Ⅰ期兩組比較，感染率差異無統計學意義(χ2=0.393，P=0.531)；宮頸HSIL與宮頸鱗狀細胞癌Ⅰ期兩組比較，感染率差異無統計學意義(χ2=0.00，P=1)。其中LSIL的HR-HPV雙重感染者為21例，占比17.5%。HSIL的HR-HPV雙重感染者為24例，占比20%。宮頸鱗狀細胞癌Ⅰ期的雙重HR-HPV感染者為23例，占比19.2%。LSIL與HSIL兩組比較，感染率差異無統計學意義(χ2=0.246，P=0.620)；LSIL與宮頸鱗狀細胞癌Ⅰ期兩組比較，感染率差異無統計學意義(χ2=0.111，P=0.739)；HSIL與宮頸鱗狀細胞癌Ⅰ期兩組比較，感染率差異無統計學意義(χ2=0.26，P=0.871)。

表1 不同宮頸病變HR-HPV單一與多重感染的關系 [例(%)]

2 不同宮頸病變HR-HPV亞型分布 見表2。共檢測出13種HR-HPV亞型，在所有患者中，HR-HPV各個分型感染率前五位由高到低分別是16、58、52、33、18。其中，在LSIL組，HR-HPV各個分型感染率前五位由高到低分別是58、16、52、33、31；在HSIL組，HR-HPV各個分型感染率前五位由高到低分別是16、58、33、52、18；在宮頸鱗狀細胞癌Ⅰ期組，HR-HPV各個分型感染率前五位由高到低分別是16、58、18、33、52。在HR-HPV各個亞型中，16亞型的陽性率最高，在所有患者中陽性率為13.3%，在LSIL、HSIL和宮頸鱗狀細胞癌Ⅰ期組中陽性率分別是17.5%、44.2%、51.3%。各組相比，LSIL與HSIL兩組比較，感染率差異有統計學意義(χ2=20.007，P=0.00)；LSIL與宮頸鱗狀細胞癌Ⅰ期兩組比較，感染率差異有統計學意義(χ2=63.287，P=0.00)；HSIL與宮頸鱗狀細胞癌Ⅰ期兩組比較，感染率差異有統計學意義(χ2=14.239，P=0.00)。在HR-HPV各個亞型中，58亞型的陽性率其次，在所有患者中陽性率為24.2%，在LSIL、HSIL和宮頸鱗狀細胞癌Ⅰ期組中分別是33.3%、22.5%、16.7%。各組相比，LSIL與HSIL兩組比較，感染率差異無統計學差異(χ2=3.499，P=0.061)；LSIL與宮頸鱗狀細胞癌Ⅰ期兩組比較，感染率差異有統計學差異(χ2=8.889，P=0.003)；HSIL與宮頸鱗狀細胞癌Ⅰ期兩組比較，感染率差異無統計學差異(χ2=1.296，P=0.255)。在所有HR-HPV亞型中，所有分型最少見的亞型是35亞型。

表2 不同宮頸病變HR-HPV亞型分布(例)

討 論

HPV是一種雙鏈DNA球形外殼無包膜病毒,直徑52～55 nm,屬于乳頭瘤病毒科的乳頭瘤病毒屬，其基因組為雙鏈環狀DNA，大小約7.8～8.0 kb,目前發現有200多種亞型。HPV主要經性活動傳播,不同類型的HPV感染人體不同部位的皮膚黏膜導致不同的疾病，如宮頸癌、尖銳濕疣、陰莖癌等。德國的Harald zur Hausen因為首先發現了HPV病毒與宮頸癌因果關系并在2008年由此獲得了諾貝爾生理學或醫學獎,這一發現提示宮頸癌是一種發病原因清晰、可以早期發現的癌癥，隨著宮頸癌疫苗的發明也可以做到提前預防。

1967 年Richart提出以子宮頸上皮內瘤樣變(CIN), 并提出了用CINⅠ,Ⅱ,Ⅲ分級。既往很多研究是基于對宮頸上皮內瘤樣病變(CIN)分型進行命名。2013 年美國病理學會和美國陰道鏡及宮頸病理學會對宮頸在內的下生殖道HPV感染相關鱗狀上皮病變的命名進行修訂，推薦采用鱗狀上皮內病變(Squamous intraepithelial lesion,SIL)一詞，并分為宮頸低度鱗狀上皮內病變(LSIL) 和宮頸高度鱗狀上皮內病變(HSIL)[2]。2014版WHO 分類采用了這一命名方案，使細胞學與組織學術語相吻合,理論上可以更好地指導臨床治療[3]。邱笑飛等[4]研究對263例CINⅠ,Ⅱ,Ⅲ和宮頸癌Ⅰ期患者進行研究,CINⅠ,Ⅱ,Ⅲ和宮頸癌Ⅰ期HR-HPV感染率分別為95.3%、94.1%、91.5%和87.5%,各級別之間HR-HPV感染率比較差異無統計學意義。張忠明等[5]人的研究顯示CINⅠ，Ⅱ，Ⅲ、宮頸癌組的HR-HPV感染率分別為73%、88.5%、95%、94%。我們在結果中發現，LSIL、HSIL與宮頸鱗狀細胞癌Ⅰ期的患者標本中，均有很高的HR-HPV感染率。HSIL與宮頸鱗狀細胞癌Ⅰ期患者HR-HPV感染率明顯高于LSIL患者。這也證實宮頸癌前病變、宮頸癌變與HR-HPV感染有緊密聯系。

HR-HPV感染的亞型分布上來說，不同國家和地區略有不同，最常見的HR-HPV亞型是16、18、31、33、35、45、52、58，總計超過90%的HR-HPV陽性患者[6]。崔亞杰等[7]人發現CIN I級最常見的HR-HPV亞型是：16、58；CIN Ⅱ級最常見的HR-HPV亞型是16、31；CIN Ⅲ級最常見的HR-HPV亞型是16、52。我們前期的研究[8]提示,CIN患者中最常見的HR-HPV亞型是16、58、33、52、18。張靖等[9]利用Meta分析了國內2004—2013年公開發表的中英文文獻的HPV流行數據，我國HR-HPV前六位感染最多的亞型依次為16、52、58、18、33、31。趙宏喜等[10]指出西安地區女性人乳頭瘤病毒感染最常見的HPV亞型是58型。我們的研究發現,在所有患者中,HR-HPV各個分型感染率前五位由高到低分別是16、58、52、33、18。其中,在LSIL組，HR-HPV各個分型感染率前五位由高到低分別是58、16、52、33、31；在HSIL組,HR-HPV各個分型感染率前五位由高到低分別是16、58、33、52、18；在宮頸鱗狀細胞癌Ⅰ期組，HR-HPV各個分型感染率前五位由高到低分別是16、58、18、33、52。這與目前的發現基本一致，分期差異可能與我們的樣本量偏小有關。

最近已經在國內批準和開展的9價HPV疫苗可以預防的HR-HPV亞型包含16、18、31、33、45、52、58，我們的研究也證實9價HPV疫苗能夠囊括常見的HR-HPV亞型，為宮頸癌預防提供更精確的數據。