方 莉,韓 瑜,許 媛,陳 瑩,鄭 陽
(1.川北醫學院附屬醫院 檢驗科,四川 南充637000;2.川北醫學院 醫學檢驗系,四川 南充637000)
宮頸癌嚴重威脅人類的健康,至今仍是全球女性生殖系統最常見的惡性腫瘤,發病率僅次于乳腺癌,全球每年約有9%的女性新發癌癥病例為宮頸癌,約有8%的女性癌癥患者死于該病[1]。人乳頭瘤病毒(human papillomavirus,HPV)是一種具有高度宿主特異性噬上皮細胞的病毒,人類是其唯一宿主。目前已經發現了100多種HPV基因型,其中至少有40多種基因型主要侵襲生殖道。根據其導致的病變程度,可將其分為高危型(HPV16,18,31,33,35,39,45,51,52,56,58,59,68,73,82等)和低危型(HPV6,11,42,43,44,53,61等)[2]。據Tommasion M等人研究顯示[3]:高危型人乳頭瘤病毒持續侵襲宮頸上皮細胞是引起宮頸病變的必要條件,其中HPV16是最常見的型別。本研究通過分析高危型HPV-DNA在宮頸上皮內瘤變(CINI、CINII、CINIII)及宮頸癌中的分布情況,來探討高危型HPV持續感染與宮頸癌的關系。
收集2015年6月至2016年3月來我院婦科就診的313名宮頸病變患者的標本,患者年齡在22-79歲,平均年齡為40.15±8.95 歲 ,均有性生活史,均無相關手術史。按宮頸病變程度分為4組,其中CINI 66例、CINII 53例、CINIII 76例、宮頸癌118例。
1.2.1宮頸脫落細胞采集 用宮頸取樣器刷取宮頸病灶處脫落細胞,置于無菌玻璃管,密封送檢。
1.2.2檢驗方法
檢測型別:HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、66、68、82型。
檢測儀器:SLAN-96P熒光定量PCR檢測系統。
核酸提?。喊锤呶P腿巳轭^瘤病毒分型核酸測定試劑盒(上海之江生物科技股份有限公司)說明書操作要求進行HPV-DNA提取。
PCR反應體系見表1。

表1 PCR反應體系
PCR反應條件:94 ℃×2 min;93 ℃×10 sec→62 ℃×31 sec,循環40次;單點熒光檢測在62 ℃?!?br>