熊果酸對(duì)小鼠坐骨神經(jīng)損傷后神經(jīng)功能恢復(fù)作用及PSD-95蛋白表達(dá)的影響

曹 劍,張麗敏

(赤峰學(xué)院附屬醫(yī)院,內(nèi)蒙古 赤峰024000)

本實(shí)驗(yàn)制作小鼠周圍神經(jīng)損傷模型，應(yīng)用熊果酸(ursolic acid,UA)進(jìn)行干預(yù),觀察神經(jīng)損傷后PSD95蛋白表達(dá)的變化及髓鞘的形態(tài)學(xué)變化，分析二者的相關(guān)性，探討神經(jīng)損傷后熊果酸對(duì)損傷后修復(fù)與再生的作用。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)分組

選用BALB/c鼠做動(dòng)物模型，共320只 (成年健康雄性，20±2 g,赤峰學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供)，坐骨神經(jīng)損傷模型制作后，隨機(jī)進(jìn)行分組，將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型分為4組，分別是，熊果酸高、中、低劑量干預(yù)組和空白對(duì)照組；每組再根據(jù)神經(jīng)損傷后時(shí)間，隨機(jī)分為8組，分別為：12小時(shí)，1天，3天，5天、1周、2周，4周，8周，每組隨機(jī)分配10只。飼養(yǎng)條件：室溫,普通飲食。

1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物造模

神經(jīng)損傷實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型制作：實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 BALB/c鼠，應(yīng)用硫噴妥鈉(1%濃度，100 mg/kg)進(jìn)行腹腔麻醉,麻醉成功后，將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物俯臥位固定于固定板上,雙下肢及會(huì)陰部脫毛，碘伏消毒，取單側(cè)下肢后方，坐骨神經(jīng)走行部位縱切口約1.5 cm,切開皮膚，顯露皮下梨狀肌下，于梨狀肌下顯露坐骨神經(jīng),隨后鈍性分離坐骨神經(jīng)主干,將神經(jīng)主干在坐骨結(jié)節(jié)下約0.5 cm處離斷,顯微鏡下吻合離斷的坐骨神經(jīng),將切口逐層縫合。

1.3 藥物干預(yù)

將神經(jīng)損傷模型動(dòng)物進(jìn)行腹腔給藥。給藥劑量參照臨床應(yīng)用熊果酸原藥劑量，進(jìn)行等效換算[1]，換算后數(shù)值作為熊果酸干預(yù)的中等劑量，高劑量組與低劑量組以中等劑量組等比數(shù)列計(jì)算確定。通過換算得出各組給藥量數(shù)值分別為：20 mg/kg/d，10 mg/kg/d，5 mg/kg/d。以生理鹽水溶解后按照換算劑量腹腔注射給藥。……