二甲雙胍改善內皮細胞胰島素抵抗作用的研究

畢欣榮,陳澤姣,陳晨晨,印紅梅*,陳海燕*

(1.吉林大學第一醫院 干部病房，吉林 長春130021；2.長春市腫瘤醫院)

二甲雙胍是2型糖尿病的一線用藥，已經成為全球應用最廣泛的口服降糖藥物，已有確切證據表明二甲雙胍具有心血管保護作用，可以降低2型糖尿病患者心血管事件的死亡風險及急性心肌梗死的發生率，且這種心血管保護作用可能獨立于降糖作用之外[1]。目前認為二甲雙胍具有抑制動脈粥樣硬化、改善胰島素抵抗、提高心肌供能、抗炎、調脂、降壓、降體重的綜合作用，但其血管保護的確切機制仍然不明確。我們通過在體外培養人臍靜脈內皮細胞(HUVEC)，建立內皮細胞的胰島素抵抗模型，加入藥物二甲雙胍，觀察其對一氧化氮(NO)，內皮一氧化氮合成酶(eNOS)的影響，探討二甲雙胍改善胰島素抵抗內皮細胞功能的機制。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1細胞 HUVEC由哈爾濱醫科大學生物化學實驗室饋贈。

1.1.2試劑 低糖DMEM培養基(美國Fisher Scientific公司)，胰島素(諾和靈R，丹麥諾和諾德公司)，地塞米松(遂成藥業有限公司)，葡萄糖注射液(中國大冢制藥有限公司)，胰蛋白酶(美國Sigma公司)，胎牛血清(GIBCO)，二甲基亞砜(DMSO)(SIGMA公司)，四甲基偶氮唑藍(MTT)(美國Amerson公司)，葡萄糖試劑盒(南京建成生物制品有限公司)，NO試劑盒(南京建成生物制品有限公司)，ET-1試劑盒(南京建成生物制品有限公司)。

1.2 方法

1.2.1血管內皮細胞胰島素抵抗模型的建立及鑒定 HUVEC 用 5.5 mM 的 DMEM 培養基培養。第3至4代內皮細胞，待細胞長滿培養瓶底后，倒掉舊培養基，用 D-Hanks 液輕輕蕩洗 3 次……