中性粒細(xì)胞和中性粒細(xì)胞/淋巴細(xì)胞比值在腎綜合征出血熱患者預(yù)測(cè)價(jià)值分析*

孟 欣，張 寧

(西安交通大學(xué)第一附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科，陜西西安 710061)

腎綜合征出血熱(HFRS)是危害人類健康的重要傳染病，是由流行性出血熱病毒(漢坦病毒)引起的以發(fā)熱、出血和腎功能損害為主要臨床特征的自然疫源性疾病，流行廣、病情危急、病死率高、危害極大[1-2]。中國(guó)是世界上HFRS疫區(qū)分布最廣、報(bào)告病例最多、受其影響最為嚴(yán)重的國(guó)家[3]。2011-2015年陜西省累計(jì)報(bào)告HFRS 10 026例,年均發(fā)病率為5.35/10萬[4]。中性粒細(xì)胞(NC)在殺傷HFRS病毒感染的巨噬細(xì)胞中發(fā)揮重要作用。近年多個(gè)研究顯示，中性粒細(xì)胞/淋巴細(xì)胞比值(NLR)作為一種新型預(yù)測(cè)標(biāo)志物，與多種惡性腫瘤、炎癥、糖尿病、神經(jīng)系統(tǒng)腦損傷后發(fā)生進(jìn)展性出血相關(guān)[5-11]，但NLR在HFRS等傳染性疾病的早期預(yù)測(cè)診斷價(jià)值研究尚不清楚。因此，本研究擬以HFRS患者為研究對(duì)象，分析NC、NLR與HFRS相關(guān)指標(biāo)的關(guān)系，以期發(fā)現(xiàn)NC、NLR的預(yù)測(cè)價(jià)值。

1 資料與方法

1.1一般資料 收集2015年1月至2018年4月在西安交通大學(xué)第一附屬醫(yī)院感染科收治的119例HFRS患者(HFRS組)，其中男95例，女24例，平均年齡(51.0±22.5)歲，臨床癥狀和輔助診斷結(jié)果均符合流行性出血熱診斷標(biāo)準(zhǔn)(WS278-2008)。如果出現(xiàn)以下情況將在列表中刪除：合并其他感染性疾病、惡性血液病。健康對(duì)照組：選擇體檢人群共計(jì)150例，其中男91例，女59例，平均年齡(44.3±13.8)歲。HFRS與健康對(duì)照組之間年齡、性別比例差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2方法 采用Sysmex XN3000全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀檢測(cè)NC，并計(jì)算NLR[NLR=NC/淋巴細(xì)胞數(shù)(LC)]；采用VITROS 5600生化免疫分析與檢測(cè)尿素氮(BUN)、肌酐(CREA)；采用迪瑞L600尿干化學(xué)分析儀檢測(cè)尿蛋白；漢坦病毒抗體檢測(cè)(膠體金法)采用廈門波生生物技術(shù)有限公司試劑盒。

2 結(jié) 果

2.1兩組NC、LC、NLR、BUN、CREA等水平比較 與健康對(duì)照組相比，HFRS組白細(xì)胞計(jì)數(shù)(WBC)、NC、LC、NLR、BUN、CREA水平顯著升高，血小板(PLT)顯著減低，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表1。

表1 兩組NC、LC、NLR、BUN、CREA水平比較

注：-此項(xiàng)無數(shù)據(jù)

2.2NC、NLR預(yù)測(cè)HFRS的診斷價(jià)值分析 NLR預(yù)測(cè)HFRS的ROC曲線下面積(AUC)為0.711，95%CI為0.645～0.777，P=0.000。NC預(yù)測(cè)HFRS的AUC為0.812，95%CI為 0.758～0.866，P=0.000。LC預(yù)測(cè)HFRS的AUC為0.622，95%CI為 0.549～0.696，P=0.001。NC預(yù)測(cè)HFRS臨界值為6.56(靈敏度0.546，特異度0.967)，NLR預(yù)測(cè)HFRS臨界值為2.78(靈敏度0.538，特異度0.873)，表明NC比NLR預(yù)測(cè)HFRS的靈敏度和特異度更高，見圖1。

2.3NLR與HFRS實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)的關(guān)系 HFRS IgM 陽性患者NLR水平顯著高于IgM 陰性患者，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。而NLR在HFRS IgG陰性和陽性患者及尿蛋白1+和尿蛋白3+患者間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見圖2、表2。

圖1 NC、NLR預(yù)測(cè)HFRS的ROC曲線

項(xiàng)目HFRS IgM陽性陰性HFRS IgG陽性陰性尿蛋白1+3+n1061390292165NLR3.92±3.36?2.30±1.273.27±2.265.19±5.013.34±2.723.56±2.41NC8.97±7.136.01±3.058.46±6.499.23±8.016.83±5.210.00±7.68

注：與HFRS IgM 陰性比較，*P<0.05

圖2 NLR在HFRS各指標(biāo)分組中的變化

2.4NC和NLR對(duì)HFRS IgM 陽性患者的預(yù)測(cè)價(jià)值分析 應(yīng)用ROC曲線分析NLR、NC和LC在HFRS IgM陽性患者的預(yù)測(cè)價(jià)值。以1-特異度為橫坐標(biāo)，靈敏度為縱坐標(biāo)，NC的AUC為0.817，95%CI為0.761～0.873，P=0.000。LC的AUC為0.615，95%CI為0.537～0.693，P=0.002。NLR的AUC為0.728，95%CI為0.661～0.796，P=0.000，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，與NLR、LC相比，NC對(duì)HFRS IgM陽性患者的預(yù)測(cè)價(jià)值更高。見圖3。

圖3 NC、LC和NLR預(yù)測(cè)HFRS IgM陽性患者的ROC曲線

3 討 論

HFRS是一種急性自然疫源性疾病，廣泛分布于全球55個(gè)國(guó)家和地區(qū)。我國(guó)占全世界發(fā)病人數(shù)的50%以上，尤其以陜西地區(qū)發(fā)病率高，由于HFRS主要是以全身微血管病變的病理過程，其臨床表現(xiàn)錯(cuò)綜復(fù)雜，常見癥狀極易和感冒混淆。該病病情兇險(xiǎn)、病死率高，早期診斷及時(shí)治療是改善預(yù)后的重要方法[12]。研究表明，急性腎小管間質(zhì)炎癥是HFRS的常見病理改變，腎小管間毛細(xì)血管充血，間質(zhì)水腫變寬，也會(huì)出現(xiàn)腎小球病變，如系膜擴(kuò)張等。這些病理改變與炎性反應(yīng)密切相關(guān)。同時(shí)多種細(xì)胞因子也參與HFRS的發(fā)病，如腫瘤壞死因子2α(TNF2α)、白細(xì)胞介素-26(IL-26)、IL-28、IL-15等。NLR作為一種較新的炎癥指標(biāo)與腫瘤、腦出血、心血管疾病的預(yù)后密切相關(guān)。本研究結(jié)果顯示，HFRS患者NC、LC、NLR、WBC、BUN和CREA水平明顯高于健康對(duì)照人群。陳偉等[13]研究發(fā)現(xiàn)，NLR在感染性休克組與對(duì)照組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，與本研究結(jié)果一致，表明NLR作為一種潛在的急性炎癥指標(biāo)，可用于HFRS的預(yù)測(cè)及評(píng)估。同時(shí)NLR也具有諸多優(yōu)勢(shì)，其本身來自于血細(xì)胞分析結(jié)果易獲得，可動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)；不易受抗原抗體反應(yīng)的影響；NLR是代表炎癥因素的NC和對(duì)炎癥調(diào)控作用的LC的比值，其反映了兩個(gè)不同路徑但又相互補(bǔ)充的指標(biāo)的比值。

本研究發(fā)現(xiàn)NLR在HFRS 漢坦病毒IgM 陽性組較陰性組升高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。NLR在HFRS 漢坦病毒IgG 陽性組較陰性組降低，表明NLR與漢坦病毒急性感染的時(shí)間窗相關(guān)，在感染早期，中性粒細(xì)胞數(shù)量增加明顯，隨著治療進(jìn)一步緩解，漢坦病毒IgG抗體出現(xiàn)，淋巴細(xì)胞數(shù)量增加而致使NLR減低，其具體機(jī)制還有待進(jìn)一步研究。在尿蛋白1+和尿蛋白3+的HFRS患者中，NLR則沒有顯著差異，表明NLR與HFRS患者腎臟損傷程度沒有直接關(guān)系。魏雯[14]研究結(jié)果顯示，過敏性紫癜腎炎組中性粒細(xì)胞與淋巴細(xì)胞的比值高于無腎損害組。敖小鳳[15]研究結(jié)果顯示，在糖尿病腎病合并腎功能損傷的患者，NLR升高與腎功能損傷密切相關(guān)。與該研究差異的原因可能系不同疾病引起，同時(shí)HFRS患者基本都是IgM和IgG抗體雙陽性，相比之下陰性結(jié)果較少，影響數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析。NC在尿蛋白1+ HFRS患者中低于尿蛋白3+的HFRS患者，提示隨著腎臟損傷程度進(jìn)一步增強(qiáng)，NC和LC都進(jìn)一步增加，分析其原因系患者進(jìn)入低血容量期后血液濃縮而引起，因此NC和LC的動(dòng)態(tài)變化可作為判斷血液濃縮與血液稀釋的重要參考指標(biāo)。

本研究ROC曲線分析發(fā)現(xiàn)，NLR預(yù)測(cè)HFRS的臨界值為2.78，其AUC為0.711。這與高倩等[16]研究NLR預(yù)測(cè)克羅恩病臨界值基本一致，該研究顯示NLR預(yù)測(cè)克羅恩病活動(dòng)的臨界值為3.2，AUC為0.830。與陳偉等[13]研究也基本一致，其研究表明NLR預(yù)測(cè)感染性休克的診斷臨界值為4.68，AUC為0.977。進(jìn)一步證實(shí)炎癥在HFRS發(fā)病及進(jìn)展過程中發(fā)揮著重要的作用。HFRS患者感染漢坦病毒后，外周血中性粒細(xì)胞升高，升高的中性粒細(xì)胞分泌TNF-α、IL-26、IL-28等多種細(xì)胞因子相互作用，既能從感染細(xì)胞中清除病毒，又能通過增強(qiáng)白細(xì)胞黏附，增強(qiáng)血管內(nèi)皮細(xì)胞的通透性，破壞內(nèi)皮細(xì)胞屏障作用，促進(jìn)患者進(jìn)一步出血，同時(shí)，升高的TNF-α和其他促炎因子在HFRS患者休克過程中扮演重要角色[17-19]。本研究提示NC對(duì)HFRS 漢坦病毒IgM 陽性患者的預(yù)測(cè)價(jià)值較NLR更高，在漢坦病毒感染早期，NC較LC上升明顯，其原因可能為炎性反應(yīng)釋放的多種炎癥介質(zhì)抑制機(jī)體免疫功能，從而導(dǎo)致LC上升減緩。隨著疾病進(jìn)一步發(fā)展，LC明顯上升。結(jié)合本研究的結(jié)果，隨著腎臟損傷程度程度的增強(qiáng)，NC明顯增高。表明炎性反應(yīng)在HFRS患者感染早期具有雙重調(diào)節(jié)作用，一方面在病毒感染后分泌炎癥介質(zhì)殺傷病毒，另一方面又抑制了機(jī)體免疫反應(yīng)。研究表明，NLR水平升高提示腫瘤患者預(yù)后不良，當(dāng)腫瘤組織有大量中性粒細(xì)胞時(shí)，淋巴細(xì)胞減少，免疫應(yīng)答減弱，有利于腫瘤生長(zhǎng)轉(zhuǎn)移[20]。對(duì)HFRS患者而言，NLR水平升高是否提示患者病情嚴(yán)重，有待進(jìn)一步研究。

4 結(jié) 論

NC和NLR作為一種獨(dú)立預(yù)測(cè)HFRS患者的生物標(biāo)志物，盡管其無法完全反映HFRS患者的炎癥狀態(tài)和免疫平衡狀態(tài)，但其升高對(duì)預(yù)測(cè)HFRS IgM 陽性患者具有重要的臨床價(jià)值，能夠?yàn)镠FRS患者的預(yù)后管理提供理論依據(jù)。