冰凍血小板的臨床療效及其保存液二甲亞砜對人體的影響研究*

江 靈，王 潔，楊 倩，楊 莉，黃遠帥△

(1.西南醫科大學附屬醫院輸血科，四川瀘州 646000；2.西南醫科大學研究生院，四川瀘州 646000)

輸血治療在臨床疾病的診治中發揮著越來越重要的作用，其中，血小板輸注更是難以替代。現階段，我國的血小板處于嚴重供不應求的狀態，在臨床治療中若只靠臨時分離血小板，遠不能滿足需要，所以探尋長期有效的血小板保存方法就顯得極為重要。因此，本文對保存液二甲亞砜(DMSO)對人體的影響及冰凍血小板的臨床輸注療效進行研究，現將結果報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選擇2016年1月1日至2017年6月30日在西南醫科大學附屬醫院行血小板輸注治療的住院患者，納入符合條件且資料完整的患者共計319例，按輸注血小板制品的不同分為3組，即單采組(新鮮單采血小板)105例，濃縮組(手工濃縮血小板)102例，冰凍組(冰凍血小板)112例,男女比為1.00∶1.02，年齡3～79歲，平均(38.5±20.3)歲。患者一般資料見表1。納入標準：根據我國現行的行業規范和準則，符合血小板輸注指征并且臨床資料完整的患者。患者和家屬均知情同意，并都簽署了統一的知情同意書。排除標準：排除治療期間輸注過非單一品種血小板制品的患者，病情危重放棄治療者或資料不全者。

表1 研究對象一般資料(n)

1.2方法

1.2.1血小板的制備與種類 血小板均由瀘州市中心血站制備提供，1個治療量血小板的標準:(1)單采血小板,血小板計數大于或等于2.5×1011個/袋。(2)手工濃縮血小板6～12 U,血小板計數大于或等于2.0×1011個/袋。(3)冰凍血小板是由有效期內的單采血小板按行業標準加入DMSO制備而成，DMSO的最終濃度為4%～5%。

1.2.2冰凍血小板臨床療效評價

1.2.2.1比較3組研究對象24 h血小板糾正指數(CCI)及臨床療效 記錄研究對象身高，體質量，輸注前血小板計數，輸注后24 h計數，輸注血小板的總量，計算CCI，24 h CCI>4.5判斷為有效。CCI=(輸后血小板計數-輸前血小板計數)×體表面積/輸入血小板總數，體表面積=0.006 1×身高(cm)+0.012 8×體質量(kg)-0.015 29。

1.2.2.2比較輸血不良反應率 記錄3組研究對象輸注血小板后發生輸血不良反應的情況。

1.2.3評價DMSO對人體的影響 回顧性統計分析冰凍組的112位患者輸注冰凍血小板前后的生化指標值，即丙氨酸氨基轉移酶(ALT)、天門冬氨酸氨基轉移酶(AST)、總清蛋白(TP)、堿性磷酸酶(ALP)。將單采組和冰凍組做對比分析，分別計算輸注新鮮單采血小板和冰凍血小板后生化指標的變化值，對差值進行統計分析。評價輸注不同劑量冰凍血小板后生化指標的差異，將相同疾病的患者按輸入的冰凍血小板劑量的不同進行分組對比分析。隨機回訪冰凍組50例患者，根據復查生化指標的時間間隔小于等于6個月的納入半年組，共31例；大于6個月的納入1年組，共19例。對比分析兩組患者生化指標的變化值。

2 結 果

2.13組患者輸注血小板后24 h CCI及臨床療效的比較 冰凍組患者輸注血小板后24 h CCI低于單采組和濃縮組，3組間24 h CCI比較差異有統計學意義(Z=15.288,P<0.01)；血小板的輸注有效率3組間比較差異無統計學意義(χ2=5.574,P=0.062)，見表2。

表2 3組患者輸注后24 h CCI及臨床有效率的比較

2.23組患者輸注血小板后的輸血不良反應率比較 本研究中，3組患者輸注血小板后發生輸血不良反應分別為：單采組8例(7.4%)，濃縮組14例(13.7%)，冰凍組5例(4.5%)，3組間比較差異有統計學意義(χ2=6.054，P=0.048)。單采組與濃縮組間比較，差異無統計學意義(χ2=2.031，P=0.154)，單采組與冰凍組間比較差異無統計學意義(χ2=0.958，P=0.328)，濃縮組和冰凍組間比較差異有統計學意義(χ2=5.660，P<0.01)，冰凍血小板不良反應率低于手工濃縮血小板。

2.3輸注冰凍血小板前后生化指標的比較 冰凍組的112例患者輸注冰凍血小板前后的生化指標的比較見表3。輸注冰凍血小板前后的ALT、AST、TP、ALP比較差異均無統計學意義(P>0.05)。

2.4單采組和冰凍組生化指標變化值比較 兩組研究對象輸注血小板前后的生化指標的變化值比較差異無統計學意義(P>0.05),見表4。

2.5輸注不同劑量的冰凍血小板后生化指標變化值的比較 相同疾病的患者輸注不同劑量的冰凍血小板后生化指標的變化值比較差異無統計學意義(P>0.05)，見表5。

表3 輸注冰凍血小板前后生化指標的比較[M(P25,P75)]

2.6輸注冰凍血小板后不同時間生化指標的比較 回訪50例輸注冰凍血小板的患者，輸注相同劑量的冰凍血小板后不同時間段的生化指標變化比較差異無統計學意義(P>0.05)，見表6。

表4 單采組和冰凍組輸注血小板后生化指標變化值的比較[M(P25,P75)]

表5 相同疾病患者輸注不同劑量冰凍血小板后生化指標變化值的比較[M(P25,P75)]

a:1例樣本未計算均數和標準差；b:2例樣本數據的變化值相同

表6 輸注冰凍血小板后不同時間生化指標的比較[M(P25,P75)]

3 討 論

在急性大出血、血小板功能障礙性出血等方面，血小板輸注具有顯著而難以替代的作用，是輸血治療的重要手段。血小板輸注使用的主要有常溫短時間保存的單采血小板，手工濃縮血小板，以及長期冷低溫保存的冰凍血小板，冰凍血小板的保存時間、供給形式均優于其他兩種血小板，但關于冰凍血小板的療效及保存液的毒副作用的報道甚少，本研究對這兩方面進行了研究。

本研究結果表明，輸注冰凍血小板后24 h CCI低于其他兩組，這是因為血小板在冰凍保存和解凍復融的過程中受到損傷、激活，引發聚集[1]，而被激活的血小板輸入體內后，會立刻參與止血被消耗掉。而3種血小板的輸注有效率比較差異無統計學意義(χ2=5.574，P=0.062)。PéREZFERRER等[2]研究認為，冰凍血小板比新鮮單采血小板在止血功能上更有優勢，在搶救用血時，冰凍血小板是最佳的選擇，它能夠快速供給、即刻止血，可有效緩解危急情況。

患者輸注血小板后的輸血不良反應主要是非溶血性發熱反應和皮疹過敏，3組輸血不良反應率比較差異有統計學意義(P=0.048)。冰凍血小板的輸血不良反應率低于新鮮單采血小板和手工濃縮血小板，因為后兩者都是在20～24 ℃的條件下振蕩保存，易于細菌的生長繁殖[3-5]，而冰凍血小板深低溫保存，抑制了細菌的生長繁殖。同時，由于手工濃縮血小板在制備時混入的紅細胞和白細胞較多，HLA抗原復雜，大大提升了同種免疫的反應率。

本文對比分析了112例患者輸注冰凍血小板前后的AST、ALT、TP、ALP等生化指標，輸注前后比較差異無統計學意義(P>0.05)。患者輸注冰凍血小板、新鮮單采血小板后生化指標的變化值比較差異亦無統計學意義(P>0.05)。冰凍血小板是由新鮮單采血小板添加DMSO保存液制備而成，本研究結果提示DMSO保存液不會影響患者的肝功能。

文中輸注不同劑量的冰凍血小板，患者生化指標改變并無明顯差異。相同疾病的患者，輸注相同治療量的冰凍血小板后，間隔不同時間檢測其生化指標比較差異無統計學意義(P>0.05)。患者輸用一定劑量的低濃度的DMSO保存液是安全可靠的，不會對人體產生明顯的不良反應，這與文獻[6-7]報道一致。

目前國內外有關DMSO的研究證明，DMSO屬于低毒性物質，其安全劑量是0.92 g/kg體質量[8]。2007年初我國的國家食品與藥品監督管理局就確切指出了采用10%的DMSO凍存干細胞，4%～5%的DMSO凍存血小板用于臨床可不經洗滌直接輸注[9]，至今仍鮮有關于DMSO輸注導致不良反應的文獻報道[10-13]。而冰凍血小板復融后洗滌去除DMSO的過程，不僅耗費人力、財力和物力，還增加了血小板受細菌污染、機械損傷和功能損失的風險。而冰凍血小板復融后未經洗滌直接輸注，因其保留有穩定的溶酶體膜和血漿中全部凝血因子，與洗滌后的血小板相比較，不但增強了血小板止血效果，還提高了機體的免疫力和抗感染的能力。

因冰凍血小板可以大批量的長時間儲存，且使用方便快捷，在緊急情況能有效保障供給，搶救危重患者，因而在軍事方面也有著極其重要的效用[14-15]。低溫冰凍保存的血小板，還可長期儲存特殊血型及HLA配型需要的單一供者的血小板，滿足臨床特殊患者的血小板輸注需求。冰凍血小板的長期保存，可以最大限度地分離保存獻血者的血小板，緩解目前血小板供不應求的現狀，因而冰凍血小板具有一定的臨床推廣價值。