DWI在大鼠布加綜合征肝損傷模型中的應(yīng)用

朱 楠（通訊作者），張?zhí)鹛穑傻吕?/p>

（1安徽省五河縣人民醫(yī)院 安徽 蚌埠 233300）

（2中國科學(xué)技術(shù)大學(xué)附屬第一醫(yī)院 安徽 合肥 230001）

布加綜合征（BCS）是肝靜脈（HV）和（或）其開口以上的下腔靜脈（IVC）阻塞導(dǎo)致的門靜脈和（或）IVC高壓臨床癥候群，急性期可因肝功能衰竭死亡，慢性期可因肝硬化導(dǎo)致消化道出血、頑固性腹水等危及生命[1]。因此，BCS的肝損傷評估尤為重要，磁共振彌散加權(quán)成像（DWI）質(zhì)量穩(wěn)定、可重復(fù)性高，已在其他原因的肝損傷評估中體現(xiàn)重要價值[2]。本項目擬通過DWI技術(shù)檢測不同病程階段BCS動物模型的表現(xiàn)，探索其應(yīng)用價值。

1 材料與方法

1.1 一般資料

180只體質(zhì)量195～255g的健康雄性SD大鼠自安徽省立醫(yī)院動物實驗中心購買，在12小時光/暗交替周期，溫度15℃～25℃，濕度50%～60%條件下清潔飼養(yǎng)，本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)。

1.2 方法

1.2.1 模型制備及分組 按數(shù)字表法分為對照組（20只），實驗組及假手術(shù)組又各分4個亞組（1、4、8、12周組），每亞組20只。對照組僅常規(guī)飼養(yǎng)；實驗組正中開腹，暴露肝后段IVC，平行緊貼IVC以3F微導(dǎo)管，以0號線環(huán)繞結(jié)扎后抽出，逐層縫合關(guān)腹；假手術(shù)組未結(jié)扎肝后段IVC，其他過程同實驗組。分別于實驗開始后1、4、8、12周行MRI觀察各組大鼠肝臟影像學(xué)表現(xiàn)。

附表2 各組大鼠中央?yún)^(qū)不同b值（s/mm2）下ADC值（×10-3mm2/s）比較

1.2.2 MR掃描 晨起停飼，以3.6%水合氯醛腹腔麻醉，劑量1.0ml/100g體質(zhì)量。采用GEHDXT-1.5T MRI，腕關(guān)節(jié)線圈。大鼠仰臥，腹部加壓固定于線圈中心。行常規(guī)T1WI、T2WI-SPIR序列及DWI檢查。b值：600，800s/mm2，TR 1200ms，TE 67ms，F(xiàn)OV 55mm×55mm，層厚 3.0mm，層距0.2mm，反轉(zhuǎn)角90°，激勵次數(shù)8，矩陣192×192。

1.2.3 圖像后處理 測量不同b值擴散圖像的信號強度、ADC值，取相同位置的ROI測量，ROI大小約15～20mm2，避開膽管及血管，取3個ROI測得數(shù)值的平均值。

1.2.4 標(biāo)本采集及病理染色 MRI掃描后處死各組大鼠，取MRI測量ROI相應(yīng)層面的新鮮肝組織適量，用10%福爾馬林固定24h，石蠟包埋，制作組織切片，用以HE染色，觀察肝臟病理改變。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 成模情況

各組存活均＞15只，實驗組大鼠術(shù)后活動減少、反應(yīng)遲鈍，毛色灰暗；對照組及假手術(shù)組活動如常、反應(yīng)機警。

2.2 病理結(jié)果

實驗組肝臟病理損傷逐漸加重，以第12周組最顯著，見竇狀擴張，小葉中心性肝細(xì)胞萎縮，出血和匯管區(qū)纖維化陽性染色，見表1。假手術(shù)組及對照組肝臟病理均無陽性表現(xiàn)。

表1 實驗組肝纖維化情況（只）

2.3 MRI表現(xiàn)

對照組及假手術(shù)組大鼠肝臟表面光滑，肝葉比例協(xié)調(diào)，實質(zhì)信號均勻。實驗組早期肝臟稍大，T1WI及T2WI-SPIR信號無特征性；隨著病程進(jìn)展，大鼠肝臟逐漸縮小，第4周后可見側(cè)支循環(huán)逐漸形成，肝臟DWI信號先上升后下降；ADC先下降后上升，第4周最低。隨著b值增大，SNR減低，b值為800s/mm2時圖像較理想，見附表2。

3 討論

BCS肝臟的病理過程包括早期肝淤血腫大和晚期肝硬化，早期因HV回流受阻，肝臟淤血缺氧，引發(fā)肝細(xì)胞水腫，水分子彌散受限，進(jìn)而引起DWI信號改變，是應(yīng)用MRI彌散加權(quán)成像檢測的理論基礎(chǔ)[1-2]。

本研究中，實驗組1～12周肝臟ADC值降低隨后稍升高，但始終低于對照組，分析原因，可能是IVC結(jié)扎早期HV回流障礙，導(dǎo)致肝臟淤血缺氧，誘發(fā)氧化應(yīng)激損傷，使線粒體代謝障礙，引發(fā)肝細(xì)胞腫脹，限制了細(xì)胞內(nèi)外水分子的運動；且肝竇周圍的紅細(xì)胞淤積可導(dǎo)致微循環(huán)障礙，加重細(xì)胞水腫，這些均是早期ADC升高的因素[2]。

本研究發(fā)現(xiàn)，實驗組4周后ADC值稍有升高，這與側(cè)支循環(huán)形成的時間一致，提示逐漸形成的側(cè)支循環(huán)可能部分緩解了肝內(nèi)淤血，減輕氧化應(yīng)激損傷及細(xì)胞水腫，從而上調(diào)ADC值，這與其他病因?qū)е碌母斡不忻黠@不同。病理結(jié)果亦發(fā)現(xiàn)，實驗組第12周亦為發(fā)生明顯的肝硬化，提示BCS的肝纖維化進(jìn)程緩慢，其進(jìn)展并非逐漸加重，而是隨著側(cè)支循環(huán)緩解淤血呈緩慢漸進(jìn)，甚至由于充足的側(cè)支代償而逆轉(zhuǎn)[3]，這與本文中ADC值先降后升的表現(xiàn)相符。

綜上，DWI是一種可以用來評估BCS肝損傷的有效、無創(chuàng)檢查手段，值得推廣。