張子祎,李月嬋,楊薇
(天津農學院 基礎科學學院,天津 300384)
據《本草綱目》記載,紅曲作為1種我國傳統的中藥,具有健中消食、活血化瘀的療效[1]。紅曲霉作為其主要的生產菌種,被廣泛應用于食品、醫藥、化工等領域。紅曲霉胞外多糖是紅曲霉的次級代謝產物,是從紅曲霉的菌絲體、發酵液和子實體中分離出來的一種水溶性膠質多糖[2],具有抗氧化[3]、抗腫瘤[4]、抑菌性[5]與提高免疫力[6]等多種功能。長期以來,我國對紅曲霉菌的研究大多集中在色素[7]、膽固醇抑制劑及洛伐他汀等方面[8],少數學者也已開始研究紅曲霉胞外多糖的相關生產工藝[9]及其抗氧化性特性[10],但缺少對于高產胞外多糖的紅曲霉菌株培養基質篩選方面的研究。因此,本試驗以紅曲霉作為生產菌株,以大米粉為培養基的主要基質進行液態發酵,以發酵液中胞外多糖的含量作為指標,對培養基的成分進行優化,從而篩選出高產胞外多糖的培養基組成。
紅曲霉由江南大學提供。
斜面培養基:麥芽汁固態培養基。
種子培養基:麥芽汁液態培養基。
發酵原料:市售東北優質大米、市售大豆粉。
葡萄糖、濃硫酸、苯酚均為分析純。
取250 mL三角瓶,倒入100 mL種子培養基,115 ℃滅菌20 min。取1 mL孢子懸浮(孢子濃度為2.25×106個/mL)于滅菌的種子培養基中,置于搖床中培養,培養條件為32 ℃,160 r/min,培養時間為72 h。
取250 mL三角瓶,大米磨成細粉,裝料量5 g,蒸餾水100 mL,121 ℃滅菌30 min。接種1 mL種子培養液,置于搖床中培養,培養條件為32 ℃,160 r/min。……