黃芪注射液穴位注射結合中藥穴位敷貼治療支氣管哮喘臨床研究

石春輝，張崇元

（重慶市中醫院重癥醫學科，重慶 400021）

本研究用黃芪注射液穴位注射結合中藥穴位敷貼治療支氣管哮喘效果較好，報道如下。

1 臨床資料

共88例，均為2016年5月至2019年3月我院收治患者，用隨機數字表法分為治療組和對照組各44例。治療組男24例、女20例，平均年齡（42.4±7.6）歲，平均病程（9.2±1.3）年。對照組男25例、女19例，平均年齡（43.9±7.9）歲，平均病程（8.8±1.2）年。兩組一般資料比較差異無統計學意義（P＞0.05），具有可比性。

納入標準：①符合《支氣管哮喘防治指南（2016年版）》［1］診斷標準。第1項反復發作哮喘，氣急，胸悶或咳嗽；第2項發作時在雙側可聞及散在或彌漫性，以呼氣相為主的哮鳴音，呼氣相延長；第3項癥狀可經治療緩解或自行緩解；第4項除外其他疾病所引起的哮喘，氣急，胸悶和咳嗽；第5項臨床表現不典型者至少應有下列3條中的1條：a.支氣管激發試驗陽性或運動試驗陽性或支氣管舒張試驗陽性；b.晝夜PEF變異率大于20%。符合1～4項或4，5項可以診斷為支氣管哮喘。②年齡大于18歲。③無嚴重器官功能不全。④對所用中藥不過敏。⑤簽署同意書。

排除標準：①嚴重心肝腎功能不全；②合并原發肺部疾病者；③過敏體質者；④不配合治療。

2 治療方法

對照組：用西醫常規治療。根據《支氣管哮喘防治指南（2016年版）》［1］，以控制感染、平喘解痙為治療原則。沙美特羅替卡松粉吸入劑（國藥準字H20150324），每次1吸，每日2次。治療2周。

治療組：①穴位敷貼。用白芥子、延胡索、甘遂、紫蘇子、麻黃、生姜。把藥物研成細末，棗泥制成軟膏，將粉末散于膏藥上。取腎俞、神闕、定喘、脾俞、風門、肺俞、膏肓、大椎，貼敷，每日1次，12h更換1次。治療2周。②穴位注射。用黃芪注射液（國藥準字Z13020999，神威藥業集團有限公司），取背部兩側華佗夾脊穴（T2-T4），雙側足三里，局部皮膚常規消毒后，用5mL一次性注射器抽黃芪注射液，刺入穴位，并上下提插，待有酸、麻、重、脹感，回抽無血后，緩慢推注藥液，每穴2 mL。每日1次，每周治療4次，隔天1次。治療2周。

3 觀察指標

采用雙抗體夾心酶聯免疫吸附測定法（ELISA）測定p38絲裂原活化蛋白激酶（p38MAPK）、白細胞介素-4（IL-4）、γ干擾素（IFN-γ）及腫瘤壞死因子-α（TNF-α）（試劑盒購自Invitrogen公司，貨號BMS2090）。流式細胞儀檢測（美國BD FACSCalibur）T淋巴細胞CD4+、CD8+，CD4+/CD8+含量。

4 療效標準

參照《支氣管哮喘防治指南（2016年版）》［1］。臨床控制：癥狀完全緩解，即使有哮喘發作但癥狀輕微，無需藥物治療，FEV1升高大于35%。顯效：癥狀明顯緩解，FEV1升高25%～35%，需支氣管擴張藥治療。有效：癥狀有所好轉，FEV1升高15%～24%，需支氣管擴張藥治療。無效：癥狀以及肺功能未明顯好轉或疾病進展。

5 治療結果

兩組臨床療效比較見表1。

表1 兩組臨床療效比較 例（%）

兩組治療前后免疫指標比較見表2。

表2 兩組治療前后免疫指標比較 （%，±s）

表2 兩組治療前后免疫指標比較 （%，±s）

注：與對照組治療后比較，△P＜0.05。

免疫指標 治療組（44例） 對照組（44例）治療前 治療后 治療前 治療后CD4+ 36.82±2.66 62.20±2.24△ 37.72±2.46 42.98±3.39 CD8+ 33.48±1.42 12.92±1.22△ 33.12±1.01 17.12±1.41 CD4+/CD8+1.92±0.26 1.01±0.05△ 1.94±0.28 1.51±0.19

兩組治療前后炎癥細胞因子指標比較見表3。

表3 兩組治療前后炎癥細胞因子指標比較 （pg/mL，±s）

表3 兩組治療前后炎癥細胞因子指標比較 （pg/mL，±s）

注：與對照組治療后比較，△P＜0.05。

炎癥細胞因子治療組（44例） 對照組（44例）治療前 治療后 治療前 治療后IL-4 14.42±1.78 8.04±0.74△ 15.08±1.96 11.64±0.72 IFN-γ 126.14±12.4 60.78±10.24△ 130.24±13.09 98.24±13.09 TNF-α 124±13.4 54.3±11.2△ 126±13.8 86.7±12.6

兩組治療前后p38 MAPK表達水平比較見表4。

表4 兩組治療前后p38 MAPK表達水平比較 （pg/mL，±s）

表4 兩組治療前后p38 MAPK表達水平比較 （pg/mL，±s）

p38 MAPK 例 治療組 對照組 P治療前 44 12.09±0.92 12.14±0.86 ＞0.05治療后 44 7.24±0.63 10.78±0.98 ＜0.05

治療期間出現皮疹治療組2例，對照組1例。

6 討 論

支氣管哮喘是一種慢性氣道炎癥疾病，涉及多種炎癥細胞和炎癥介質。p38MAPK是MAPK亞族中的重要成員之一，與細胞凋亡、免疫調節和炎性反應的調控密切相關，能啟動炎性細胞釋放大量細胞因子，影響細胞的轉錄、蛋白合成和細胞表面受體表達，是觸發炎性反應的關鍵［2］。Ma［3］發現氣道炎癥的形成與p38MAPK信號通路的激活有關。張吳越等［4］發現支氣管哮喘小鼠的p-p38MAPK表達高于正常小鼠組。p38MAPK 的激活，不僅能促進單核巨噬細胞產生白細胞介素，如IL-1、IL-4、IL-6、IL-8等炎性因子，同時介導中性粒細胞的活化，產生炎癥反應。此外，支氣管哮喘發生與 Th1/Th2 平衡失調有著密切相關。Th1和Th2 細胞在正常情況下保持動態平衡，使機體發揮正常免疫功能。Th1細胞主要分泌IL-2、IL-12、IFN-γ和TNF-β；它介導的免疫反應一般與局部炎癥有關，主要涉及細胞免疫，也與遲發型超敏反應炎癥的形成有關。Th2 細胞主要參與體液免疫，分泌IL-4、IL-5、IL-6和IL-10等因子，刺激B細胞的增殖并產生抗體。Th2 細胞分泌的主要細胞因子IL-4，能刺激B 細胞增殖并產生IgE，同時誘導IgE親和受體表達，從而促進IgE 的產生和效應增加和放大，導致嗜酸性粒細胞在氣道內的聚集和浸潤，引起氣道血管通透性增加、腺體黏液分泌增多、黏膜水腫及平滑肌痙攣的一系列表現，是引發哮喘的重要原因。Th1細胞分泌的主要細胞因子IFN-γ，能夠直接抑制IgE合成并且能抑制Th2細胞生成，降低炎癥反應。哮喘炎癥惡化時，淋巴細胞分化向Th2偏移，IL-4水平增高，INF-γ水平降低；當哮喘炎癥減輕時，淋巴細胞分化偏向于Th1，IL-4 水平降低，INF-γ水平升高。因此，INF-γ和IL-4水平的改變能夠反映Th1和Th2平衡變化。

目前，研究表明p38 MAPK調控T淋巴細胞的發育、分化、成熟和活化，同時參與嗜酸性粒細胞、肥大細胞定位遷移及炎癥介質釋放的整個過程［5］。p38MAPK 通路的激活可促進GATA-3的磷酸化，使Th2細胞產生的IL-4、IL-13等細胞因子增多，并且通過GATA-3對轉錄因子STAT4的下調作用，使Th1細胞的分化得到抑制，從而減少IFN-γ的產生。因此，P38MAPK 通路的激活在炎癥細胞活化方面起到了決定性的作用，應用P38MAPK抑制劑可降低炎癥反應。

黃芪多糖屬于黃芪免疫活性最強成分，能誘導干擾素調節機體免疫，提高殺傷細胞活性，并且調節DNA復制以及蛋白質翻譯等環節，改善細胞代謝狀況，提高機體免疫［6］。黃芪多糖能夠作用于各類免疫活性細胞，提升細胞因子分泌水平，增強體液免疫、非特異性免疫與各細胞免疫能力，改善淋巴細胞免疫能力，調節應激時細胞免疫不良狀態。黃芪多糖可緩解炎癥反應，減弱氣道高反應性，增強免疫能力，控制哮喘發作［7］。黃芪注射液對磷酸化p38 MAPK有抑制作用，能減輕哮喘氣道炎癥作用［8］。同時，對Th1/Th2失衡具有免疫調節作用，促進Th1細胞分泌的細胞因子IFN-γ抑制Th2細胞生成，降低炎癥反應。此外，穴位敷貼能增加血清中IFN-γ的水平，降低IL-4水平，這些炎癥因子的變化能有效刺激 Th1 細胞的活化分泌，阻斷或抑制 Th2 細胞的活化，進而調整Th1/Th2的失衡狀態，來抑制氣道的炎癥反應，達到治療哮喘的作用［9］。

黃芪注射液穴位注射聯合中藥穴位敷貼能夠抑制p38MAPK信號通路激活，降低IL-4表達，增加IFN-γ表達，調節Th1 /Th2免疫平衡，起到抗炎作用。