冠心病患者外周血中CD36表達水平及與Toll樣受體4信號的相關性分析

張 震

（右江民族醫學院附屬醫院，廣西百色533000）

冠心病（coronary heart disease，CHD）是我國最常見的心血管疾病之一，隨著我國老齡化人口的不斷擴大，CHD的發病率及死亡率均呈現逐年上升趨勢，且發病率逐漸由老年群體轉向中青年人群發展，該病已經成為危害人類健康的“第一殺手”[1]。國外研究發現，CD36與單核細胞泡沫化有關，且近年來有學者認為免疫應答在CHD的發生發展中起重要作用，Toll樣受體屬介導天然免疫的跨膜信號傳遞受體家族，是聯系天然免疫與獲得性免疫的橋梁[2]。臨床對 CD36、Toll樣受體 4（TLR4）與 CHD 相關性研究較多，但對其在冠心病中，CD36與TLR4之間的相關性研究較少，本研究現探討冠心病患者外周血中CD36表達水平及與TLR4的相關性，報道如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料

本研究經過我院倫理委員會批準，研究對象為150例CHD患者及150例健康體檢者，均為我院2014年2月-2017年2月期間所收治，患者均已簽署知情同意書，冠心病患者中男74例，女76例，年齡 50-70歲，平均（59.21±5.14）歲，其中急性心肌梗死（AMI）74例，穩定性心絞痛（ASP）44例，不穩定型心絞痛（UAP）32例。健康體檢者中男77例，女73例，年齡 51-70歲，平均（59.25±5.17）歲，CHD 患者與健康體檢者在性別、年齡等基礎信息上無差異（P＞0.05）。

1.2 方 法

1.2.1 試劑與儀器 CD36檢測試劑盒由武漢CUSABIO公司提供（批號：V08134635）；酶標儀選擇美國賽默飛世爾科技公司的Thermo multiskan MK3。

1.2.2 CD36與TLR4檢測 CD36：采集研究對象4mL晨起空腹靜脈血，其中AMI于入院當時采集靜脈血4mL。置真空采血管中，分離血清后，-20℃保存。采用ELISA法檢測CD36，均嚴格按照試劑盒說明書操作。

TLR4：采集研究對象4mL晨起空腹靜脈血，以密度梯度離心法獲取外周血白細胞，以外周血白細胞總RNA為模板，引物為上海生工生物工程技術服務有限公司設計，合成的cDNA稀釋后，以熒光定量PCR法進行TLR4檢測。

1.3 觀察指標

探究不同患者CD36、TLR4表達水平，探究CD36、TLR4之間相關性。

1.4 統計學處理

本研究中計量資料表示方法為（均數±標準差），用t檢驗，計數資料用%表示，使用χ2檢驗，采用SPSS19.0統計軟件，對所有實驗結果進行數據分析，以P值是否＜0.05為判斷標準。

2 結果

2.1 比較研究對象CD36、TLR4表達

冠心病患者相比健康體檢者在CD36、TLR4上顯著較高（P＜0.05），且呈 ASP＜UAP＜AMI趨勢，AMI在CD36、TLR4上顯著比其他類型的CHD患者高（P＜0.05），參考表 1。

表1 比較研究對象CD36、TLR4表達（±s）

表1 比較研究對象CD36、TLR4表達（±s）

注：*表示與健康體檢者相比存在顯著差異P＜0.05，#表示與ASP相比存在顯著差異P＜0.05，&表示與UAP相比存在顯著差異 P＜0.05。

組別健康體檢者（n=150）ASP（n=44）UAP（n=32）AMI（n=74）F值P值CD36（pg/ml）3.78±0.35#&17.45±1.67*&23.62±2.51*#27.38±2.35*#&4336.75 0.000 TLR4（拷貝/μgRNA）1.27±0.12#&3.74±0.21*&4.29±0.25*#4.97±0.35*#&5343.76 0.000

2.2 相關性

CD36與 TLR4互為正相關（P＜0.05），TLR4升高，CD36也會升高，反之，CD36降低，TLR4也會降低，參考表2。

表2 CD36與TLR4相關性

3 討 論

冠心病的發病原因至今未明，但唯一確定的是冠狀動脈硬化是該病發生的先決條件，若未得到及時的治療，將增加心臟負擔，危急患者生命安全。炎癥與動脈粥樣硬化的關系正受到人們的廣泛關注[3]。

動脈粥樣硬化斑塊中表達多種脂蛋白受體，CD36就是其中之一，該物質又被稱為糖蛋白Ⅳ，能識別、吞噬氧化低密度脂蛋白，是B類清道夫受體家族的一員，使巨噬細胞形成泡沫細胞[4]。CD36廣泛存在于巨噬細胞膜上，對脂質的轉運內吞和信號傳導非常重要，通過病原體結合使巨噬細胞吞噬細菌內毒素、凋亡細胞片段[5]。本次研究顯示，CD36在正常動脈壁上的巨噬細胞內表達很低，但隨著冠心病病情發展，呈顯著上升趨勢，這表明CD36不僅參與冠心病的發生發展，且可能在動脈粥樣硬化斑塊的不穩定及斑塊破裂過程中發揮重要作用。近年來研究證實，肺炎衣原體感染與冠心病的發生明顯相關，而TLRs家族在誘導病源微生物感染過程中具有重要作用，在誘導相關炎癥性損害中具有非常重要的作用。本次研究結果顯示，隨著冠心病病情發展，TLR4呈顯著上升趨勢。表明TLR4可能提供了一種潛在的連接脂質、感染和動脈粥樣硬化的途徑。本次研究結果中，冠心病患者相比健康體檢者在CD36、TLR4 上顯著較高（P＜0.05），且呈 ASP＜UAP＜AMI趨勢，AMI在CD36、TLR4上顯著比其他類型的冠心病患者高（P＜0.05），CD36與 TLR4互為正相關，因此，CD36與TLR4均可以作為冠脈粥樣斑塊不穩定的指標，也可作為判斷冠心病嚴重度的敏感指標。

綜上所述，外周血中CD36表達水平及與TLR4在冠心病中呈互為正相關，可作為預測冠心病炎癥的2個指標。