弗氏檸檬酸桿菌臨床株對碳青霉烯類耐藥的分子機制研究

董丹丹，劉真真，李篤軍，張 會，趙 輝,賈 楠，朱元祺*

(1.青島大學醫學院，山東 青島266071;2.青島大學附屬醫院 檢驗科;3.山東煙臺業達醫院 檢驗科)

碳青霉烯類抗生素是一類抗菌譜廣、抗菌活性強的β-內酰胺類抗生素，對 Amp C酶和超廣譜β-內酰胺酶高度穩定,是臨床抗感染的最后一道防線。但近幾年，碳青霉烯類耐藥的革蘭氏陰性菌在全球范圍內逐年增多，給臨床治療帶來了挑戰[1，2]。弗氏檸檬酸桿菌是檸檬酸桿菌屬最常見的分離株，也是醫院感染中常見的革蘭氏陰性桿菌。因此，我們對2012年4月-2018年5月分離的12株耐碳青霉烯類弗氏檸檬酸桿菌的耐藥表型、耐藥基因和同源性進行研究，為醫院感染的預防和采取控制措施提供理論依據，現報道如下。

1 材料和方法

1.1實驗菌株資料12株耐碳青霉烯類的弗氏檸檬酸桿菌(CFR1-CFR12)于2012年4月-2018年5月分離自住院患者。病人年齡11-80歲，平均54歲。菌株鑒定和藥敏試驗為梅里埃Vitek-2 Compact系統。藥敏使用GN13卡，并依據CLSI-M100(2018)標準判定結果。blaKPC和blaNDM陽性對照菌株為本室保留。藥敏質控菌株為ATCC35218、ATCC700603、ATCC25922和ATCC27853。

1.2儀器設備和試劑脈沖場凝膠電泳儀和PCR擴增儀為美國BIO-RAD公司；凝膠成像系統為美國Alpha Innotech公司；核酸分子量標準和PCR試劑等為寶生物(大連)工程有限公司。

1.3耐藥基因檢測PCR檢測菌株產碳青霉烯酶、超廣譜β-內酰胺酶和質粒介導的AmpC酶耐藥相關基因。PCR擴增耐藥基因的引物序列及方法參照文獻[3]。生工(上海)生物技術有限公司完成引物合成和擴增產物測序。

1.4脈沖場凝膠電泳脈沖場凝膠電泳的方法、結果解釋參照文獻[3,4]。……