紫景天黃酮對大鼠實驗性牙周炎中iNOS的影響

姜 靜，王曉峰，邱麗娜，王 偉，張殿文，宋蓮蓮*,桑 雪*

(1.吉林省中日聯誼醫院 口腔科，吉林 長春130033；2.吉林省中醫藥科學院，吉林 長春130021)

牙周炎患者眾多，機制尚不明確，治療方法有限。誘導性一氧化氮合酶(iNOS)在牙周炎患者的牙齦組織中的表達明顯高于正常人，其表達強度與慢性牙周炎癥程度密切相關[1]。本研究采用免疫組化方法檢測紫景天黃酮對大鼠實驗性牙周炎牙周組織中iNOS表達的影響。

1 材料和方法

1.1 材料

1.1.1實驗動物 健康Wistar大鼠28只，購買于長春市億斯實驗動物技術有限責任公司，體重180-220 g，年齡6-8周，許可證號：SCXK(吉)-2016-0003。

1.1.2實驗藥劑 iNOS一抗(北京博奧森生物科技有限公司)，DAB染色試劑盒(武漢博士德生物科技有限公司)，多聚HRP二抗試劑盒(武漢博士德生物科技有限公司)，濃度1.0%紫景天黃酮(基質為16%泊洛沙姆)由吉林省中醫藥科學院制劑室提供,脂多糖(LPS，吉林省中日聯誼醫院科學研究中心配制)。

1.1.3實驗器械 Leica RM2255型石蠟切片機(德國 Leica 公司)，Leica EG1140石蠟包埋機(德國Leica公司)，OlympusBX51光學顯微鏡(日本 Olympus 公司)，NIS-ELEMNT BR型圖像分析系統(日本NIKON公司)。

1.2 方法

1.2.1實驗性牙周炎模型的制備 28只健康Wistar大鼠，雌雄各半，隨機選取8只為正常組。余下20只為建模組大鼠，根據參考文獻[2,3]方法用帶牙齦卟啉單胞菌絲線結扎法建立大鼠實驗性牙周炎模型，并在牙周局部涂抹含1 mg/ml LPS的生理鹽水，15 μl/次,每 48 h涂抹 1 次,共 4 次。四周后檢查牙周情況，牙周指數為中重度牙周炎的改變，隨機處死2只，作病理觀察，鏡下牙周組織內見大量炎細胞浸潤，微小膿腫形成；牙齦深層組織內形成水腫與纖維組織增生，牙槽骨吸收，證明模型建立成功。……