Dickkopf-3在結腸癌間質微血管和腫瘤細胞中的表達及其臨床意義

楊子榮，劉 城，丁麗敏，張 孟，于慶功

(大連大學附屬中山醫院 消化內科，遼寧 大連116001)

Dickkopf-3(DKK-3)是具有較高Wnt抑制活性的分泌性糖蛋白Dickkopf (DKK)家族中的一員，在胚胎發生過程中對細胞命運、增殖和極性等的控制有重要的作用[1]。近來研究表明DKK-3的表達可能參與一些腫瘤的發生和發展，本文通過檢測DKK-3在人結腸癌組織芯片中的表達，分析結腸癌間質微血管內皮細胞和腫瘤細胞中DKK-3表達與其臨床病理因素的關系，探討其在結腸癌發生及侵襲轉移中的作用。

1 材料和方法

1.1 試驗材料

購自桂林泛普生物技術有限公司的人結腸癌組織芯片(產品編號：COC1501+COC1502)包括133例結腸腺癌組織和10例非癌結腸黏膜組織，雙芯布陣，經過公司病理專業人員檢查證實。在133例結腸腺癌組織中，女58例，男75例，年齡19-92歲，平均年齡(58.05±14.28) 歲。組織標本經10%中性甲醛緩沖液固定24 h，固定于美國Superfrost Plus防脫載玻片上，4℃保存。

1.2 免疫組化染色

羊抗人DKK-3多克隆抗體(AF1118)購自美國R&D公司，工作濃度為1∶50。SP免疫組化染色按SP試劑盒實驗步驟操作。

1.3 結果判斷

微血管內皮細胞染色陽性判斷標準：陽性信號位于細胞間質微血管，不論染色強度，微血管染色達90%以上為陽性，微血管染色不足10%為陰性，其余均為中間染色[2]。

腫瘤細胞染色陽性判斷標準：陽性信號位于細胞質，根據陽性細胞百分數和染色強度對每張切片進行分級：細胞數計分0分(無)，1分(<10%)，2分(<10%-50%)，3分(<51%-80%)，4分(>80%)；染色強度0分(不著色)，1分(弱)，2分(中)，3分(強)；組織化學染色積分(細胞數計分和染色強度計分的乘積)：>4分為陽性[3]。

1.4 統計學處理……

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