產前診斷中胎兒性染色體嵌合體的發生率及其妊娠結局

王麗萍

（濟南市第二婦幼保健院，山東 濟南 250001）

產前診斷當中染色體嵌合體現象比較常見，在臨床上可以分成常染色體嵌合和性染色體嵌合這兩種。性染色體嵌合的情況可能會導致胎兒性器官出現發育不全的問題，并且也會導致其他臟器的功能出現問題，甚至可能會導致胎兒出現智商低下等方面問題。在產前診斷當中，比較常見的方法為羊水當中胎兒脫落細胞培養及染色體核型分析檢查胎兒染色體，但是檢測的準確度還沒有明顯的定論，因此本文進行分析1995例胎兒羊水產前診斷病例中嵌合體的情況，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 研究對象

選擇2010～2018年出現產前診斷指征，并且在我院產前診斷中心行羊水穿刺術，做胎兒羊水細胞培養及染色體核型分析的孕婦共1995例，孕婦的年齡在22～40歲的范圍內，平均年齡為（30.1 2.28歲，孕周在17～25周的范圍內，平均孕周為（22.5 0.56）周。

1.2 檢測方法

（1）患者在了解本次實驗的情況下，進行簽訂知情同意書，然后在超聲引導下，實施羊膜腔穿刺，從孕婦羊水當中抽出20 ml進行（開始抽取的的1～2 ml羊水需要除去），接著將樣本分別注入兩支10 ml一次性無菌離心管中，以1500 rpm離心10 min，除去上清，每管約留0.5 ml，吸管打散細胞制成細胞懸液，充分混勻，分別接種在2個裝有5 ml的完全培養基的培養瓶中，最后將其放置含5.0%CO2的37℃溫箱行開放式培養，培養5～7天。在這段時間內，需要細心觀察細胞生長情況，并且根據生長情況進行換液、傳代等操作。在發現羊水細胞貼壁生長，并且生長力比較旺盛，倒置顯微鏡下可以查看到多個細胞克隆的時候，可以獲得實驗所需的細胞。每例羊水樣品在完成接種、培養、收獲、制片等操作的時候，都需要分別由兩名技術人員獨立完成，依據相關的標準，油鏡下進行分析計數30個細胞，分析5個以上核型，發現嵌合體的時候增加計數和分析100個核型。

（2）患者在了解本次實驗的情況下，進行簽訂知情同意書，然后在超聲引導下，實施腹部抽取臍血1～2 ml，在獲得血樣之后需要采用血紅蛋白電泳方法進行判斷有無污染母親血，接著將血樣注入無菌肝素鈉抗凝管，分別接種在2瓶外周血淋巴細胞完全培養液，最后將其放置在37℃的培養箱中，培養68～72小時，制片過程和羊水保持一致。

1.3 嵌合體診斷標準

發現2種或2種以上的核型，參考臨床培養瓶法嵌合現象鑒別方案實施下一步操作：在2個或超過2個原位培養物當中都會出現2種及以上的異常染色體核型，而且不同的核型也會存在2個及以上的細胞集落，并且異常核型是一致的，可以確定為“真性嵌合體”。

2 結 果

2.1 羊水細胞染色體核型及臍血或胎兒組織的染色體核型

在1995例產前診斷的患者當中，經過進行檢測對應的羊水標本，發現了8例嵌合體，其比例為0.40%，其中有4例為性染色體異常的嵌合體，4例數目異常染色體嵌合體。7例知情同意經過臍血驗證發現有5例是真性嵌合體，與羊水中核型是相同的，其中有3例性染色體異常的嵌合體，2例數目異常的嵌合體，相符率為71.4%。

2.2 妊娠結局

在8例羊水細胞疑似嵌合體的孕婦當中，有7例知情同意抽取臍靜脈血進行臍血驗證胎兒染色體。經過驗證發現，有5例和羊水中核型是相同的，所以選擇終止妊娠。另外驗證屬于染色體核型正常的2例孕婦選擇繼續妊娠，在胎兒出生之后，進行6～12月的隨訪，沒有發現異常。未行臍血染色體檢查的1個病例，出生隨訪也未見異常。

3 討 論

本次研究當中，在實施胎兒羊水細胞培養染色體核型分析的時候，發現的嵌合體情況達到了0.46%。在進行臍血或胎兒組織培養驗證之后，其相符率達到了71.4%。其中有2例經過臍帶血驗證確定為正常染色體核型的病例，在胎兒出生之后，進行6～12月的隨訪，沒有發現異常。但是隨著時間的增加，幼兒逐漸發育，其各種表型特征也可能會出現，因此無法進行排除嵌合體的可能，因此仍然需要長期的隨訪進行確定驗證羊水、臍血結果的準確性[1-2]。如果發現羊水細胞培養是嵌合體，但是經過臍血驗證卻顯示為正常的染色體核型的時候，需要采用普勒超聲進行仔細觀察，并且在胎兒出生之后，也需要進行長期隨訪，確定幼兒是否屬于嵌合體，然后做好相關的治療準備。

綜上所述，在產前診斷當中，確定疑似胎兒羊水細胞染色體嵌合體的患者，需要及時實施胎兒臍帶血染色體分析，獲得正確的驗證結果。