非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞中上皮特異性黏附分子的表達(dá)及其對(duì)細(xì)胞增殖和侵襲能力的影響

劉春華，王俊軼，銀 春，張 艷，姜 琪

1)四川綿陽(yáng)四〇四醫(yī)院呼吸內(nèi)科 四川綿陽(yáng) 621000 2)成都市第三人民醫(yī)院呼吸與危重癥醫(yī)學(xué)科 成都 610031

肺癌是常見(jiàn)的肺部惡性腫瘤，根據(jù)組織病理學(xué)特性將其分為小細(xì)胞肺癌和非小細(xì)胞肺癌(non-small cell lung cancer，NSCLC)，其中NSCLC占80%～85%。近年來(lái)，肺癌在全球范圍內(nèi)的發(fā)病率一直呈上升趨勢(shì)，嚴(yán)重威脅人類的健康[1-2]。上皮特異性黏附分子(epithelial cell adhesion molecule，EpCAM)屬于黏附分子家族的單次跨膜糖蛋白，在大腸癌、前列腺癌和胃癌等多種人類腫瘤組織中異常表達(dá)，通過(guò)調(diào)控相關(guān)信號(hào)通路或靶基因參與腫瘤細(xì)胞的增殖、分化、黏附、侵襲和遷移等過(guò)程，與腫瘤的發(fā)生發(fā)展關(guān)系密切[3-5]。有研究[6-7]指出，高表達(dá)EpCAM與肺癌轉(zhuǎn)移和預(yù)后不良關(guān)系密切，其可能在肺癌的發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮重要作用。目前，EpCAM在NSCLC中的作用尚不清楚，本研究通過(guò)觀察EpCAM在3種NSCLC細(xì)胞株H226、A549和PC-9中的表達(dá)，并構(gòu)建EpCAM低表達(dá)的A549細(xì)胞，從細(xì)胞水平上探討EpCAM對(duì)NSCLC細(xì)胞增殖及侵襲的影響，以期為NSCLC的治療提供新靶點(diǎn)。

1 材料與方法

1.1材料正常支氣管上皮BEAS-2B細(xì)胞、肺鱗癌H226細(xì)胞、肺腺癌A549細(xì)胞、肺腺癌PC-9細(xì)胞均購(gòu)于中國(guó)科學(xué)院典型培養(yǎng)物保藏委員會(huì)細(xì)胞庫(kù)。胎牛血清、DMEM培養(yǎng)基和胰蛋白酶購(gòu)于美國(guó)Gibco公司，反轉(zhuǎn)錄試劑盒購(gòu)于日本TaKaRa公司，青/鏈霉素、SDS-PAGE蛋白上樣緩沖液、總蛋白提取試劑盒、BCA蛋白濃度測(cè)定試劑盒和CCK-8細(xì)胞活力檢測(cè)試劑盒購(gòu)于上海碧云天公司，脫脂奶粉購(gòu)于北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司， ECL超敏發(fā)光液購(gòu)于北京普利萊基因技術(shù)有限公司。EpCAM抗體、β-actin抗體、Ki-67抗體、MMP-9抗體和HRP-羊抗兔/鼠IgG購(gòu)自美國(guó)Santa Cruz公司。……