二氧化錳包覆的聚乳酸羥基乙酸共聚物載血卟啉單甲醚納米粒的藥動(dòng)學(xué)檢測(cè)和抑瘤效果

賈 欣，郝永偉，張超鋒，侯 琳，高珊珊，杜 娟

鄭州大學(xué)藥學(xué)院 鄭州 450001

血卟啉單甲醚(hematoporphyrin monomethyl ether，HMME)是我國(guó)獨(dú)立研制的第二代半合成光敏劑，已在臨床上試用于治療鮮紅斑痣和視網(wǎng)膜黃斑變性等疾病[1-3]。研究[4]表明，其用于腫瘤的光動(dòng)力治療效果顯著，但因其水溶性差，臨床應(yīng)用受到限制。有研究[5]報(bào)道，將藥物包載于納米載體中，可利用實(shí)體瘤的高滲透性和滯留效應(yīng)(enhanced permeability and retention effect，EPR效應(yīng))將藥物被動(dòng)靶向到腫瘤組織中，并延長(zhǎng)藥物血液循環(huán)時(shí)間。聚乳酸羥基乙酸共聚物(polylactide-co-glycolide，PLGA)生物相容性好，被美國(guó)FDA批準(zhǔn)作為藥用輔料，也被用于藥物或者光敏劑遞送，以期實(shí)現(xiàn)靶向、緩釋等目的[6-7]。本研究將HMME負(fù)載于PLGA納米粒中，并在其表面覆蓋二氧化錳(MnO2)層，制備PLGA/HMME@MnO2系統(tǒng)，然后采用高效液相色譜法考察該制劑在大鼠體內(nèi)的藥動(dòng)學(xué)參數(shù)；并以荷S180腹水瘤小鼠為模型，研究其對(duì)腫瘤的抑制效果。

1 材料與方法

1.1主要試劑和儀器PLGA(濟(jì)南岱罡生物科技有限公司)，HMME(上海先輝醫(yī)藥科技有限公司)，聚乙烯醇(PVA，聚合度1 788±50，成都市科龍化工試劑廠)，2-(N-嗎啡啉) 乙磺酸(MES，國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司)，高錳酸鉀(洛陽(yáng)市化學(xué)試劑廠)，PLGA/HMME和PLGA/HMME@MnO2為自制。S180腹水瘤細(xì)胞(中科院上海生命科學(xué)研究院細(xì)胞資源中心)，雌性SPF級(jí)昆明小鼠和SD大鼠(河南省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心)。Agilent1200 series HPLC色譜系統(tǒng)(美國(guó)Agilent公司)。

1.2血漿中藥物濃度的測(cè)定方法

1.2.1 色譜條件 色譜柱： Inertex C18 柱， 250 mm×4.6 mm， 5 μm；流動(dòng)相：0.2 g/L 醋酸鈉(用冰醋酸調(diào)pH至5.0)∶四氫呋喃=60∶40(體積比)；流速：1.0 mL/min；檢測(cè)器：熒光檢測(cè)器；激發(fā)波長(zhǎng)：395 nm；發(fā)射波長(zhǎng)：613 nm；柱溫：40 ℃；進(jìn)樣量：20 μL。

1.2.2 血漿樣品處理 取100 μL大鼠血漿樣品， 加入3 mL乙腈-甲醇(V乙腈∶V甲醇=3∶1)混合液，渦旋振蕩3 min， 12 000 r/min離心10 min，將上清液轉(zhuǎn)移至5 mL EP管中，室溫條件下通氮?dú)鈸]干；……