張宏蓮 孫輯凱 李宏鈴 劉玉露
1.齊齊哈爾醫學院; 2.哈爾濱市第一??漆t院
引言:赤芍是一種多年生草本植物,分布于俄羅斯、中國等地作為傳統常用中藥之一[1,2]。2015年版《中國藥典》規定赤芍來源于毛茛科植物芍藥(Paeonia lactiflora Pall.)或川赤芍(Paeonia veitchii Lynch.)的干燥根[3],以內蒙古多倫縣出產“多倫赤芍”為道地藥材,目前,野生芍藥的野生資源在逐漸減少。
蒼術是一種應用十分廣泛的傳統中藥,北蒼術(Atractylodeschinensis(DC.)Koidz.)是其來源之一,[3]主要產自內蒙古自治區東北部、山西省以及東北三省,[4,5]隨著市場需求的增多,野生蒼術資源逐漸匱乏。仿野生種植是解決市場窘境的有效途徑,但是,仿野生品的質量有待于借助實驗手段予以評價。[4,5]
黑龍江省齊齊哈爾市毗鄰內蒙古,氣候及環境與內蒙古相近,具備赤芍人工種植及栽培的仿野生環境。本研究在仿野生環境條件下,對赤芍及蒼術進行人工生產,研究適用于齊齊哈爾區域的仿野生栽培技術,并通過必要的成分分析進行質量評價,以期農業生產、增產、可持續發展提供技術支撐。
室外仿野生環境為齊齊哈爾醫學院藥用植物園,土壤為沙壤土。
儀器:Waters E2695高效液相色譜儀、MDF-492超低溫冰箱、高速多功能粉碎機、PALL水純化系統、ML203T/02十萬級電子天平。
試劑和藥材:,甲醇(色譜級)、磷酸二氫鉀、三氯甲烷、乙酸乙酯、甲醇、甲酸,均為分析純。
實驗樣品:栽培品經鑒定為赤芍及蒼術;分別標記為CS、CZ。
對照品:芍藥苷及蒼術素(中國食品藥品檢定研究院)。
赤芍:于4~5月間,畦面順向開淺溝,溝深5~7cm,將室內出芽的野生赤芍根芽移栽至室外仿野生試驗田中,按株距30cm栽種,芽朝上,用少量土固定芽頭,再用腐熟餅肥或有機肥料施入溝內,覆土后稍壓即可。于移栽后第三年的秋季采收栽培品,晾干后保存在-80℃條件下。
蒼術:于秋季9月移栽至林蔭地,剔除殘次的幼苗,畦中間高兩邊低,一端預留出移栽槽,寬約15~20cm,深度根據種苗根長,頂芽向上擺在移栽槽中,株距約15~20cm,覆土約5cm,行距保持35~40cm。
赤芍栽培品的檢測條件:Agilent ZORBAX Eclipse XDB-C18色譜柱(250×9.4mm,5μm);以甲醇-0.05mol·L-1磷酸二氫鉀溶液(50:50)為流動相,流速1.0mL·min-1,檢測波長230nm,進樣量:10 μl。待檢樣品的制備:以甲醇為溶劑,制成0.50 mg·ml-1的芍藥苷對照液,備用;分別精密稱取赤芍栽培品粉末約0.5g,兩份,精密加甲醇25ml,浸泡4h后超聲音處理,放冷,補齊失重,搖勻,經0.45μm微孔濾膜,取續濾液備用。
蒼術栽培品的檢測條件:Diamonsil C18色譜柱(4.6mm×250mm,5μl);流動相甲醇:水=(79:21)等度洗脫;流量1.0 ml/min;檢測波長340nm;進樣量20μl。待檢樣品的制備:以甲醇為溶劑,制得20mg·ml-1的蒼術素對照液;取蒼術栽培品,用粉碎機粉碎,過三號篩,精密稱取0.2g,置具塞錐形瓶中,精密量取甲醇50ml加入錐形瓶,用封口膜密封后,稱定重量,超聲處理(功率250W,頻率40KHz)1h,取出錐形瓶冷卻至室溫后,稱定重量,用甲醇補足缺失的重量,搖勻后,經0.45μm過濾膜后,取續濾液備用。
三年生的赤芍栽培品植株高度約70cm,葉互生,葉片近革質,有柄,長約6cm,小葉為長圓形、橢圓形,先端漸尖基部楔形,綠色,無毛;花,頂生,大形,花梗長,無毛,生葉狀苞片,萼片3~5,倒卵形,綠色;花瓣粉紅色,倒卵形,雄蕊多數,花藥黃色,根紡錘狀或圓柱狀肥大,紅褐色,折斷面粉白色。
蒼術栽培品莖直立,單生或少數莖成簇生,基部葉花期脫落;中下部莖葉幾無柄,倒卵形,中部以上或僅上部莖葉不分裂,倒長卵形,全部葉硬紙質,兩面綠色,無毛,邊緣或裂片邊緣有針刺狀緣毛或者重刺齒。頭狀花序單生莖枝頂端,總苞鐘狀,苞葉針刺狀羽狀全裂或深裂。小花白色,瘦果,被稠密的順向貼伏的白色長直毛,冠毛剛毛褐色或污白色。
經過HPLC測定,基線平穩,三年生赤芍栽培品含有芍藥苷為6.5%,符合法定藥品要求。
經過HPLC測定,基線平穩,三年生蒼術栽培品含有蒼術素為0.68%,符合法定藥品要求。
結論:本研究在室外的仿野生環境條件下,栽培赤芍、蒼術,通過測定栽培品中的指標成分,符合法定標準,表明齊齊哈爾地區栽培赤芍、蒼術具有一定的可行性,期待擴大規模,進一步規范仿野生栽培技術,以指導本區域農民種植,實現保質增產和創收。