紫杉醇聯(lián)合復(fù)方苦參注射液對結(jié)腸癌療效及對細胞增殖和免疫系統(tǒng)的影響

佟 柳，李玉蘭，郭 星，付曉麗，張惠卿，陳學(xué)謙

隨著現(xiàn)代生活節(jié)奏的加快及飲食結(jié)構(gòu)的改變，結(jié)腸癌發(fā)病率逐年上升，目前該病的治療仍以手術(shù)和化療為主[1]，化療藥物的多種不良反應(yīng)給結(jié)腸癌患者帶來了極大的痛苦[2]。復(fù)方苦參注射液是中藥注射劑，含有苦參、土茯苓、白茯苓等多味中藥，經(jīng)現(xiàn)代技術(shù)加工制成，其具多種抗腫瘤活性而被廣泛應(yīng)用于臨床惡性腫瘤的治療中[3]。中醫(yī)藥的運用能有效減緩化療帶來的不良反應(yīng)，對結(jié)腸癌生存質(zhì)量及預(yù)后都極為有利[4-5]。本研究觀察了紫杉醇聯(lián)合復(fù)方苦參注射液對結(jié)腸癌細胞增殖及免疫系統(tǒng)的影響。現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取保定市第一中心醫(yī)院2015年5月—2017年6月收治的結(jié)腸癌術(shù)后化療患者60例。納入標(biāo)準(zhǔn)：①病理學(xué)診斷符合結(jié)腸癌；②預(yù)計生存期>3個月；③首次入院手術(shù)并行術(shù)后化療；④患者及其家屬對研究知情并簽署同意書；⑤對本研究所用藥物不過敏；⑥無肝腎功能及血液系統(tǒng)嚴(yán)重疾病。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并心腦血管、肝腎、血液、神經(jīng)系統(tǒng)等嚴(yán)重原發(fā)性疾病；②結(jié)腸癌復(fù)發(fā)及發(fā)生癌癥轉(zhuǎn)移者；③有化療禁忌證或已停用化療藥物；④對本研究使用藥物過敏或認(rèn)知功能障礙者。⑤伴有糖尿病、甲狀腺疾病及胃腸道疾病等影響研究療效及預(yù)后者。按化療方法分為觀察組和對照組，每組30例。觀察組男18例，女12例；年齡33～67(47.67±7.31)歲；病理類型：未分化癌8例，腺癌7例，黏液腺癌15例；對照組男20例，女10例；年齡32～68(47.51±7.23)歲；病理類型：未分化癌7例，腺癌6例，黏液腺癌17例。2組在性別、年齡、病理類型方面比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)。

1.2治療方法 對照組采取常規(guī)化療方案：紫杉醇注射液(哈藥集團生物工程有限公司，國藥準(zhǔn)字H20059962 )135～175 mg/m2，腹腔灌注，1次/d，每2周為1個周期，共治療2個周期。觀察組在對照組的基礎(chǔ)上加用復(fù)方苦參注射液(山西振東制藥股份有限公司，國藥準(zhǔn)字Z14021230)20 ml溶于生理鹽水100 ml中，靜脈滴注，1次/d，應(yīng)用于整個化療周期。2組化療期間均給予保肝、止吐及對癥處理。

1.3觀察指標(biāo)及檢測方法

1.3.1臨床療效判定： 近期療效評定按WHO 實體瘤客觀療效評價標(biāo)準(zhǔn)[6]。完全緩解(CR)：所有病灶消失；部分緩解(PR)：病灶縮小50%；進展(PD)：病灶增加25%；無效(SD)：非CR、PR、PD患者。治療有效率=(CR+PR)/總例數(shù)×100%。

1.3.2化療不良反應(yīng)判定：根據(jù)WHO抗癌藥物毒性反應(yīng)評定標(biāo)準(zhǔn)[6]分為0級、I級、Ⅱ級和Ⅳ級，分別評價2組血液毒性和胃腸道反應(yīng)情況：血液毒性包括白細胞異常，血小板減少或全身、顱內(nèi)出血。胃腸道反應(yīng)包括惡心嘔吐、腹痛腹瀉、便秘。

1.3.3外周血T淋巴細胞亞群檢測：分別于化療前和化療2個療程完成后，抽取2組空腹靜脈血5 ml，用酶聯(lián)免疫吸附法檢測外周血T淋巴細胞亞群(試劑盒由南京建成生物工程研究所提供)按說明書進行操作。

1.3.4細胞轉(zhuǎn)移增殖情況：于化療2個療程完成后第3天，采集2組的淋巴細胞PBS洗滌制成單細胞懸濁液，加入試劑反應(yīng)后上機檢測細胞轉(zhuǎn)移增殖情況。記錄2組干擾素-γ(IFN-γ)增殖水平及淋巴細胞、白細胞介素-2(IL-2)表達水平、T 淋巴細胞轉(zhuǎn)移率及淋巴細胞凋亡率。

2 結(jié)果

2.12組療效比較 觀察組總有效率高于對照組(χ2=5.454，P=0.0195)。見表1。

表1 2組結(jié)腸癌療效比較[例(%)]

注：對照組采用常規(guī)化療，觀察組在對照組基礎(chǔ)上加用復(fù)方苦參注射液；與對照組比較，aP<0.05

2.22組T淋巴細胞亞群水平比較 2組化療前CD3+、CD4+、CD4+/CD8+、NK水平比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。化療后CD3+、CD4+、CD4+/CD8+、NK細胞水平均低于治療前，CD8+水平高于治療前(P<0.05)。觀察組CD3+、CD4+、CD4+/CD8+、NK水平高于對照組，CD8+水平低于對照組(P<0.05)。見表2。

2.32組化療不良反應(yīng)程度比較 觀察組化療后不良反應(yīng)總發(fā)生率為13.33%，對照組不良反應(yīng)總發(fā)生率為50.00%；觀察組不良反應(yīng)發(fā)生率低于對照組(χ2=9.319，P=0.0023)。見表3。

2.42組淋巴細胞轉(zhuǎn)移和增殖情況比較 觀察組IFN-γ、IL-2 水平及T 淋巴細胞轉(zhuǎn)移率高于對照組，淋巴細胞凋亡率低于對照組(P<0.05)。見表4。

表2 2組結(jié)腸癌化療前后T淋巴細胞亞群水平比較

注：對照組采用常規(guī)化療，觀察組在對照組基礎(chǔ)上加用復(fù)方苦參注射液；與治療前比較，aP<0.05

表3 2組結(jié)腸癌化療不良反應(yīng)發(fā)生情況比較[例(%)]

注：對照組采用常規(guī)化療，觀察組在對照組基礎(chǔ)上加用復(fù)方苦參注射液；與對照組比較，aP<0.05

表4 2組結(jié)腸癌化療后淋巴細胞轉(zhuǎn)移和增殖情況

注：對照組采用常規(guī)化療，觀察組在對照組基礎(chǔ)上加用復(fù)方苦參注射液

3 討論

結(jié)腸癌發(fā)病率居我國惡性腫瘤第4位。目前該病的治療方式為結(jié)腸癌根治術(shù)結(jié)合術(shù)后化療，但化療易引起消化道反應(yīng)及骨髓抑制等多種不良反應(yīng)，采用化療藥物引發(fā)的耐藥性及毒副作用一直是相關(guān)學(xué)者重點關(guān)注的難題[7-8]。因而尋求高效低毒的結(jié)腸癌治療方式，積極治療化療相關(guān)的不良反應(yīng)，可提高該類患者生存率、改善其生活質(zhì)量及預(yù)后[4]。

結(jié)腸癌常用的化療藥物包括順鉑、紫杉醇、卡培他濱、欖香烯等，均具有化療作用[9]。紫杉醇是從紅豆杉樹皮中分離提純的天然次生代謝產(chǎn)物，具有良好的抗腫瘤效果[10-12]。體外實驗發(fā)現(xiàn)，紫杉醇可顯著降低T淋巴細胞、IFN-γ的水平，抑制淋巴細胞的轉(zhuǎn)移、增殖,該藥還能促進體內(nèi)CD8+細胞及巨噬細胞的活化，增強癌癥患者T淋巴細胞及NK細胞的抗腫瘤活性。紫杉醇可阻止細胞分裂，激活巨噬細胞介導(dǎo)的抗癌作用[13]。紫杉醇通過結(jié)合微管蛋白的α及β端，形成無功能且不解聚的多聚體，消耗細胞內(nèi)的微管蛋白，阻止紡錘體形成，細胞有絲分裂由此中止而起到抗腫瘤細胞的作用。文獻報道，紫杉醇能降低淋巴細胞溶解靶細胞的動力學(xué)和淋巴細胞的再生能力[14-16]。

體外基礎(chǔ)實驗顯示,復(fù)方苦參注射液所含的苦參堿及氧化苦參堿可作用于結(jié)腸癌細胞端粒酶，具有殺傷腫瘤細胞作用[17]。苦參堿可通過抑制腫瘤細胞的有絲分裂來阻止腫瘤細胞的增殖和分化，同時其對腫瘤細胞具有直接殺傷作用[18]。氧化苦參堿可抑制腫瘤和血管內(nèi)皮細胞的分裂增殖，但對正常細胞不產(chǎn)生破壞作用,并通過升高白細胞計數(shù)來提高機體免疫力來對抗癌細胞。復(fù)方苦參注射液所含的中藥能發(fā)揮清熱解毒、和胃止嘔之效，對于化療后出現(xiàn)的血白細胞異常、惡心嘔吐等癥狀具有良好的緩解作用[19-20]。文獻報道,復(fù)方苦參注射液在晚期結(jié)腸癌患者的治療中可起到延長腫瘤中位擴散時間并提高其生存率的作用[16]。本研究結(jié)果顯示，觀察組有效率及不良反應(yīng)發(fā)生率均較對照組得到明顯的改善，與上述文獻一致。

化療會抑制機體的免疫功能，從而使其對腫瘤的抑制作用降低，T、B淋巴細胞亞群在抗腫瘤免疫功能中有著重要作用。苦參堿與化療藥物合用，能促進T、B淋巴細胞的分化、增殖，從而增強機體的免疫功能并促進腫瘤細胞凋亡[21-22]。本研究結(jié)果顯示，觀察組化療后CD3+、CD4+、CD4+/CD8+ 和NK水平顯著高于對照組，CD8+水平則明顯低于對照組，提示聯(lián)合復(fù)方苦參注射液能顯著改善免疫功能。與相關(guān)文獻一致[23-24]。

綜上所述，紫杉醇聯(lián)合復(fù)方苦參注射液治療結(jié)腸癌具效果滿意，能有效抑制結(jié)腸癌細胞的增殖，改善患者免疫系統(tǒng)功能，并減少化療的毒副反應(yīng)，值得臨床推廣。