EB病毒致傳染性單核細胞增多癥患兒血清DNA峰值載量與肝損害分析

林盛靜

EB病毒（EBV）又稱人類皰疹病毒4型（HHV-4），是1964年Epstein等在研究非洲兒童霍奇金病時發現的一種人類B淋巴細胞病毒，1968年人們證實EBV為傳染性單核細胞增多癥的常見病原體之一，主要通過呼吸道傳播。患兒臨床表現主要為發熱、咽峽炎、淋巴結腫大，也可累及多個器官造成損傷，尤其以肝損傷最為常見，易與其他原因所致肝功能損傷混淆，增加臨床醫生對疾病診斷與治療的難度。筆者通過對EBV相關肝功能損傷進行分析，探索EBV感染后血清峰值DNA載量與肝功能損傷的關系，旨在協助臨床準確診斷與治療。

1 對象和方法

1.1 對象 選擇2016年1月至2017年11月因EBV感染致傳染性單核細胞增多癥收入我院的患兒114例，男 67例（41.20%），女 47例（58.80%），年齡 8個月~15歲。

1.2 診斷與排除標準 傳染性單細胞增多癥診斷標準：根據流行情況、典型臨床表現（發熱、咽痛、肝脾及淋巴結腫大）、外周血異性淋巴細胞＞10%、EBV特異性抗體（VCA-IgM、EA-IgG）和EBV-DNA檢測可作出臨床診斷。排除標準：（1）EBV以外的細菌、病毒、支原體、衣原體感染者；（2）近期服用肝損傷藥物者；（3）除傳染性單細胞增多癥外患其他原發性或繼發性致肝損傷疾病者。

1.3 方法 患兒入院后抽取靜脈血5ml，置于黃頭管內，3 000r/min離心10min，取上層血清。使用美國ABI7500及其配套試劑檢驗血清中EBV-DNA載量。采用Beckman AU5800及其配套試劑檢測ALT與AST水平。按EBV-DNA峰值載量將患兒分為低載量組[EBVDNA 載量＜2（lg Copies/ml）]17 例，中載量組[EBV-DNA載量 2~4（lg Copies/ml）]81 例，高載量組[EBV-DNA 載量＞4（lg Copies/ml）]16例。按年齡將患兒分為低齡組（8個月~4歲）69例，中年齡組（5~8歲）35例，高年齡組（9~15歲）10例。按性別將患兒分為男性組67例，女性組47例。以ALT≥50U/L或AST＞60U/L為界判定為肝功能異常。

1.4 統計學處理 采用SPSS 19.0統計軟件，EBVDNA載量數據以（）logCopies/ml表示，其中兩個獨立樣本均數的比較采用t檢驗，多個獨立樣本均數的比較采用單因素方差分析。偏正態分布數據用中位數（P50）與四分位間距（QR）描述，并且多個獨立樣本中位數的比較采用Kruskal-Wallis檢驗。P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 EBV-DNA峰值載量與肝功能的關系 肝功能異常率隨著EBV-DNA峰值載量的升高而升高，差異有統計學意義（χ2=9.447，P=0.009），肝功能損傷程度隨著EBV-DNA峰值載量的升高而升高，差異有統計學意義（χ2=14.372，P=0.001），詳見表 1、2。

表1 EBV-DNA峰值載量與肝功能損傷的關系[例（%）]

表2 EBV-DNA峰值載量與肝功能損傷程度的關系

2.2 不同性別患兒的EBV-DNA峰值載量比較 男性患兒 EBV-DNA 峰值載量為（3.54±0.50）lg Copies/ml，女性患兒 EBV-DNA 峰值載量為（3.40±0.55）lg Copies/ml，不同性別患兒的EBV-DNA峰值載量差異無統計學意義（t=1.04，P=0.300）。

2.3 不同年齡組EBV-DNA峰值載量比較 不同年齡組的EBV-DNA峰值載量無統計學差異（F=0.13，P=0.880），患兒主要集中在低、中年齡組，達91.23%，見表4。

表4 不同年齡組DNA載量比較

3 討論

低齡兒童由于免疫系統尚未發育完善，易導致EBV感染后不能徹底清除，造成潛伏或者長期感染，引起病毒復制入血。長期的EBV活動性感染易引起多種疾病如傳染性單核細胞增多癥、淋巴瘤及類風濕關節炎等[1]。EBV感染引起的傳染性單核細胞增多癥患兒起病常隱匿，典型表現為發熱、淋巴結大、咽峽炎“三聯癥”[2]，也可累及各個器官造成損傷，而肝臟是EBV感染侵犯的主要器官之一[3]。據研究發現，EBV感染的CD8+T細胞可選擇性的被肝臟捕獲。肝KUPPERFER細胞表達可溶性分子，包括Fas配體、IFNγ和TNF-α從而導致肝臟損傷[4]。

已有研究提示EBV感染可以通過誘發與機體免疫能力相關的因子從而導致機體各臟器功能的損傷，主要表現為細胞的凋亡[5]。目前研究認為，T淋巴細胞免疫對控制EBV感染起決定性作用。B淋巴細胞是EBV攻擊的靶細胞，其表面有EBV受體，故先受累，導致B淋巴細胞抗原性改變，激活T淋巴細胞轉化為T淋巴細胞效應細胞（CTL），直接破壞攜帶EBV的B淋巴細胞。而EBV原發性肝損傷的機制是通過EBV感染細胞后的脂質過氧化反應產生的自由基亢進，從而產生毒性反應導致肝細胞的損傷。

本研究114例EBV感染引起的傳染性單核細胞增多癥患兒中，肝損傷56例，占49.12%，并隨著血清中EBV-DNA的載量升高而逐漸增高。肝損傷的程度也隨著血清中EBV-DNA的載量升高而逐漸加重。結合已有的研究推測可能與Th1/Th2比例失衡及T淋巴細胞過度激活有關系。故臨床應及時關注EBV-DNA載量與肝功能的變化，以及時對癥治療。本研究中，所有患兒中，中、低年齡組患兒占比達到91.23%，高年齡組患兒占比僅為8.77%，可能與機體的不斷發育與免疫系統的完善有關，與國內流行病學調查基本相符[6]，但不同年齡組EBV-DNA載量并無統計學差異。本研究中，不同性別患兒EBV-DNA載量并無統計學差異。

EBV感染致傳染性單核細胞增多癥患兒在臨床多起病隱匿，易漏診、誤診，并且容易造成肝臟的損傷，甚至肝功能衰竭。而EBV-DNA載量與患兒肝功能有著緊密的聯系，及時監測EBV-DNA載量以及肝功能，對臨床的治療及患兒的預后都有著非常重要的意義。