馬方綜合征臨床表現及FBN1基因檢測5例分析

楊明烽 樓楊勇 呂小輝 王朝輝 陳立軍

馬方綜合征是一種常染色體顯性遺傳病，人群發病率約為6.5/10萬[1]。因15號染色體上的FBN1基因突變導致其編碼的原纖維蛋白1缺陷，引起心血管、眼、骨骼等多系統病變，主動脈瘤/夾層為其主要致死病變。診斷上目前多采用2010年的修訂版Ghent方案[2]，除根據臨床表現外，FBN1基因檢測已經成為一項重要的診斷手段。筆者對本院近年來診治并作FBN1基因檢測的5例馬方綜合征患者的臨床表現資料進行了整理和分析，現將結果報道如下。

1 資料和方法

1.1 一般資料 本院2014年1月至2016年12月收治并完成FBN1基因檢測的5例馬方綜合征患者，男3例，女2例，年齡19～37歲；就診原因皆為主動脈病變，患者的一般資料見表1。

表1 5例馬方綜合征患者的一般資料

1.2 診斷方法

1.2.1 采用修訂版Ghent診斷方案[2]根據這一方案，若患者無馬方綜合征家族史，但主動脈根部直徑Z值≥2，合并晶狀體脫位、FBN1基因突變、系統評分＞7分，3者之一，或晶狀體脫位合并FBN1基因突變并主動脈病變，則馬方綜合征診斷成立；對于有家族史的患者，具有晶狀體脫位、系統評分≥7分、主動脈根部直徑Z值≥2，三者之一診斷即成立。修訂版Ghent方案系統評分共13項，腕征和拇指征（兩征均陽性評3分，僅其中一征陽性評1分）、胸廓畸形（雞胸2分、漏斗胸或胸部不對稱 1分）、足跟畸形（2分，若僅平足1分）、氣胸（2分）、腰骶部硬脊膜囊擴張（2分）、髖臼內陷（2分）、身體下部/上部或臂展/身高過大（1分）、脊柱畸形（側凸或胸腰的脊柱后凸，1分）、肘關節外展受限（1分）、面部特征（1分）、皮膚牽拉紋（1分）、近視＞3屈光度（1分）、二尖瓣脫垂（1分）。

1.2.2 其他檢查方式 采用主動脈CTA檢查評估主動脈病變，采用超聲檢查評估心臟情況，由眼科醫師檢查晶狀體是否脫位及視力情況，詳細詢問每例患者的家族史并記錄直系親屬的醫療情況。

1.3 FBN1基因檢測和分析方法 取患者外周靜脈血2 ml，置于乙二胺四乙酸抗凝管，外送深圳華大基因研究院提取基因組DNA，根據美國國立生物技術信息中心數據庫中FBN 1基因的序列設計引物PCR擴增該基因的全部外顯子及剪接位點區域，后采用芯片捕獲高通量測序，檢查獲得的FBN 1基因致病突變，根據患方意愿，取患者和家系成員血樣，采用Sanger法驗證是否具有該突變。對比人類基因突變數據庫進行分析，錯義突變另利用Polyphen 2軟件及SIFT軟件預測其致病性并檢索參考文獻作判定，根據修訂版Ghent方案，將無義突變、堿基缺失、堿基插入、剪接突變直接判定為致病突變。基因變異命名根據人類基因組變異協會建議的規則描述。

2 結果

2.1 5例馬方綜合征患者的系統評分結果 見表2。

表2 5例馬方綜合征患者的系統評分結果（分）

由表2可見，除例5外，其他4例患者系統評分總分均＞7分。

2.2 5例馬方綜合征患者的FBN1基因檢測結果 見表3。

表3 5例馬方綜合征患者的FBN1基因檢測結果

由表3可見，例1、5為堿基缺失，例2為剪接突變，故直接判定為致病突變。例3、4為錯義突變，根據Polyphen 2軟件及SIFT軟件預測，均為致病突變。例2和例3的FBN1基因突變既往文獻已報道為致病突變[3-4]。例3的c.5540G＞T突變使得原纖維蛋白-1的1847位氨基酸由半胱氨酸變為苯丙氨酸，鑒于該蛋白的半胱氨酸序列高度保守[5]，具有重要功能，故該突變為有害。

其中例2、4、5進行了Sanger法驗證，其測序峰圖見圖1。

由圖1可見，例2、例5具有芯片捕獲高通量測序發現的FBN1基因突變，例4經過包含其父母的家系驗證，可見其父母都不具有c.4022A＞G突變，故為新生突變。

圖1 FBN1基因突變位點的Sanger法測序峰圖（箭頭指示突變的堿基，a：例2患者；b：依次為例4患者本人、其母親、其父親；c：例5患者）

3 討論

馬方綜合征，最早由法國兒科醫生Antoine Marfan所描述，并逐漸認識到馬方綜合征具有骨骼、眼、心血管三大系統病變，并闡明了其具有常染色體顯性遺傳方式，1991年Dietz等[6]確立了馬方綜合征由FBN1基因突變導致，在這一過程中，馬方綜合征的診斷標準也一直在演進，從主要根據臨床表現的1988年柏林方案，到1996年Ghent方案，直至最新的2010年修訂版Ghent方案，FBN1基因檢測已經成為診斷馬方綜合征的重要手段。

分析本組患者，例5若不進行FBN1基因檢測，則尚不能建立馬方綜合征診斷。且FBN1基因檢測，除用于明確診斷外，對于有生育意愿者，如例1，還可以明確其是否適宜生育，避免將疾病遺傳至下一代[7-8]，這對于馬方綜合征這一重大遺傳疾病具有顯著意義。例2、3、4通過基因檢測，不但查明了其致病突變，而且可用于明確家系中的其他成員的FBN1基因型，若通過費用低廉的針對該位點的Sanger法測序明確其具有該致病突變，則可在致死性主動脈病變發作前提前獲得診斷，以進行相應的預防措施，包括服用β受體阻滯劑或血管緊張素Ⅱ受體拮抗劑類藥物以延緩主動脈根部擴張[9]，若排除FBN1基因突變，則可避免相應的恐慌，此點對于家系中的幼兒尤其重要，因其可能尚無馬方綜合征的相關外顯病變，無法進行臨床診斷。

我們發現了3種鮮有文獻報道的FBN1致病突變，進一步豐富了對于馬方綜合征和FBN1基因的認識。例1、5為堿基缺失形成框移突變，例2為剪切突變，都可造成原纖維蛋白1部分缺失，致嚴重功能障礙，這與既往報道相符[9]，即與無主動脈病變的馬方綜合征相比，患有主動脈瘤/夾層者，FBN1基因的突變類型中相對嚴重的框移突變和剪切突變的比例更高。

本組中病例較少。芯片捕獲高通量測序準確性相當高，但最好進行Sanger法驗證，本組患者有2例未進行。此外，本組患者僅1例進行了家系驗證，其余病例待后續進一步隨訪完善。