武漢市某醫院就診患者丙型肝炎病毒抗體與基因分型結果分析

徐 魯 馮家立 章莉莎△

1.華中科技大學同濟醫學院附屬同濟醫院體檢中心 (湖北 武漢，430022 )2.華中科技大學同濟醫學院附屬同濟醫院檢驗科

在世界范圍內，丙型肝炎病毒(HCV)感染人數約為1.3～2.1億人，是肝細胞癌的主要危險因素之一，全球至少三分之一的肝細胞癌病例是由HCV感染造成的，每年有約35萬人死于丙型肝炎相關疾病[1]。HCV基因具有高度變異性，目前HCV基因分型有很多類型，根據基因組核苷酸序列的差異至少可分為7種基因型以及多種亞型。本文回顧研究了2017年武漢市某三甲醫院就診患者HCV抗體檢測結果以及HCV基因分型結果，以期對HCV防治提供參考。

1 資料與方法

1.1 研究對象 收集2017年在武漢市某三甲醫院檢驗科進行HCV抗體檢測以及HCV基因分型檢測的患者數據和臨床資料。刪除同一患者重復檢測的結果，最終共收集到HCV抗體檢測結果125036例，HCV分型檢測結果191例。

1.2 檢測方法

1.2.2 HCV基因分型檢測方法 利用針對HCV基因組RNA的core/E1區域設計的PCR引物采用RT-PCR擴增，擴增后產物利用相應的測序引物采用Sanger一代測序技術測定其序列，將測得序列分別使用美國國立生物技術信息中心(NCBI)的Viral Genotyping Tool、Blast數據庫以及HCV Sequence Database數據庫進行序列比對后，確定HCV的基因型。研究數據來源實驗室主要檢測HCV常見基因型1b，2a，3a，3b和6a型。HCV RNA提取使用蘇州天隆生物科技有限公司生產的HCV RNA提取試劑盒，PCR產物純化采用Axygen公司的AxyPrep PCR純化試劑盒。

1.3 統計學方法 利用Access 2007 數據庫軟件建立數據庫后對資料數據進行分類整理。使用SPSS 19.0統計軟件對整理后數據進行統計學處理。計數資料采用χ2檢驗，以α=0.05為檢驗水準。當有25%以上格子的理論頻數小于5時采用Fisher確切概率法。

2 結果

2.1 HCV抗體陽性患者就診科室分布 見表1。125036例患者中住院患者104091例，分布在全院45個病區，HCV抗體陽性患者分布情況如表3所示。陽性患者在不同病區的分布差異具有統計學意義(χ2=342.622，P<0.05)，住院患者總體HCV抗體陽性率1.30%，在45個病區或病房中，共有22個科室陽性率高于住院患者總體陽性率(1.30%)，感染科陽性率最高達到4.58%，兒科病區陽性率較低且明顯低于其他科室。

表1 武漢市某三甲醫院住院患者不同病區或病房HCV抗體陽性率情況

2.2 HCV抗體陽性患者的性別分布 見表2。

表2 武漢市某三甲醫院就診患者不同性別HCV抗體陽性率比較

與男性患者比較，*P<0.05

2.3 HCV抗體陽性患者的年齡分布 見表3。經χ2檢驗，各年齡組之間差異有統計學意義(χ2=354.869，P<0.05)，其中60～70歲年齡組陽性率最高，40歲以下患者的陽性率明顯低于40歲以上患者，在小于40歲的年齡組中，小于20歲的患者陽性率與相比20歲到40歲患者的陽性率有明顯降低的趨勢。

表3 武漢市某三甲醫院就診患者不同年齡組HCV抗體陽性率比較

2.4 患者HCV基因分型構成情況 見表4。收集到的191例HCV基因分型結果中有部分結果由于HCV RNA定量小于檢測下限無法進行基因分型，經過剔除數據后得到準確分型的結果148例。148例檢測結果覆蓋臨床常見的5種基因型，分別為1b型、2a型、3a型、3b型、6a型，各類型分布情況如表4所示。148例有效數據中以1b型和2a型為主占到全部分型的90.54%。

表4 武漢市某三甲醫院就診患者HCV各基因型構成比

3 討論

丙型肝炎是一種在世界分布廣泛的傳染病，不同年齡、民族、性別人群都是HCV的易感者。1992年全國病毒性肝炎血清流行病調查結果顯示，我國人群HCV抗體陽性率為3.20%，估算全國HCV感染者4000萬[2]。因此，對就診患者的丙肝感染情況進行統計分析對制定丙肝治療措施和預防醫院感染有著重要的意義。

通過對2017年武漢市某三甲醫院就診患者HCV抗體以及HCV病毒基因型檢測數據分析，2017年HCV抗體總體陽性率為1.46%，低于1992年全國病毒性肝炎血清流行病調查得到的HCV抗體陽性率3.4%，亦低于吳青等[3]報道的湖北省某三甲醫院HCV抗體陽性率1.55%。就診患者中，男性患者HCV抗體陽性率(1.34%)低于女性患者陽性率(1.58%)不同性別之間HCV抗體陽性率具有明顯差異。陳園生等[4]對2006年中國乙型肝炎血清流行病學調查的資料及血清庫開展丙肝血清學研究發現男女之間HCV抗體陽性率無明顯差異。這一結論與本研究的結論不一致，可能原因是本次研究的樣本來源于醫療機構的就診患者，與陳園生等研究的樣本來源不同導致的。

在HCV抗體陽性患者在各年齡段分布情況方面，本次研究發現各年齡組之間差異有統計學意義，其中60～70歲年齡組陽性率最高，40歲以下患者的陽性率明顯低于40歲以上患者。在小于40歲的年齡組中，小于20歲的患者陽性率與20歲～40歲患者的陽性率相比有明顯降低的趨勢，這可能與我國1993年后對獻血員篩查HCV抗體，阻斷經過輸血和血液制品傳播HCV有關[5]。對于本研究的醫療機構而言，應當對40歲以上人群加強HCV抗體篩查，提高HCV的檢出率，降低醫療工作中的風險。

通過對HCV抗體陽性住院患者在各病區或病房分布情況的分析，發現HCV抗體陽性住院患者的分布存著明顯的差異。感染科病房、肝臟外科病房、透析中心、器官移植病房陽性率較高，陽性率分別為4.58%、3.63%、3.59%、3.41%，這可能與這些科室住院患者來源有關。感染科病房多為各種傳染病患者，肝臟外科病房多為肝癌患者，器官移植病房也存著許多由于肝炎肝硬化需要肝臟移植的患者，而慢性HCV感染患者多有肝硬化、肝癌的發生，血透中心患者因為長期進行血透治療更容易感染HCV病毒。另外，消化內科、內分泌科、ICU病房、呼吸與危重癥醫學科、頭頸部腫瘤科病房、胸部腫瘤科病房、中西醫結合科病房、腎病內科、創傷外科病房、康復病房、神經科病房、消化系統腫瘤科病房、口腔科病房、血液內科、骨外病房、心臟大血管外科病房、婦科腫瘤病房、婦科病房HCV抗體陽性率明顯高于住院患者總體HCV抗體陽性率(1.30%)。臨床醫務人員每天需要接觸許多患者的血液、體液、分泌物，一旦接觸到破損的皮膚粘膜或者發生針刺傷完全有可能被感染[6,7]，因此上述這些科室在醫療工作中應當加強防護，避免職業暴露的發生。兒科專業的相關科室HCV陽性率較低，這進一步說明了國家這些年對HCV感染預防控制的成果。產科HCV抗體陽性率0.81%高于深圳市寶安區[8]醫療機構HCV抗體陽性率水平以及十堰市[9]報道的陽性率水平，表明該院就診的孕產婦人群HCV抗體陽性率高于其他城市水平，應當對來院就診的孕產婦加強HCV抗體的篩查，確保阻斷HCV母嬰傳播的傳播途徑，。

HCV基因型目前被分為7種主要基因型和67個亞型，1、2、3型呈全球分布，我國主要以HCV 1b型和2a型最為常見，70%以上的HCV為1b型[5,10,11]這與本研究發現的就診患者主要基因型一致?！?016年歐洲肝病學會丙型肝炎治療指南》[12]指出，確定HCV治療方案前應當對HCV基因型和基因1型的亞型(1a或1b)進行評估，就本次數據來看，檢測HCV基因分型患者僅占HCV抗體陽性患者的比例為8.09%，進行基因分型檢測的患者并不多。因此，在臨床診療過程中應當推薦HCV RNA陽性的患者在治療之前進行基因分型檢測，保證治療方案的精準有效。