腦小血管病患者血漿血管內皮生長因子水平的變化及意義

張貴強

廣西醫科大學附屬民族醫院，廣西 南寧 530001

腦小血管病是一種常見的腦血管疾病[1]。隨著影像學的不斷發展，腦小血管病的檢出率也不斷攀升[2]，目前其在我國缺血性腦血管病中占比達42.3%[3]。近年來，關于腦小血管病的研究多為危險因素分析及影像學改變，但其發病后是否存在自我保護機制以及自我保護的機制如何卻少有報道。本研究旨在通過酶聯免疫分析對腦小血管病患者的血漿血管內皮生長因子水平進行測定，分析其變化及意義，探討其自我保護機制。

1 資料與方法

1．1臨床資料選擇2016-05—2017-06廣西醫科大學附屬民族醫院神經內科收治的符合納入標準的腦小血管病患者83例，完善頭顱MRI+SWI檢查，根據頭顱MRI的檢查結果分為單發腔梗組和多發腔梗組合并腦白質病變組(圖1)，并選取廣西醫科大學附屬民族醫院體檢科經頭顱磁共振檢查無異常的健康志愿者40例為對照組。單發腔梗組39例，男22例，女17例，年齡49～68(58.72±7.34)歲；多發腔梗合并腦白質病變組44例，男25例，女19例，年齡48～71(60.04±7.08)歲；健康志愿者對照組男20例，女20例，年齡48～69(59±6.71)歲。3組性別、年齡差異均無統計學意義(P>0.05)，具有可比性。本研究經廣西醫科大學附屬民族醫院倫理委員會批準，且所有研究對象簽署知情同意書。

圖1 入組患者MRI表現 A：單發腔梗組；B：多發腔梗合并腦白質病變組Figure 1 MRI manifestations of patients in the group A：single lumen infarction group；B：multilocular infarction with leukodystrophy group

1．2診斷標準目前，關于腦小血管病的診斷標準還無統一定論，本研究參照《中國腦小血管病診治共識》[4]并結合MRI常見表現制定如下標準：(1)腔隙性梗死：MRI表現為圓形、橢圓形或裂隙狀的腔隙灶，邊界清晰，直徑3～15 mm，T1WI呈明顯低信號，T2WI呈高信號(圖1A)。(2)腦白質病變：表現為基底節區、半卵圓中心、放射冠等部位的點狀或片狀異常信號，T1WI呈等、低信號，T2WI和MRI液體衰減反轉恢復序列為高信號，病灶邊界模糊，直徑多>5 mm(圖2A)。(3)腦微出血：MRI T2WI梯度回波或SWI呈現出直徑2～5 mm類圓形的均勻一致低信號灶，周圍無水腫帶(圖2B)。(4)血管周圍間隙擴大：T2WI呈高信號，直徑<3 mm，圓形或線形，位于白質和深部灰質，明顯時T1上可見低信號(圖2C)。

1．3納入標準與排除標準納入標準：(1)具有完善的頭顱MRI和SWI資料者；(2)符合上述腦小血管病診斷標準中第1條和(或)第2條；MRI示梗死灶為單發，或多發合并腦白質病變者；(3)無溝通交流障礙者，同意參與本研究者。排除標準：(1)磁共振檢查提示梗死灶直徑>20 mm者；(2)頭頸部CT血管造影顯示頭顱內外大動脈狹窄、顱內出血性疾病或既往有腦出血、心源性腦栓塞者；(3)有腫瘤，嚴重的心、肺、肝和腎疾病及血液病；(4)有遺傳、代謝、中毒及風濕免疫系統疾病者；(5)有中樞神經系統感染、多發性硬化等中樞系統炎性脫髓鞘性疾病、腦外傷、腦腫瘤等。

1．4樣本的采集與檢測清晨空腹抽取肘動脈處外周動脈血，血液樣本保存于內含肝素的離心管中。樣本收集完30 min內采用離心機在2 000 r/min、4 ℃的條件下離心15 min，分離出血漿后置于-80 ℃的冰箱內儲藏備用。采用安迪生物科技有限公司購置的酶聯免疫分析試劑盒檢測血漿內皮生長因子水平，操作步驟嚴格按照試劑盒說明書進行，OD值在450 nm波長處進行酶標儀檢測，根據公式計算血漿血管內皮生長因子濃度(pg/mL)，每一個樣本設置3個復孔用以確保數據可用性。

圖2 腦小血管病MRI表現 A：腦白質病變；B：腦微出血；C：血管周圍間隙擴大Figure 2 MRI manifestations of cerebellar va-scular disease A：brain white matter lesions；B：slight cerebral hemorrhage；C：the perivascular space is enlarged

2 結果

2．1 3組血漿血管內皮生長因子水平比較與對照組相比，單發腔梗組、多發腔梗合并腦白質病變組血漿血管內皮生長因子均上升(P<0.05)。見表1。

2．2血漿血管內皮生長因子水平變化與腦血管病變的相關性分析血漿血管內皮生長因子與影像學病灶增多呈正相關(P<0.05)。見表1。

表1 3組血漿血管內皮生長因子水平比較及相關分析Table 1 Comparison and correlation analysis of plasma vascular endothelial growth

3 討論

3．1腦小血管病患者血漿內皮生長因子水平的變化及機制本研究顯示，腦小血管病單發腔梗組和多發腔梗合并腦白質病變組血漿血管內皮生長因子水平均較對照組上升(P<0.05)，提示腦小血管病的血漿血管內皮生長因子水平升高，進一步對腦小血管病患者血漿血管內皮生長因子水平的變化同影像學病灶增多的相關性分析發現，血漿血管內皮生長因子水平的變化與病灶數量呈正相關(P<0.05)，提示腦小血管病患者的影像學病灶越多，其血漿血管內皮生長因子水平升高越多。原因可能與腦小血管病患者腦內小動脈、微動脈、毛細血管等微小血管的損害導致腦組織缺血缺氧有關。研究表明，缺氧在血管內皮生長因子的表達調控占據主要作用[5]，其在血管內皮生長因子基因的結合位點位于啟動子區域，調控機制為細胞在缺氧的刺激下產生一種缺氧誘導蛋白，激活正常的缺氧感受基因，從而調控腦組織中血管內皮生長因子的表達；缺氧除能誘導血管內皮生長因子的表達，還能提高其mRNA的穩定性，防止其降解，從而間接提高其生理活性，促進腦組織中血管內皮生長因子的表達[6-7]。另外，缺血缺氧導致腦組織損傷時，血腦屏障的通透性會增加[8]，且腦組織中血管內皮生長因子也會進一步增加血腦屏障的通透性[9-10]。在這種情況下，腦組織中升高的血管內皮生長因子，一部分通過血腦屏障進入外周血液循環中，導致患者血漿內皮生長因子升高，并與缺氧的程度呈正相關。

3．2腦小血管病患者血漿內皮生長因子水平變化的意義近幾年來，研究表明，正常腦功能的維持和行使主要依賴于腦實質內健全完整的神經血管單元的功能及結構[11-12]。神經血管單元功能的完整性有賴于神經膠質細胞及神經元在神經遞質的轉換及傳遞過程，相互協調執行其功能；神經血管單元結構的完整性有賴于其多種組成細胞——神經和非神經細胞的完整[13]。其中，神經元及神經膠質細胞參與組成神經細胞，神經膠質細胞又包含小膠質細胞、星形膠質細胞、少突膠質細胞；非神經細胞的組成又包含血管平滑肌細胞、血管內皮細胞、基底膜和細胞外基質[14]。而腦小血管病所致的腦實質損傷范圍雖小，卻也破壞了神經血管單元功能和結構的完整性。

腦內存在某些被稱為“血管神經素”的分子，這些分子具有調節血管內皮細胞及神經元功能的作用，因此其可影響神經血管單元的完整性。血管內皮生長因子作為一種重要的腦內血管神經素，不僅可以調節血管內皮細胞的分化增殖、血管壁通透性及血管的增生等[15-16]，還可以直接調節神經元的發育和再生[17-19]、興奮性及抑制性神經遞質的傳遞[20]以及神經元細胞膜上的多種離子通道的功能[21-22]等。另外，腦損傷發生后，血管內皮生長因子可以促進神經膠質細胞向神經元轉化[23]，推動神經血管單元重塑[17]。血管內皮生長因子還具有神經保護效應，如減輕缺血性腦損傷的程度、促進腦梗死灶縮小等作用，降低腦損傷時神經細胞的死亡數[24-25]。

血管內皮生長因子在腦小血管病的發生、發展及轉歸中起一定作用，腦小血管病患者血管內皮生長因子水平的升高可能是其自我保護機制之一，且這種自我保護機制的強度可能與病灶數量呈正相關。對腦小血管病血管內皮生長因子進行更深入的研究，將為腦小血管病的預防和治療帶來新的途徑和方法。